Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar - chromogenne podłoże do screeningu bakterii wytwarzających ESBL, 10 płytek 90 mm

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar PO5302A to gotowe, selektywne podłoże chromogenne do jakościowego screeningu bakterii wytwarzających beta-laktamazy o rozszerzonym spektrum działania - ESBL. Medium jest przeznaczone do badań przesiewowych próbek kału i wymazów z odbytnicy oraz do pracy z wyizolowanymi izolatami klinicznymi w profesjonalnym laboratorium mikrobiologicznym.

Brilliance™ ESBL Agar łączy selekcję antybiotykową z różnicowaniem chromogennym. Zastosowanie dwóch chromogenów pozwala uzyskiwać charakterystyczne barwy kolonii wybranych grup bakterii, natomiast cefpodoksym, inhibitor AmpC oraz pozostałe składniki selektywne pomagają ograniczać wzrost flory konkurencyjnej i zwiększać użyteczność medium w screeningu nosicielstwa bakterii ESBL.

Po prawidłowej inkubacji Escherichia coli tworzy typowo kolonie niebieskie, a w rzadkich przypadkach różowe. Bakterie należące do grupy KESC - Klebsiella, Enterobacter, Serratia i Citrobacter - tworzą kolonie zielone. Gatunki Proteus, Morganella i Providencia mogą tworzyć brązowe kolonie z brązową otoczką, natomiast część innych bakterii może pozostawać bezbarwna.

Brilliance™ ESBL Agar jest podłożem przesiewowym. Wzrost i zabarwienie kolonii wskazują na podejrzenie obecności organizmu wytwarzającego ESBL, ale nie stanowią samodzielnego potwierdzenia mechanizmu oporności ani ostatecznej identyfikacji gatunkowej. Podejrzane izolaty należy potwierdzić odpowiednią metodą zgodnie z aktualnym workflow laboratorium.

Dokładny wariant PO5302A zawiera 10 gotowych płytek o średnicy 90 mm. Produkt jest wyrobem medycznym do diagnostyki in vitro - IVD, przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania.

Sprawdź również podłoża gotowe na płytkach, podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne, krążki antybiotykowe oraz gradientowe paski diagnostyczne MIC.

Brilliance™ ESBL Agar - szybki screening mechanizmów ESBL

ESBL - Extended-Spectrum Beta-Lactamases - to beta-laktamazy o rozszerzonym spektrum substratowym, występujące szczególnie często u Gram-ujemnych pałeczek z grupy Enterobacterales. Enzymy te mogą hydrolizować wiele antybiotyków beta-laktamowych, w tym określone penicyliny i cefalosporyny o rozszerzonym spektrum.

Geny kodujące wiele ESBL są zlokalizowane na mobilnych elementach genetycznych, przede wszystkim plazmidach, co sprzyja ich przenoszeniu pomiędzy szczepami i gatunkami bakterii.

W praktyce mikrobiologii klinicznej istotne jest dlatego możliwie szybkie wykrywanie pacjentów skolonizowanych organizmami o takim fenotypie oporności. Brilliance™ ESBL Agar może dostarczyć presumptywnego wyniku już po 18-24 godzinach inkubacji.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar PO5302A

Specyfikacja techniczna Brilliance™ ESBL Agar

Typowa formulacja Brilliance™ ESBL Agar

* Producent może modyfikować lub uzupełniać formulację w zakresie wymaganym do zachowania deklarowanych parametrów działania produktu.

Zasada działania dwóch chromogenów

Brilliance™ ESBL Agar wykorzystuje dwa substraty chromogenne reagujące z określonymi enzymami bakteryjnymi. W wyniku hydrolizy chromogenów uwalniane są barwne produkty gromadzące się w koloniach.

Profil enzymatyczny poszczególnych grup bakterii umożliwia uzyskanie różnych barw kolonii, co wspiera ich presumptywne różnicowanie już bezpośrednio na płytce przesiewowej.

Technologia chromogenna nie zastępuje jednak pełnej identyfikacji. Mikroorganizmy o nietypowych profilach enzymatycznych mogą tworzyć nietypowe reakcje barwne.

