Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar - Chapman Medium, pożywka sypka do izolacji i różnicowania gronkowców, 500 g

Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar CM0085B - Chapman Medium to wysoce selektywna i różnicująca pożywka mikrobiologiczna do izolacji gronkowców, w szczególności przypuszczalnie chorobotwórczych szczepów Staphylococcus. Podłoże umożliwia jednoczesną selekcję mikroorganizmów tolerujących wysokie stężenie soli oraz ich wstępne różnicowanie na podstawie fermentacji mannitolu.

Kluczowym elementem formulacji jest chlorek sodu w stężeniu 75 g/l - 7,5%. Tak wysokie zasolenie hamuje wzrost wielu bakterii innych niż gronkowce, zapewniając selektywne warunki hodowli. Jednocześnie obecność mannitolu oraz czerwieni fenolowej umożliwia wizualną ocenę metabolizmu tego cukru.

Typowe szczepy Staphylococcus aureus fermentujące mannitol powodują zakwaszenie środowiska i zmianę barwy wskaźnika, tworząc żółte kolonie otoczone żółtą strefą. Staphylococcus epidermidis typowo tworzy natomiast różowe kolonie na różowym podłożu.

Zmiana barwy na Mannitol Salt Agar ma charakter presumptywny i nie stanowi samodzielnego potwierdzenia gatunku. Kolonie podejrzane o S. aureus powinny zostać poddane dalszej identyfikacji zgodnie z aktualną procedurą laboratoryjną.

Wariant CM0085B zawiera 500 g odwodnionego podłoża i pozwala przygotować około 4,5 l gotowego Mannitol Salt Agar. Produkt znajduje zastosowanie w laboratoriach diagnostycznych, badaniach żywności, mleka, ryb oraz innych próbek objętych właściwą metodą badawczą.

Sprawdź także podłoża mikrobiologiczne sypkie, pełną kategorię podłoża mikrobiologiczne, produkty do badań mikrobiologicznych żywności oraz rozwiązania dla laboratoriów kontroli jakości.

Mannitol Salt Agar - Chapman Medium do selektywnej izolacji Staphylococcus spp.

Mannitol Salt Agar, określany także jako Chapman Medium, łączy dwa mechanizmy istotne w diagnostyce mikrobiologicznej - selekcję na podstawie tolerancji wysokiego stężenia NaCl oraz różnicowanie wynikające ze zdolności do fermentowania mannitolu.

Gronkowce charakteryzują się stosunkowo wysoką tolerancją na zasolenie, dlatego mogą rozwijać się w środowisku zawierającym 7,5% chlorku sodu, podczas gdy wiele innych bakterii zostaje zahamowanych.

Uzyskany wzrost można następnie ocenić pod względem reakcji fermentacyjnej. Powstające podczas fermentacji mannitolu kwasy obniżają pH podłoża, powodując przejście czerwieni fenolowej z barwy czerwono-różowej w żółtą.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar CM0085B

Specyfikacja techniczna Mannitol Salt Agar CM0085B

Skład Mannitol Salt Agar - Chapman Medium

* Jest to typowa formulacja Thermo Scientific™ Oxoid™. Producent może dostosowywać skład w zakresie wymaganym do spełnienia określonych parametrów jakościowych produktu.

7,5% NaCl - mechanizm selektywności Mannitol Salt Agar

75 g chlorku sodu na litr podłoża tworzy środowisko o wysokim ciśnieniu osmotycznym. Większość bakterii nie toleruje takich warunków i zostaje zahamowana lub wykazuje znacznie ograniczony wzrost.

Gronkowce są relatywnie halotolerancyjne, dlatego wiele szczepów Staphylococcus może rozwijać się na Mannitol Salt Agar mimo wysokiej zawartości soli.

Selektywność nie jest jednak absolutna. Producent wskazuje, że na podłożu mogą rosnąć również niektóre inne mikroorganizmy tolerujące wysokie zasolenie, w tym wybrane organizmy halofilne.

Dlatego sam wzrost na podłożu nie oznacza automatycznie przynależności izolatu do rodzaju Staphylococcus.

