Hygiena® AlerTox® Sticks Walnut KIT3092 – szybki test paskowy do wykrywania alergenu orzecha włoskiego, 10 testów

AlerTox® Sticks Walnut – jakościowe wykrywanie białka orzecha włoskiego

Hygiena® AlerTox® Sticks Walnut KIT3092 to szybki test immunochromatograficzny typu lateral flow przeznaczony do jakościowego wykrywania antygenu orzecha włoskiego pospolitego (Juglans regia) w żywności, próbkach ciekłych, wodzie płuczącej oraz na powierzchniach w środowisku produkcyjnym. Wynik testu jest oceniany wizualnie po 10 minutach i nie wymaga zastosowania specjalistycznego czytnika.

Metoda wykorzystuje kombinację przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko Jug r 4 – głównemu białku zapasowemu orzecha włoskiego należącemu do globulin 11S. Dzięki temu test może wspierać kontrolę surowców i produktów, monitoring zanieczyszczeń krzyżowych oraz weryfikację skuteczności procesów mycia w zakładach przemysłu spożywczego i laboratoriach QA/QC.

Aktualna instrukcja producenta określa granicę detekcji na poziomie 2,25 ppm białka orzecha włoskiego, czyli 2,25 mg/kg lub 2,25 mg/L próbki, oraz zakres detekcji 2,25–206 000 ppm. Dla suchej powierzchni badanej zwilżoną wymazówką producent podaje orientacyjny LOD około 4 µg białka orzecha włoskiego/16 cm². AlerTox® Sticks Walnut jest testem jakościowym – intensywność linii testowej nie może być wykorzystywana do ilościowego oznaczania stężenia alergenu.

Kluczowe cechy AlerTox® Sticks Walnut KIT3092

Specyfikacja techniczna

Zawartość zestawu AlerTox® Sticks Walnut KIT3092

Materiały niewchodzące w skład zestawu

W zależności od rodzaju próbki mogą być potrzebne dodatkowo: młynek, moździerz lub inny ręczny albo automatyczny system homogenizacji, mieszadło typu vortex lub wytrząsarka – zalecane, ale niewymagane – nożyczki podczas pobierania próbek powierzchniowych oraz opcjonalnie waga cyfrowa o czułości 0,1 g.

Zasada działania AlerTox® Sticks Walnut

AlerTox® Sticks Walnut działa na zasadzie immunochromatografii przepływu bocznego. Po ekstrakcji próbki antygen orzecha włoskiego wiąże się ze swoistymi przeciwciałami, a następnie powstałe kompleksy migrują kapilarnie wzdłuż membrany paska testowego.

Docelowym antygenem jest Jug r 4 – białko zapasowe należące do globulin 11S, występujące w nasionach orzecha włoskiego pospolitego Juglans regia. Jeśli antygen występuje w próbce na poziomie umożliwiającym detekcję, w strefie testowej T pojawia się barwna linia.

Linia kontrolna C potwierdza prawidłową migrację próbki oraz działanie testu. Intensywność linii T może się różnić, jednak nie jest wiarygodnym wskaźnikiem ilości antygenu. Producent jednoznacznie klasyfikuje AlerTox® Sticks Walnut jako test jakościowy.

Swoistość – orzech włoski pospolity, pekan i orzech czarny

Istotną cechą metody jest jej ukierunkowanie na orzech włoski pospolity Juglans regia. Producent podkreśla, że mimo bliskiego pokrewieństwa botanicznego z pekanem (Carya illinoinensis) oraz orzechem czarnym (Juglans nigra), test nie wykazuje reaktywności krzyżowej z pekanem ani orzechem czarnym.

Oznacza to, że nazwy „walnut” lub „orzech włoski” nie należy interpretować jako ogólnej detekcji wszystkich przedstawicieli rodziny Juglandaceae. Test jest swoisty dla antygenu Jug r 4 z Juglans regia.

Producent nie deklaruje również wykrywania antygenów innych badanych orzechów, w tym orzeszka ziemnego, orzecha laskowego, migdała, makadamii, pistacji, nerkowca, orzecha brazylijskiego i kokosa, ani antygenów zbóż i roślin strączkowych.

Zastosowanie AlerTox® Sticks Walnut

Kontrola surowców i produktów spożywczych

Test może być wykorzystywany do jakościowego wykrywania białka orzecha włoskiego w surowcach, półproduktach i produktach gotowych. Producent zwalidował metodę między innymi dla wyrobów piekarniczych, deserów mlecznych, produktów zbożowych, muesli, batonów proteinowych, sera, napojów zbożowych i orzechowych, jogurtów, czekolady, batonów czekoladowych, orzechów, past orzechowych i wafli.