Cefpodoksym - element selekcji bakterii o fenotypie ESBL

Formulacja wykorzystuje cefpodoksym jako jeden z elementów selekcyjnych. Zgodnie z dokumentacją Thermo Scientific™ ogranicza on wzrost organizmów niewytwarzających ESBL, dzięki czemu podłoże sprzyja odzyskowi bakterii wykazujących odpowiedni fenotyp oporności.

Wzrost na medium w obecności selekcyjnego antybiotyku nie oznacza jednak automatycznie potwierdzenia obecności konkretnego genu ESBL.

Hamowanie AmpC - ważna cecha Brilliance™ ESBL Agar

Jednym z istotnych elementów formulacji jest kwas benzo[b]tiofeno-2-boronowy, którego zadaniem jest ograniczenie wzrostu bakterii wytwarzających AmpC.

Ma to znaczenie, ponieważ fenotyp oporności związany z AmpC może utrudniać specyficzny screening ESBL. Selektywne ograniczenie części producentów AmpC ma zmniejszać liczbę wyników przesiewowych wymagających dalszego wyjaśnienia.

Nie należy jednak traktować braku lub obecności wzrostu na Brilliance™ ESBL Agar jako testu służącego do jednoznacznego różnicowania ESBL od wszystkich innych mechanizmów oporności.

Interpretacja kolorów kolonii

Zgodnie z IFU obecność takich kolonii na podłożu przesiewowym należy traktować jako wynik wskazujący na podejrzenie bakterii wytwarzającej ESBL.

Interpretacja ma charakter presumptywny. Inne mechanizmy oporności oraz nietypowy profil enzymatyczny mikroorganizmu mogą wpływać na wynik i wygląd kolonii.

KESC - co oznacza skrót?

W dokumentacji Brilliance™ ESBL Agar producent używa określenia KESC dla grupy obejmującej:

• Klebsiella,
• Enterobacter,
• Serratia,
• Citrobacter.

Na medium organizmy należące do tej grupy wykazujące odpowiedni fenotyp mogą tworzyć zielone kolonie.

Kolor zielony pozwala więc wytypować podejrzaną grupę bakterii, ale nie rozróżnia automatycznie gatunków w obrębie KESC.

Próbki zgodne z aktualnym IFU

Dla dokładnego wariantu PO5302A producent określa screening:

• próbek kału,
• wymazów z odbytnicy.

Brilliance™ ESBL Agar może być ponadto stosowany do pracy z wyizolowanymi koloniami klinicznymi, przygotowanymi w formie zawiesiny o mętności około 0,5 McFarlanda zgodnie z lokalną procedurą.

Aktualne IFU nie wskazuje żywności, wody ani próbek środowiskowych jako standardowego materiału dla PO5302A. Takich zastosowań nie należy deklarować bez odrębnej walidacji.

Screening nosicielstwa ESBL

Jednym z głównych zastosowań produktu jest screening kolonizacji przewodu pokarmowego bakteriami wytwarzającymi ESBL.

Workflow może obejmować:

• pobranie wymazu z odbytnicy lub próbki kału,
• bezpośredni posiew na Brilliance™ ESBL Agar,
• inkubację,
• ocenę wzrostu i zabarwienia kolonii,
• izolację podejrzanych kolonii,
• potwierdzenie identyfikacji,
• wykonanie odpowiedniego badania lekowrażliwości lub testu potwierdzającego mechanizm oporności.

Taki screening może stanowić element procedur kontroli zakażeń i nadzoru epidemiologicznego, ale decyzje dotyczące postępowania z pacjentem nie powinny być podejmowane wyłącznie na podstawie koloru kolonii.

Warunki inkubacji Brilliance™ ESBL Agar

Aktualne IFU Thermo Scientific™ wskazuje:

Po inkubacji płytkę należy ocenić w dobrym oświetleniu pod kątem wzrostu i zabarwienia kolonii.

Jeżeli po pierwszych 18-24 godzinach wynik jest ujemny, producent wskazuje możliwość dodatkowej inkubacji przez 24 godziny i ponownego odczytu.

Skrócona procedura stosowania

Powyższa procedura jest skrótem handlowo-informacyjnym i nie zastępuje aktualnego IFU Thermo Scientific™ Oxoid™ ani SOP laboratorium.