Fermentacja mannitolu i czerwień fenolowa

Drugim mechanizmem działania podłoża jest różnicowanie na podstawie fermentacji mannitolu. Mannitol jest obecny w stężeniu 10 g/l i pełni funkcję metabolizowanego substratu.

Jeżeli rosnący mikroorganizm fermentuje mannitol, powstają kwaśne produkty metabolizmu. Obniżenie pH jest wykrywane przez czerwień fenolową.

Reakcja ta pozwala szybko uzyskać informację o fenotypie fermentacyjnym izolatu.

Staphylococcus aureus na Mannitol Salt Agar

W kontroli jakości producenta Staphylococcus aureus ATCC® 25923™ oraz ATCC® 6538™ tworzą po odpowiedniej inkubacji żółte kolonie o średnicy około 0,5-2 mm z żółtą strefą.

Podobną reakcję producent obserwuje dla szczepu MRSA NCTC 10442, który tworzy żółte kolonie z żółtym halo.

Żółknięcie jest konsekwencją fermentacji mannitolu i wstępnie wskazuje na fenotyp zgodny z S. aureus.

Nie jest to jednak ostateczne potwierdzenie Staphylococcus aureus. Aktualne IFU producenta klasyfikuje identyfikację jako presumptywną i wskazuje konieczność dalszego potwierdzenia kolonii odpowiednimi metodami biochemicznymi lub serologicznymi.

Staphylococcus epidermidis na Mannitol Salt Agar

Staphylococcus epidermidis toleruje wysokie stężenie NaCl i może rosnąć na Mannitol Salt Agar, ale typowo nie powoduje intensywnej fermentacji mannitolu charakterystycznej dla typowych szczepów S. aureus.

W kontroli jakości S. epidermidis ATCC® 12228™ tworzy różowe kolonie o średnicy około 0,5-2 mm, a podłoże pozostaje różowe.

Porównanie reakcji żółtej i różowej jest podstawą klasycznego wykorzystania Chapman Medium do wstępnego różnicowania wybranych gronkowców.

Typowe reakcje na Mannitol Salt Agar

Przygotowanie Mannitol Salt Agar z proszku

Producent określa przygotowanie podłoża CM0085B według następującej receptury:

Powyższa sekcja stanowi skrót informacyjny. Podczas przygotowania medium należy kierować się aktualnym IFU Thermo Scientific™ Oxoid™, wewnętrznym SOP oraz wymaganiami systemu jakości.

Do samodzielnego przygotowania podłoży można dobrać płytki Petriego oraz odpowiednie wyposażenie laboratoryjne dostępne w BestLabs.

Wydajność opakowania 500 g

Do przygotowania 1 litra gotowego medium wymagane jest 111 g produktu. Oznacza to, że opakowanie 500 g pozwala przygotować około 4,5 l Mannitol Salt Agar.

Forma sypka jest szczególnie wygodna dla laboratoriów, które samodzielnie przygotowują serie podłoży i chcą kontrolować:

• objętość przygotowywanej partii,
• format używanych naczyń hodowlanych,
• parametry sterylizacji,
• pH gotowego medium,
• kontrolę wzrostową przygotowanej partii,
• rejestrację procesu w dokumentacji jakościowej.

Warunki inkubacji

Warunki inkubacji powinny być zawsze dostosowane do rodzaju próbki i obowiązującej metody badawczej.

W procedurze kontroli jakości Thermo Scientific™ Oxoid™ dla CM0085 producent ocenia reakcje mikroorganizmów między innymi po 36 godzinach inkubacji w temperaturze 37°C. Warunki te są parametrami kontroli jakości produktu i nie powinny być automatycznie traktowane jako uniwersalna procedura dla każdego materiału badanego.

W przypadku metod normatywnych, farmakopealnych, klinicznych lub przemysłowych należy stosować parametry przewidziane w odpowiednim dokumencie referencyjnym.

Zastosowanie w badaniu żywności

Producent wskazuje możliwość wykorzystania Mannitol Salt Agar do badań mleka, żywności, ryb i innych próbek nieklinicznych.