Dla matryc niewymienionych w walidacji producent zaleca przeprowadzenie własnej oceny fit-for-use przed wdrożeniem testu do rutynowej kontroli.

Kontrola wody płuczącej

AlerTox® Sticks Walnut umożliwia analizę wody po płukaniu naczyń, powierzchni technologicznych oraz urządzeń tnących. Taki sposób pobierania próbek może być wykorzystywany jako jeden z elementów weryfikacji procedur mycia po kontakcie linii z orzechem włoskim.

Monitoring powierzchni produkcyjnych

Zestaw zawiera wymazówki umożliwiające pobieranie materiału z powierzchni roboczych i wyposażenia. Producent zaleca kontrolę obszaru co najmniej 16 cm² albo linii o długości około 40 cm. Jeżeli geometria powierzchni na to pozwala, preferowane jest powtarzalne pole około 4 × 4 cm.

Kontrola zanieczyszczeń krzyżowych

Test może stanowić element zakładowego programu zarządzania alergenami, szczególnie podczas zmian receptury, przezbrojeń linii oraz po zakończeniu procesu mycia. Wynik powinien być interpretowany łącznie z analizą ryzyka, historią produkcji, planem pobierania próbek i przyjętymi działaniami korygującymi.

Inne rozwiązania do kontroli alergenów orzechowych znajdują się w kategorii testy do wykrywania alergenów orzechowych BestLabs oraz w szerszej kategorii detekcja alergenów w żywności.

AlerTox® Sticks Walnut w workflow kontroli alergenów

1. Zidentyfikuj punkt ryzyka związany z wykorzystaniem orzecha włoskiego lub możliwością zanieczyszczenia krzyżowego.
2. Pobierz reprezentatywną próbkę produktu, cieczy technologicznej, wody płuczącej albo powierzchni.
3. Przeprowadź ekstrakcję zgodnie z procedurą odpowiednią dla rodzaju próbki.
4. Umieść pasek testowy w przygotowanym ekstrakcie.
5. Odczekaj dokładnie 10 minut.
6. Oceń linię kontrolną C oraz linię testową T.
7. Udokumentuj wynik zgodnie z obowiązującą procedurą QA/QC.
8. W przypadku wyniku dodatniego zastosuj działania określone w SOP, np. ponowne czyszczenie, rozszerzenie kontroli albo badanie potwierdzające.

Sposób użycia – próbki żywności stałej

1. Doprowadź próbkę do temperatury 18–35°C.
2. Rozdrobnij lub homogenizuj materiał tak dokładnie, jak jest to praktycznie możliwe.
3. Umieść 1 g próbki w probówce z żółtą nakrętką.
4. Alternatywnie użyj dołączonej łyżeczki według tabeli producenta: dla mąk i drobnych proszków oraz drobnych okruchów stosuje się 2 łyżeczki, a dla mięsa, ryb i produktów peklowanych – 1 łyżeczkę.
5. Przelej całą zawartość 10 mL buforu ekstrakcyjnego z probówki z niebieską nakrętką do próbki.
6. Zachowaj niebieską nakrętkę – będzie potrzebna podczas wykonywania testu.
7. Zamknij probówkę i mieszaj przez minimum 20 sekund na vortexie lub energicznie ręcznie.
8. Pozostaw próbkę na 2 minuty, aby cząstki stałe mogły opaść.
9. Za pomocą małej pipety napełnij niebieską nakrętkę supernatantem.
10. W próbkach o wysokiej zawartości tłuszczu unikaj pobierania warstwy tłuszczowej.
11. Wyjmij pasek z saszetki, trzymając go wyłącznie za niebieski koniec.
12. Umieść biały koniec paska w ekstrakcie znajdującym się w niebieskiej nakrętce.
13. Odczytaj wynik po 10 minutach.

Producent zaznacza, aby nie interpretować wyniku po czasie dłuższym niż 10 minut, ponieważ wygląd paska może ulec zmianie.