Screening ESBL a potwierdzenie mechanizmu oporności

Brilliance™ ESBL Agar nie jest samodzielnym testem potwierdzającym genotyp ani dokładny mechanizm oporności.

Wzrost może wskazywać na organizm o fenotypie kompatybilnym z produkcją ESBL, ale pełny workflow może wymagać:

• potwierdzenia identyfikacji gatunku,
• badania lekowrażliwości - AST,
• oznaczenia MIC,
• testu fenotypowego ukierunkowanego na mechanizm oporności,
• metody molekularnej identyfikującej określone geny beta-laktamaz, jeśli jest wskazana.

Podłoże nie rozstrzyga samo w sobie, czy izolat posiada np. CTX-M, TEM, SHV lub inną konkretną determinantę ESBL.

Nie wykonywać AST bezpośrednio z Brilliance™ ESBL Agar

Jest to medium selektywne zawierające substancje przeciwdrobnoustrojowe. Takie warunki mogą wpływać na fizjologię bakterii oraz uzyskiwaną wartość MIC.

Jeżeli potrzebne jest AST, podejrzany izolat należy przenieść i przygotować zgodnie z właściwą procedurą obowiązującą dla danej metody, korzystając z odpowiedniego nieselektywnego materiału hodowlanego.

Do właściwego etapu AST można następnie dobrać krążki antybiotykowe lub gradientowe paski do oznaczania MIC.

Kontrola jakości Brilliance™ ESBL Agar

Aktualne IFU wskazuje przykładowe szczepy służące do kontroli produktywności, różnicowania i selektywności medium.

Dla tych kontroli producent wskazuje 18-24 h w 35 ±2°C w warunkach tlenowych.

Zakres rutynowej kontroli jakości wykonywanej przez użytkownika powinien odpowiadać wymaganiom lokalnym, przeznaczeniu medium oraz SOP laboratorium.

Odpowiednie materiały można dobrać w kategorii szczepy kontrolne.

Skuteczność analityczna - dane producenta

W badaniu analitycznym opisanym w aktualnym IFU oceniono 58 kultur wytwarzających ESBL oraz 66 kultur ESBL-ujemnych.

Są to wyniki badania wydajności konkretnego wyrobu w określonych warunkach testowych. Nie należy interpretować ich jako gwarancji identycznej czułości i swoistości w każdym laboratorium, materiale lub populacji pacjentów.

Dane z ocen klinicznych

Thermo Scientific™ przedstawia również wyniki kilku zewnętrznych ocen klinicznych wykonywanych w europejskich laboratoriach i szpitalach.

Wyniki pokazują, że wydajność może różnić się pomiędzy populacjami i procedurami. Dlatego nie należy traktować pojedynczej wartości czułości jako stałej charakterystyki każdego przyszłego badania.

Ograniczenia Brilliance™ ESBL Agar

Aktualne IFU wymienia kilka ograniczeń istotnych podczas interpretacji:

• organizmy o nietypowych profilach enzymatycznych mogą powodować anomalne reakcje chromogenne,
• organizmy o nietypowych wartościach MIC dla antybiotyków obecnych w podłożu mogą reagować inaczej niż oczekiwano,
• kał i krew mogą miejscowo przebarwiać agar,
• przebarwienia samego medium nie należy mylić z właściwymi zabarwionymi koloniami,
• mogą rosnąć bakterie posiadające inne mechanizmy oporności niż ESBL,
• identyfikacja ma charakter wstępny - presumptywny,
• podejrzane izolaty wymagają potwierdzenia,
• AST nie powinno być wykonywane bezpośrednio z kolonii pobranych z Brilliance™ ESBL Agar.

Gotowe płytki - ergonomia i standaryzacja pracy

Format gotowych płytek eliminuje konieczność samodzielnego:

• recepturowania bazy medium,
• odważania chromogenów,
• dozowania antybiotyków i inhibitorów,
• sterylizacji,
• kontrolowanego chłodzenia,
• aseptycznego rozlewania podłoża.

Może to ograniczać zmienność wynikającą z manualnego przygotowania medium i wspierać powtarzalność rutynowego screeningu ESBL.

Każda płytka jest przeznaczona do jednorazowego użycia.