W laboratoriach przemysłu spożywczego podłoże może być stosowane jako element procedur związanych z:

• wykrywaniem gronkowców,
• wstępną izolacją Staphylococcus aureus,
• kontrolą surowców,
• kontrolą produktów gotowych,
• badaniami higieny procesu produkcyjnego,
• mikrobiologiczną kontrolą jakości.

Sprawdź ofertę produktów do badań mikrobiologicznych żywności oraz kontroli jakości.

Zastosowanie w przemyśle mleczarskim

Mleko i produkty mleczne należą do materiałów nieklinicznych wymienianych przez producenta w zakresie zastosowania Mannitol Salt Agar. Podłoże może stanowić element procedury ukierunkowanej na izolację i wstępne różnicowanie gronkowców.

Wynik uzyskany na podłożu powinien być interpretowany wraz z pozostałymi etapami właściwej metody - od pobrania i przygotowania próbki, przez posiew, aż po potwierdzenie i identyfikację izolatu.

Zastosowanie w diagnostyce klinicznej

Aktualne IFU producenta wskazuje także zastosowanie Mannitol Salt Agar do izolacji potencjalnie chorobotwórczych gronkowców z próbek klinicznych, w tym materiału z ran, kału oraz dróg oddechowych.

Produkt jest przeznaczony do profesjonalnego workflow diagnostycznego i nie powinien być stosowany jako samodzielny test rozstrzygający.

Ostateczna identyfikacja kolonii powinna być wykonywana odpowiednimi metodami potwierdzającymi zgodnie z procedurami laboratorium.

Dlaczego żółta kolonia nie oznacza automatycznie S. aureus?

Fermentacja mannitolu jest przydatną cechą różnicującą, ale nie jest cechą absolutnie swoistą wyłącznie dla Staphylococcus aureus. Niektóre inne mikroorganizmy zdolne do wzrostu w warunkach wysokiego zasolenia mogą również metabolizować mannitol i powodować zakwaszenie podłoża.

Z tego względu producent określa identyfikację na Mannitol Salt Agar jako presumptive - wstępną.

W zależności od celu badania kolejne etapy mogą obejmować odpowiednie testy biochemiczne, serologiczne, systemy identyfikacyjne, MALDI-TOF lub metody molekularne.

Kontrola jakości Mannitol Salt Agar

Thermo Scientific™ Oxoid™ wykorzystuje w ocenie właściwości podłoża odpowiednie szczepy referencyjne. Aktualna specyfikacja obejmuje między innymi:

• Staphylococcus aureus ATCC® 25923™ - żółte kolonie z żółtym halo,
• Staphylococcus aureus ATCC® 6538™ - żółte kolonie z żółtym halo,
• Staphylococcus aureus MRSA NCTC 10442 - żółte kolonie z żółtym halo,
• Staphylococcus epidermidis ATCC® 12228™ - różowe kolonie i różowe podłoże,
• Escherichia coli ATCC® 25922™ - brak wzrostu,
• Proteus mirabilis ATCC® 29906™ - bardzo małe różowe kolonie bez pełzania w warunkach testu QC.

Producent wykorzystuje jako podłoże kontrolne Tryptone Soya Agar. Zakres rutynowej kontroli jakości przeprowadzanej przez użytkownika powinien być dostosowany do zamierzonego zastosowania, wymagań lokalnych i systemu jakości laboratorium.

Materiały referencyjne można dobrać w kategorii szczepy kontrolne.

Ograniczenia metody

Mannitol Salt Agar jest podłożem selektywno-różnicującym, a nie samodzielnym testem potwierdzającym gatunek.

Podczas interpretacji należy uwzględnić, że:

• nie wszystkie mikroorganizmy inne niż gronkowce są całkowicie hamowane,
• na podłożu mogą rozwijać się niektóre organizmy halotolerancyjne lub halofilne,
• fermentacja mannitolu nie jest wyłącznie cechą S. aureus,
• nietypowe szczepy mogą wykazywać reakcje odbiegające od wzorca,
• kolonie podejrzane należy potwierdzić odpowiednią metodą,
• wynik należy interpretować w kontekście rodzaju próbki i całej procedury diagnostycznej.