Sposób użycia – próbki ciekłe i woda płucząca

1. Dokładnie wymieszaj badaną ciecz, aby pobrana porcja była reprezentatywna.
2. Za pomocą dostarczonej pipety przenieś 3 mL próbki do probówki z żółtą nakrętką.
3. W przypadku gęstych produktów, np. jogurtu lub sosu, zastosuj ilość odpowiadającą tabeli producenta.
4. Dodaj 3 mL buforu ekstrakcyjnego.
5. Mieszaj przez co najmniej 20 sekund.
6. Jeżeli próbka jest mętna, pozostaw ją na około 2 minuty do sedymentacji albo odpowiednio przefiltruj.
7. Małą pipetą napełnij niebieską nakrętkę supernatantem.
8. W przypadku próbek wysokotłuszczowych unikaj pobierania warstwy tłuszczowej.
9. Umieść biały koniec paska testowego w przygotowanym ekstrakcie.
10. Odczytaj wynik po 10 minutach.

Sposób użycia – kontrola powierzchni

1. Do każdego punktu pomiarowego zastosuj czystą, nieużywaną wymazówkę.
2. Zwilż końcówkę wymazówki w buforze ekstrakcyjnym z probówki z niebieską nakrętką.
3. Mocno pocieraj i obracaj wymazówkę po badanej powierzchni, prowadząc ją ruchem zygzakowatym.
4. Pobierz próbkę z obszaru co najmniej 16 cm² lub z linii o długości około 40 cm.
5. W miarę możliwości stosuj powtarzalny obszar około 4 × 4 cm.
6. Umieść wymazówkę w probówce z żółtą nakrętką i przytnij jej trzonek nożyczkami.
7. Przelej całą zawartość 10 mL buforu ekstrakcyjnego do probówki.
8. Dociśnij końcówkę wymazówki do wewnętrznej ścianki probówki w celu ułatwienia ekstrakcji materiału.
9. Zamknij probówkę i mieszaj przez co najmniej 20 sekund.
10. Za pomocą małej pipety napełnij niebieską nakrętkę ekstraktem.
11. Umieść biały koniec paska w przygotowanym roztworze.
12. Odczytaj wynik po 10 minutach.

Interpretacja wyniku AlerTox® Sticks Walnut

Barwa linii testowej może mieć różną intensywność, jednak nie jest ona proporcjonalna do stężenia białka orzecha włoskiego. AlerTox® Sticks Walnut nie powinien być używany jako metoda półilościowa lub ilościowa.

Ograniczenia metody

Test jest swoisty dla Juglans regia

AlerTox® Sticks Walnut został opracowany do wykrywania antygenu Jug r 4 orzecha włoskiego pospolitego. Producent nie deklaruje detekcji wszystkich gatunków określanych potocznie jako „walnut”. W szczególności test nie wykazuje reaktywności z orzechem czarnym Juglans nigra.

Pekan nie jest wykrywany

Mimo bliskiego pokrewieństwa pekanu z orzechem włoskim test nie wykazuje reaktywności krzyżowej z pekanem. Do kontroli pekanu należy stosować test przeznaczony do tego konkretnego alergenu.

Wpływ wysokiej zawartości tłuszczu

Producent wskazuje, że czułość testu zmniejsza się w środowisku bogatym w tłuszcz, np. w obecności olejów lub kremów. Jest to istotne przy badaniu past, nadzień, kremów cukierniczych i innych produktów wysokotłuszczowych.

Lepkie i gęste próbki

Bardzo lepkie, gęste lub wysokotłuszczowe próbki mogą migrować nieprawidłowo wzdłuż membrany chromatograficznej, powodując osłabienie lub zahamowanie linii testowej i kontrolnej. Takie matryce mogą wymagać większego rozcieńczenia, co wpływa jednocześnie na efektywną granicę detekcji.

Przeciążenie testu

Zakres detekcji wynosi 2,25–206 000 ppm. Przy stężeniach około 10 000–206 000 ppm producent może obserwować zmniejszenie intensywności sygnału wskutek przeciążenia testu. W deklarowanym zakresie nie zaobserwowano jednak całkowitego efektu hook prowadzącego do wyniku fałszywie ujemnego.

Walidacja konkretnej matrycy

Producent zaleca, aby matryce niewalidowane wcześniej dla AlerTox® Sticks Walnut poddać własnej ocenie fit-for-use. Wynik testu należy rozpatrywać w kontekście rodzaju produktu, sposobu przygotowania próbki oraz obowiązującego programu kontroli jakości.

AlerTox® Sticks Walnut a inne testy do alergenów orzechowych

Każdy test powinien być dobrany do konkretnego alergenu. AlerTox® Sticks Walnut nie zastępuje testów przeznaczonych do migdałów, orzecha laskowego czy orzeszka ziemnego.

