Hygiena® AlerTox® Sticks Mustard Seeds KIT3040 – szybki test paskowy do wykrywania alergenu gorczycy, 10 testów

AlerTox® Sticks Mustard Seeds – jakościowa detekcja białek gorczycy

Hygiena® AlerTox® Sticks Mustard Seeds KIT3040 to szybki test immunochromatograficzny typu lateral flow przeznaczony do jakościowego wykrywania antygenów nasion gorczycy w żywności, próbkach ciekłych, wodzie płuczącej oraz na powierzchniach w środowisku produkcyjnym. Wynik jest oceniany wizualnie po 10 minutach, bez konieczności stosowania specjalistycznego czytnika.

Test wykorzystuje kombinację przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko Sin a 2 – głównemu alergenowi nasion gorczycy, będącemu leguminopodobnym białkiem zapasowym 11S, określanym również jako cruciferin CRU4. Producent deklaruje wykrywanie antygenów różnych odmian gorczycy, w tym gorczycy białej lub żółtej, brunatnej, czarnej, orientalnej oraz wasabi.

Aktualna dokumentacja producenta określa granicę detekcji 2 ppm białka surowych, nieprzetworzonych nasion gorczycy, czyli 2 mg/kg lub 2 mg/L próbki. Zakres detekcji wynosi 2–237 500 ppm. AlerTox® Sticks Mustard Seeds może być stosowany jako element programu zarządzania alergenami, kontroli surowców i produktów oraz weryfikacji skuteczności procesów mycia.

Kluczowe cechy AlerTox® Sticks Mustard Seeds

Szczegółowa specyfikacja techniczna

Zawartość zestawu AlerTox® Sticks Mustard Seeds KIT3040

Materiały niewchodzące w skład zestawu

W zależności od rodzaju próbki mogą być potrzebne dodatkowo: AlerTox® Polyphenol Additive ASY3213 dla odpowiednich próbek zawierających polifenole lub przeciwutleniacze, młynek, moździerz lub inny system homogenizacji, vortex lub wytrząsarka – zalecane, ale niewymagane – nożyczki do badania powierzchni oraz opcjonalnie waga cyfrowa o czułości 0,1 g.

Producent wskazuje, że dodatek polifenolowy powinien być stosowany m.in. dla czekolady 70% oraz innych problematycznych matryc po odpowiedniej walidacji. W aktualnej instrukcji kawa stanowi wyjątek i została zwalidowana bez stosowania AlerTox® Polyphenol Additive.

Zasada działania AlerTox® Sticks Mustard Seeds

Test wykorzystuje immunochromatografię przepływu bocznego. Po ekstrakcji próbki białka gorczycy obecne w materiale wiążą się ze swoistymi przeciwciałami monoklonalnymi, a powstałe kompleksy migrują kapilarnie wzdłuż membrany testowej.

Docelowym antygenem jest Sin a 2, należący do białek zapasowych nasion typu 11S. Jeżeli antygen gorczycy znajduje się w próbce na poziomie umożliwiającym detekcję, w strefie testowej T pojawia się barwna linia. Linia kontrolna C potwierdza prawidłowy przepływ próbki i poprawne działanie testu.

Intensywność linii testowej nie musi być proporcjonalna do stężenia białka gorczycy. AlerTox® Sticks Mustard Seeds jest testem jakościowym i nie może zastępować laboratoryjnej metody przeznaczonej do oznaczeń ilościowych.

Jakie odmiany gorczycy wykrywa test?

Producent deklaruje możliwość wykrywania antygenów wszystkich odmian gorczycy objętych charakterystyką zestawu, w tym:

• gorczycy białej lub żółtej – Sinapis alba,
• gorczycy brunatnej lub indyjskiej – Brassica juncea,
• gorczycy czarnej – Brassica nigra,
• gorczycy orientalnej,
• wasabi – Eutrema japonicum.

Przy interpretacji wyników należy jednak uwzględnić możliwe reakcje krzyżowe z innymi przedstawicielami rodziny kapustowatych, opisane w sekcji dotyczącej ograniczeń metody.

Zastosowanie AlerTox® Sticks Mustard Seeds

Kontrola surowców i produktów spożywczych

Test może być stosowany do jakościowej kontroli białek gorczycy w surowcach, półproduktach i produktach gotowych. Szczególne znaczenie ma w produkcji przypraw, mieszanek przyprawowych, sosów, dań gotowych, produktów mięsnych oraz innych wyrobów, w których gorczyca może być składnikiem receptury lub potencjalnym zanieczyszczeniem krzyżowym.