Przechowywanie

Odwodniony Mannitol Salt Agar CM0085B należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 10-30°C. Pojemnik powinien być szczelnie zamknięty i chroniony przed światłem.

Po pierwszym otwarciu należy ograniczać przedostawanie się wilgoci do opakowania. Zawilgocenie odwodnionego podłoża może prowadzić do zbrylania proszku i pogorszenia jego właściwości użytkowych.

Po rekonstytucji producent wskazuje przechowywanie przygotowanego medium w temperaturze 2-10°C. Przed użyciem należy umożliwić przygotowanemu podłożu osiągnięcie odpowiednich warunków zgodnie z aktualnym IFU.

Nie należy stosować produktu po upływie terminu ważności ani w przypadku widocznych oznak pogorszenia jakości lub kontaminacji.

Ergonomia i organizacja przygotowania podłoży

Forma sypka pozwala laboratorium przygotować dokładnie taką ilość medium, jaka jest wymagana dla aktualnej serii badań. Opakowanie 500 g zapewnia około 4,5 l gotowego podłoża.

Przygotowanie własnych partii umożliwia również dokumentowanie procesu w ramach:

• SOP,
• rejestracji numeru LOT zastosowanego proszku,
• kontroli masy i objętości,
• rejestracji parametrów autoklawowania,
• kontroli pH,
• kontroli właściwości wzrostowych,
• systemów GLP, GMP i LIMS.

Pełną ofertę podobnych produktów znajdziesz w kategorii pożywki sypkie.

IVD, bezpieczeństwo, GLP i GMP

Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar CM0085B jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania laboratoryjnego.

Próbki kliniczne i wyhodowane mikroorganizmy należy traktować jako potencjalnie zakaźne. Personel powinien stosować właściwe procedury bezpieczeństwa biologicznego oraz odpowiednie środki ochrony indywidualnej.

Po zakończeniu badań wykorzystane płytki, hodowle i inne materiały mające kontakt z mikroorganizmami powinny zostać zdekontaminowane i zutylizowane zgodnie z procedurami laboratorium.

Produkt może stanowić element procedur prowadzonych zgodnie z GLP, GMP, SOP i systemami zarządzania jakością, jeśli został prawidłowo dobrany, zweryfikowany i objęty odpowiednią kontrolą jakości.

Samo zastosowanie Mannitol Salt Agar nie zapewnia automatycznej zgodności całego badania z GLP, GMP ani konkretną normą.

Zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar CM0085B może być stosowany w:

• laboratoriach mikrobiologicznych,
• laboratoriach diagnostycznych,
• badaniach Staphylococcus spp.,
• wstępnej izolacji Staphylococcus aureus,
• badaniach mleka i produktów mlecznych,
• badaniach mikrobiologicznych żywności,
• badaniach ryb i produktów rybnych,
• laboratoriach kontroli jakości,
• procedurach badania wybranych próbek klinicznych,
• badaniach naukowych i R&D,
• procedurach wykorzystujących selektywną izolację gronkowców.

FAQ - Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar CM0085B

Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar w ofercie BestLabs

Thermo Scientific™ Oxoid™ Mannitol Salt Agar CM0085B to profesjonalna, selektywno-różnicująca pożywka do pracy z gronkowcami. Połączenie 7,5% NaCl, mannitolu i czerwieni fenolowej pozwala ograniczyć rozwój wielu mikroorganizmów niedocelowych i jednocześnie wizualnie ocenić fermentację mannitolu.

Opakowanie 500 g o wydajności około 4,5 l jest przeznaczone dla laboratoriów przygotowujących własne serie podłoży do badań diagnostycznych, żywności, mleka i innych materiałów wymagających selektywnej izolacji Staphylococcus spp.

Sprawdź również pozostałe podłoża sypkie, podłoża mikrobiologiczne, produkty do badań żywności, szczepy kontrolne oraz rozwiązania dla działów kontroli jakości.