AlerTox® Sticks Walnut a SENSIStrip® Walnut

Alternatywną metodą do szybkiej kontroli alergenu orzecha włoskiego jest SENSIStrip® Walnut. Jest to również test oparty na technologii lateral flow, jednak wykorzystuje odmienny system odczynników i procedurę wykonania.

Dobór metody powinien uwzględniać oczekiwaną czułość, konkretną matrycę, gatunek orzecha, liczbę wykonywanych oznaczeń oraz przyjęty workflow kontroli jakości. Więcej informacji o szybkich testach lateral flow można znaleźć w materiale BestLabs „SENSIStrip® – szybkie testy paskowe do wykrywania alergenów w żywności i środowisku produkcyjnym”.

Kontrola alergenu orzecha włoskiego w systemie jakości

Orzechy i produkty pochodne należą do grup alergenów objętych obowiązkiem deklarowania zgodnie z załącznikiem II rozporządzenia (UE) nr 1169/2011. Wewnętrzny program zarządzania alergenami może obejmować kontrolę dostaw, segregację surowców, organizację kolejności produkcji, walidację i weryfikację mycia oraz badanie wybranych produktów i powierzchni.

AlerTox® Sticks Walnut może wspierać działania prowadzone w ramach systemów HACCP, GHP, GMP, BRCGS, IFS Food lub innych programów zarządzania bezpieczeństwem żywności. Samo wykorzystanie testu nie oznacza jednak formalnej certyfikacji zgodności produktu z tymi systemami.

Producent określa zastosowanie zestawu jako research and development, quality assurance oraz quality control pod nadzorem odpowiednio wykwalifikowanego personelu. Wynik powinien być wykorzystywany w połączeniu z regularnym programem zapewnienia jakości i nie powinien stanowić jedynej podstawy do zwolnienia produktu do konsumpcji.

Szersze informacje o metodach monitorowania alergenów znajdują się w artykule BestLabs „Diagnostyka alergenów pokarmowych – jak skutecznie wykrywać zagrożenia w żywności?”.

FAQ – AlerTox® Sticks Walnut

Jaka jest granica detekcji AlerTox® Sticks Walnut?

Aktualna instrukcja Hygiena podaje LOD 2,25 ppm białka orzecha włoskiego, czyli 2,25 mg/kg lub 2,25 mg/L próbki. Zakres detekcji wynosi 2,25–206 000 ppm.

Jakie białko wykrywa AlerTox® Sticks Walnut?

Test wykorzystuje przeciwciała skierowane przeciwko Jug r 4 – białku zapasowemu 11S występującemu w orzechu włoskim pospolitym Juglans regia.

Czy test wykrywa również pekan?

Nie. Producent wskazuje brak reaktywności krzyżowej z pekanem mimo bliskiego pokrewieństwa tego gatunku z orzechem włoskim.

Czy AlerTox® Sticks Walnut wykrywa orzech czarny?

Nie. Producent podaje brak reaktywności z orzechem czarnym Juglans nigra. Test jest swoisty dla orzecha włoskiego pospolitego Juglans regia.

Czy test można stosować do powierzchni?

Tak. Dla suchej powierzchni badanej zwilżoną wymazówką producent podaje orientacyjny LOD około 4 µg białka orzecha włoskiego na 16 cm². Zalecane jest pobieranie próbki z pola około 4 × 4 cm, jeżeli pozwala na to geometria powierzchni.

Czy AlerTox® Sticks Walnut jest testem półilościowym?

Nie. Aktualna instrukcja producenta określa AlerTox® Sticks Walnut jako test jakościowy. Intensywność linii testowej nie powinna być wykorzystywana do określania stężenia alergenu.

Dobór testu do monitorowania alergenu orzecha włoskiego

Hygiena® AlerTox® Sticks Walnut KIT3092 umożliwia jakościowy screening białka orzecha włoskiego pospolitego w żywności, wodzie płuczącej i na powierzchniach produkcyjnych. LOD 2,25 ppm, wizualny odczyt po 10 minutach oraz brak konieczności stosowania specjalistycznego czytnika ułatwiają wykorzystanie testu w rutynowej kontroli QA/QC. Przy doborze metody szczególnie istotne jest jednak uwzględnienie jej swoistości dla Juglans regia, braku detekcji pekanu i orzecha czarnego oraz możliwości obniżenia czułości w matrycach wysokotłuszczowych, gęstych i lepkich.