Producent zwalidował metodę m.in. dla nasion gorczycy czarnej, brunatnej, orientalnej i żółtej, mielonej gorczycy, mąk i frakcji gorczycowych, mieszanek przypraw, mieszanek przypraw indyjskich, czekolady 70% oraz kawy. Dla innych matryc zalecane jest potwierdzenie przydatności metody przed rutynowym zastosowaniem.

Kontrola wody płuczącej

AlerTox® Sticks Mustard Seeds może być wykorzystywany do analizy wody po płukaniu naczyń, wyposażenia kuchennego, powierzchni technologicznych i elementów maszyn tnących. Taka kontrola może wspierać weryfikację skuteczności procesu mycia po produkcji z udziałem gorczycy.

Monitoring powierzchni produkcyjnych

Do zestawu dołączone są wymazówki przeznaczone do badania powierzchni roboczych i wyposażenia. Producent zaleca pobieranie próbki z powierzchni co najmniej 16 cm² lub z linii o długości około 40 cm. W miarę możliwości zalecane jest stosowanie powtarzalnego obszaru około 4 × 4 cm.

Kontrola zanieczyszczeń krzyżowych

Test może być jednym z elementów zakładowego programu zarządzania alergenami podczas zmiany receptury, przezbrojenia linii oraz po wykonaniu procedury mycia. Wynik powinien być oceniany razem z analizą ryzyka, historią produkcji, planem pobierania próbek oraz przyjętymi działaniami korygującymi.

Pełną ofertę szybkich metod znajdziesz w kategorii testy do detekcji alergenów w żywności BestLabs oraz w kategorii testy do wykrywania pozostałych alergenów pokarmowych.

AlerTox® Sticks Mustard Seeds w workflow kontroli alergenów

1. Zidentyfikuj punkt ryzyka związany z obecnością gorczycy lub możliwością jej przeniesienia pomiędzy produktami.
2. Pobierz reprezentatywną próbkę produktu, cieczy technologicznej, wody płuczącej lub powierzchni.
3. Przygotuj ekstrakt zgodnie z procedurą właściwą dla badanego materiału.
4. W przypadku odpowiednich matryc zastosuj AlerTox® Polyphenol Additive.
5. Umieść pasek testowy w przygotowanym ekstrakcie.
6. Odczekaj dokładnie 10 minut.
7. Oceń linię kontrolną C oraz testową T.
8. Udokumentuj wynik zgodnie z wewnętrzną procedurą QA/QC.
9. W przypadku wyniku dodatniego wykonaj działania przewidziane w SOP, np. ponowne czyszczenie, dodatkowe pobranie próbek lub badanie potwierdzające.

Sposób użycia – próbki żywności stałej

1. Rozdrobnij lub homogenizuj próbkę możliwie dokładnie.
2. Umieść 1 g próbki w probówce z żółtą nakrętką.
3. Alternatywnie użyj dołączonej łyżeczki zgodnie z tabelą producenta właściwą dla rodzaju próbki.
4. Jeżeli próbka wymaga dodatku polifenolowego, dodaj go przed próbką zgodnie z aktualną instrukcją.
5. Przelej całe 10 mL buforu ekstrakcyjnego z probówki z niebieską nakrętką do próbki.
6. Zachowaj niebieską nakrętkę – będzie wykorzystana do wykonania testu.
7. Zamknij probówkę i mieszaj przez co najmniej 20 sekund przy użyciu vortexu lub energicznie ręcznie.
8. Pozostaw próbkę na 2 minuty, aby cząstki stałe mogły opaść.
9. Małą pipetą napełnij niebieską nakrętkę supernatantem.
10. W przypadku próbki o wysokiej zawartości tłuszczu unikaj pobierania warstwy tłuszczowej.
11. Wyjmij pasek z saszetki, trzymając go za niebieski koniec.
12. Umieść biały koniec paska w ekstrakcie.
13. Odczytaj wynik po 10 minutach.