Przechowywanie i trwałość

Brilliance™ ESBL Agar PO5302A należy przechowywać w temperaturze 2-12°C w oryginalnym opakowaniu i z dala od światła.

Aktualna karta handlowa Thermo Scientific™ wskazuje trwałość 8 tygodni. Wiążący pozostaje zawsze termin ważności umieszczony na opakowaniu konkretnej partii.

Przed użyciem podłoże należy doprowadzić do temperatury pokojowej. Producent wskazuje, aby nie wykonywać preinkubacji przed zaszczepieniem.

Nie należy stosować płytki:

• po upływie terminu ważności,
• w przypadku uszkodzenia opakowania lub płytki,
• przy widocznej kontaminacji,
• po nietypowej zmianie barwy,
• jeżeli obserwowane są inne oznaki pogorszenia jakości medium.

IVD i bezpieczeństwo biologiczne

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar PO5302A jest wyrobem medycznym do diagnostyki in vitro przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania. Nie jest urządzeniem zautomatyzowanym ani diagnostyką towarzyszącą.

Próbki kału, wymazy z odbytnicy oraz wyhodowane izolaty należy traktować jako materiał potencjalnie zakaźny. Laboratorium powinno posiadać właściwe procedury bezpieczeństwa biologicznego, dekontaminacji i gospodarki odpadami.

Producent wskazuje również obecność w formulacji peptonu pochodzącego z surowców świńskich, bydlęcych i mikrobiologicznych. Szczegółowe informacje dotyczące bezpieczeństwa należy sprawdzić w aktualnym IFU i SDS.

GLP, SOP, LIMS i dokumentacja screeningu ESBL

Brilliance™ ESBL Agar może stanowić element profesjonalnego workflow prowadzonego zgodnie z GLP, zatwierdzonym SOP i systemem zarządzania jakością, jeżeli medium zostało prawidłowo wdrożone do danej procedury.

W dokumentacji lub systemie LIMS można rejestrować między innymi:

• identyfikację próbki,
• rodzaj materiału,
• numer katalogowy PO5302A,
• numer partii LOT,
• termin ważności,
• datę wykonania posiewu,
• czas i temperaturę inkubacji,
• barwę i morfologię kolonii,
• wynik presumptywnego screeningu,
• wynik identyfikacji potwierdzającej,
• wynik dalszego AST lub badania mechanizmu oporności.

Samo zastosowanie Brilliance™ ESBL Agar nie powoduje automatycznie zgodności procedury z GLP, ISO, EUCAST, wymaganiami akredytacyjnymi ani innym standardem. Zgodność dotyczy kompletnego, właściwie wdrożonego procesu.

Zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar PO5302A znajduje zastosowanie przede wszystkim w:

• mikrobiologii klinicznej,
• screeningu bakterii wytwarzających ESBL,
• badaniu wymazów z odbytnicy,
• badaniu próbek kału,
• screeningu kolonizacji przewodu pokarmowego,
• wstępnym różnicowaniu E. coli,
• wstępnym różnicowaniu grupy KESC,
• wstępnej ocenie Proteus, Morganella i Providencia,
• procedurach kontroli zakażeń szpitalnych,
• nadzorze epidemiologicznym,
• pracy z wyizolowanymi izolatami klinicznymi zgodnie z IFU.

Aktualne IFU PO5302A nie wskazuje badań żywności, wody ani próbek środowiskowych jako standardowego przeznaczenia produktu.

FAQ - Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar PO5302A

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ ESBL Agar w ofercie BestLabs

Brilliance™ ESBL Agar PO5302A łączy chromogenne różnicowanie kolonii z selekcją opartą między innymi na cefpodoksymie i inhibitorze AmpC, zapewniając praktyczne narzędzie do screeningu nosicielstwa bakterii wytwarzających ESBL.

Format 10 gotowych płytek 90 mm, podstawowy odczyt po 18-24 godzinach i charakterystyczne reakcje barwne pozwalają usprawnić rutynowy workflow mikrobiologiczny bez konieczności samodzielnego przygotowywania złożonego podłoża selektywnego.

Sprawdź również pozostałe podłoża gotowe na płytkach, podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne, krążki antybiotykowe oraz paski gradientowe do oznaczania MIC.