Sposób użycia – próbki ciekłe i woda płucząca

1. Dokładnie wymieszaj próbkę, aby uzyskać reprezentatywną porcję.
2. Przenieś 3 mL próbki do probówki z żółtą nakrętką za pomocą pipety 3 mL.
3. Dodaj 3 mL buforu ekstrakcyjnego.
4. W przypadku gęstych cieczy, np. sosów, zastosuj ilość odpowiadającą procedurze producenta.
5. Mieszaj przez minimum 20 sekund.
6. Jeżeli próbka jest mętna, pozostaw ją na 2 minuty do sedymentacji lub odpowiednio przefiltruj.
7. Małą pipetą napełnij niebieską nakrętkę supernatantem.
8. W przypadku próbek tłustych unikaj pobierania warstwy tłuszczowej.
9. Umieść biały koniec paska testowego w przygotowanym ekstrakcie.
10. Odczytaj wynik po 10 minutach.

Sposób użycia – kontrola powierzchni

1. Użyj czystej, nieużywanej wymazówki dostarczonej w zestawie.
2. Zwilż końcówkę wymazówki w buforze ekstrakcyjnym z probówki z niebieską nakrętką.
3. Wymazuj badaną powierzchnię zdecydowanym ruchem zygzakowatym, jednocześnie obracając wymazówkę.
4. Pobierz próbkę z obszaru co najmniej 16 cm² lub z linii o długości około 40 cm.
5. Jeżeli to możliwe, stosuj powtarzalne pole około 4 × 4 cm.
6. Umieść wymazówkę w probówce z żółtą nakrętką i przytnij jej trzonek nożyczkami.
7. Przelej do probówki całą zawartość 10 mL buforu ekstrakcyjnego.
8. Dociskaj końcówkę wymazówki do wewnętrznej ściany probówki, aby wspomóc ekstrakcję próbki.
9. Zamknij probówkę i mieszaj przez minimum 20 sekund.
10. Małą pipetą napełnij niebieską nakrętkę ekstraktem.
11. Umieść biały koniec paska w przygotowanym roztworze.
12. Odczytaj wynik po 10 minutach.

Interpretacja wyniku

Intensywność linii T nie jest wiarygodną miarą stężenia białka gorczycy. AlerTox® Sticks Mustard Seeds jest testem jakościowym przeznaczonym do screeningu w ramach wewnętrznej kontroli jakości.

Ograniczenia i reakcje krzyżowe AlerTox® Sticks Mustard Seeds

Reakcje krzyżowe z nasionami roślin kapustowatych

Ze względu na podobieństwo białek zapasowych producent wskazuje wysoką reaktywność krzyżową z nasionami innych przedstawicieli rodziny kapustowatych, m.in. brokułu, brukselki, kapusty, kalafiora, chrzanu, rzodkwi, brukwi oraz rzepy.

Obecność takich nasion lub ich składników w badanej matrycy może wpływać na interpretację wyniku i powinna być uwzględniana podczas walidacji konkretnego produktu.

Rzepak i olej rzepakowy

Producent wskazuje brak reaktywności wobec rzepaku, oleju canola oraz jadalnych części – liści i korzeni – innych przedstawicieli rodziny kapustowatych. Ograniczenie reakcji krzyżowych nie dotyczy jednak nasion wymienionych powyżej.

Wpływ wysokiej temperatury

Czułość testu zmniejsza się po ogrzewaniu lub gotowaniu próbki w temperaturze przekraczającej 150°C. Przy silnie pieczonych, prażonych lub termicznie przetworzonych produktach należy dlatego zweryfikować przydatność metody dla konkretnej matrycy.

Wpływ tłuszczu

Środowisko bogate w tłuszcz, np. obecność olejów i kremów, może obniżać czułość oznaczenia. Bardzo tłuste próbki mogą również utrudniać prawidłową migrację przez membranę testową.

Niskie pH

Producent wskazuje obniżenie czułości również w matrycach o niskim pH, np. zawierających ocet lub kwas cytrynowy. Jest to szczególnie istotne w przypadku sosów, marynat i produktów zakwaszanych, w których gorczyca występuje często jako składnik.

Temperatura poniżej 18°C

Przeprowadzanie testu w temperaturze próbki poniżej 18°C może powodować obniżenie czułości. Przed wykonaniem oznaczenia próbka powinna znajdować się w zakresie 18–35°C.

Lepkie i gęste matryce

Bardzo lepkie, gęste lub wysokotłuszczowe próbki mogą migrować nieprawidłowo wzdłuż membrany chromatograficznej, powodując osłabienie lub zahamowanie linii testowej i kontrolnej. Takie próbki mogą wymagać dodatkowego rozcieńczenia oraz walidacji, co wpływa również na efektywną granicę detekcji.

Przeciążenie testu

Producent podaje zakres detekcji 2–237 500 ppm. Przy stężeniach około 5000–237 500 ppm może być obserwowane zmniejszenie intensywności sygnału wskutek przeciążenia testu. W aktualnie deklarowanym zakresie producent nie obserwuje jednak całkowitego efektu hook prowadzącego do wyniku fałszywie ujemnego.

AlerTox® Sticks Mustard Seeds a SENSIStrip Mustard

Alternatywnym rozwiązaniem do kontroli gorczycy jest SENSIStrip Mustard firmy Gold Standard Diagnostics. Dobór systemu powinien uwzględniać wymaganą czułość, liczbę testów, sposób przygotowania próbki i przyjęty workflow QA/QC.

Praktyczne informacje dotyczące drugiej metody znajdziesz również w artykule BestLabs „Wykrywanie alergenu gorczycy w żywności – szybka kontrola z użyciem testu SENSIStrip Mustard”.

Kontrola gorczycy w systemie zarządzania alergenami

Gorczyca należy do alergenów wymienionych w załączniku II rozporządzenia (UE) nr 1169/2011. W zakładach produkujących żywność monitoring jej obecności może obejmować kontrolę surowców, półproduktów, wyrobów gotowych, wody płuczącej oraz powierzchni po procesie czyszczenia.

AlerTox® Sticks Mustard Seeds może wspierać procedury realizowane w ramach HACCP, GHP, GMP, BRCGS, IFS Food lub innych systemów jakości, jednak samo zastosowanie testu nie oznacza formalnej certyfikacji zgodności produktu z danym systemem.

Producent określa test jako jakościowe narzędzie screeningowe do wewnętrznej kontroli jakości. Wynik nie powinien zastępować ilościowej analizy laboratoryjnej, jeśli taka analiza jest wymagana przez procedurę lub specyfikację produktu.

FAQ – AlerTox® Sticks Mustard Seeds

Co wykrywa AlerTox® Sticks Mustard Seeds?

Test wykrywa antygeny nasion gorczycy przy użyciu przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko Sin a 2 / cruciferin CRU4, czyli głównemu białku zapasowemu 11S nasion gorczycy.

Jaka jest granica detekcji testu?

Aktualna instrukcja producenta podaje LOD 2 ppm białka surowych, nieprzetworzonych nasion gorczycy, czyli 2 mg/kg lub 2 mg/L próbki.

Czy test wykrywa wasabi?

Tak. Producent deklaruje, że AlerTox® Sticks Mustard Seeds wykrywa antygeny różnych odmian gorczycy, w tym również wasabi.

Czy test może reagować z innymi roślinami?

Tak. Wysoka reaktywność krzyżowa może wystąpić z nasionami innych roślin kapustowatych, m.in. brokułu, brukselki, kapusty, kalafiora, chrzanu, rzodkwi, brukwi i rzepy.

Czy wysoka temperatura wpływa na wynik?

Tak. Producent wskazuje, że czułość testu zmniejsza się po ogrzewaniu próbki powyżej 150°C. Należy to uwzględnić w przypadku silnie przetworzonej termicznie żywności.

Czy AlerTox® Sticks Mustard Seeds jest testem ilościowym?

Nie. Jest to test jakościowy. Intensywność linii testowej nie jest podstawą do określania dokładnego stężenia białka gorczycy.

Dobór testu do monitorowania alergenu gorczycy

Hygiena® AlerTox® Sticks Mustard Seeds KIT3040 umożliwia jakościowy screening białka gorczycy w żywności, wodzie płuczącej i na powierzchniach. LOD 2 ppm, brak konieczności stosowania specjalistycznego czytnika oraz wizualny odczyt po 10 minutach ułatwiają wykorzystanie testu w rutynowej kontroli QA/QC. Przy interpretacji szczególnie ważne jest jednak uwzględnienie możliwych reakcji krzyżowych z nasionami innych roślin kapustowatych, wpływu wysokiej temperatury, niskiego pH i tłuszczu oraz walidacji konkretnej matrycy.