Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar - gotowa pożywka chromogenna do screeningu Enterococcus opornych na wankomycynę VRE, 10 szt.

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar PO1175A to gotowa, selektywna i różnicująca pożywka chromogenna do jakościowego screeningu enterokoków opornych na wankomycynę - VRE. Produkt jest przeznaczony do bezpośredniego badania wymazów z odbytu oraz próbek kału w profesjonalnym laboratoryjnym workflow diagnostycznym.

Brilliance™ VRE Agar wykorzystuje połączenie dwóch substratów chromogennych oraz selektywnego koktajlu antybiotykowego zawierającego wankomycynę. Mechanizm pozwala nie tylko ograniczać wzrost dużej części flory konkurencyjnej, ale również wstępnie różnicować dwa najważniejsze klinicznie gatunki VRE - Enterococcus faecium i Enterococcus faecalis - na podstawie charakterystycznego zabarwienia kolonii.

Po prawidłowej inkubacji VRE E. faecalis tworzy charakterystyczne niebieskie lub jasnoniebieskie kolonie, natomiast VRE E. faecium tworzy kolonie różowe do fioletowych. Białe lub bezbarwne kolonie wskazują na wzrost organizmów innych niż typowy VRE wykrywany przez system chromogenny.

Brilliance™ VRE Agar jest podłożem przesiewowym. Barwa kolonii umożliwia uzyskanie wyniku presumptywnego, ale nie zastępuje ostatecznej identyfikacji mikroorganizmu ani potwierdzenia mechanizmu oporności na wankomycynę odpowiednią metodą laboratoryjną.

Wariant PO1175A zawiera 10 gotowych płytek Petriego o średnicy 90 mm. Produkt jest wyrobem do diagnostyki in vitro - IVD - przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania.

Sprawdź również podłoża gotowe na płytkach, pełną kategorię podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne, krążki antybiotykowe oraz gradientowe paski diagnostyczne MIC.

Brilliance™ VRE Agar - chromogenne podłoże do szybkiego screeningu VRE

Vancomycin Resistant Enterococci - VRE to enterokoki wykazujące oporność na wankomycynę. Szczególne znaczenie kliniczne mają Enterococcus faecium oraz Enterococcus faecalis, które należą do najczęściej izolowanych gatunków VRE z materiałów klinicznych.

Brilliance™ VRE Agar został opracowany jako alternatywa dla bardziej czasochłonnych klasycznych metod przesiewowych. Tradycyjna selektywna izolacja na agarze z eskuliną, azydkiem i wankomycyną może wymagać co najmniej 72 godzin, natomiast Brilliance™ VRE Agar umożliwia uzyskanie presumptywnego obrazu VRE już po około 24 godzinach.

Połączenie selekcji antybiotykowej z reakcją chromogenną pozwala uzyskać czytelny obraz kolonii i usprawnia screening nosicielstwa VRE w laboratoriach mikrobiologicznych.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar PO1175A

Specyfikacja techniczna Brilliance™ VRE Agar PO1175A

Typowy skład Brilliance™ VRE Agar

* Producent zastrzega możliwość modyfikacji lub suplementowania formulacji w zakresie wymaganym do spełnienia kryteriów jakościowych produktu.

Jak działa Brilliance™ VRE Agar?

Mechanizm różnicowania opiera się na dwóch substratach chromogennych, które są rozkładane przez określone enzymy produkowane przez enterokoki.

Kluczowe znaczenie mają:

• fosfataza,
• α-galaktozydaza.

Zarówno E. faecium, jak i E. faecalis wykazują aktywność fosfatazową, prowadzącą do uwolnienia niebieskiego chromoforu. E. faecium dodatkowo wykazuje aktywność α-galaktozydazy, czego konsekwencją jest połączenie produktów barwnych i powstanie kolonii różowych do fioletowych.

Dzięki temu możliwe jest wstępne różnicowanie dwóch najważniejszych gatunków VRE już bezpośrednio na płytce.

Interpretacja kolorów kolonii

Interpretacja barwy kolonii ma charakter presumptywny. Producent jednoznacznie wskazuje, że identyfikacja uzyskana na Brilliance™ VRE Agar powinna zostać potwierdzona.

Dlaczego obecność wankomycyny ma znaczenie?

Podłoże zawiera koktajl antybiotykowy obejmujący wankomycynę. Jego zadaniem jest ograniczenie wzrostu mikroorganizmów wrażliwych i umożliwienie odzysku enterokoków wykazujących odpowiedni fenotyp oporności.

Brilliance™ VRE Agar został opracowany również z myślą o odzysku szczepów związanych z mechanizmem VanB, które mogą być trudniejsze do wykrycia na części klasycznych podłoży selektywnych.

Producent wskazuje, że kombinacja dodatkowych antybiotyków ogranicza również wzrost Enterococcus gallinarum i Enterococcus casseliflavus, które posiadają naturalny, chromosomalnie kodowany mechanizm VanC.

VanA, VanB i VanC - znaczenie w screeningu VRE

Oporność enterokoków na wankomycynę może być związana z różnymi mechanizmami. W izolatach ludzkich szczególnie istotne są VanA i VanB.

Geny związane z tymi fenotypami prowadzą do zmian w syntezie peptydoglikanu, zmniejszających skuteczność działania glikopeptydów.

Mechanizm VanC występuje natomiast naturalnie między innymi u E. gallinarum i E. casseliflavus. Formulacja Brilliance™ VRE została zaprojektowana tak, aby wzrost tych organizmów był ograniczony i nie utrudniał typowego screeningu klinicznie istotnych VRE.

Podłoże nie określa jednak bezpośrednio obecności konkretnego genu van. Genotypowanie VanA, VanB lub innych determinant wymaga odpowiedniej metody molekularnej.

Screening VRE a oznaczanie MIC

Brilliance™ VRE Agar nie jest metodą oznaczania minimalnego stężenia hamującego - MIC. Podłoże służy do jakościowego przesiewowego wykrywania mikroorganizmów zdolnych do wzrostu w obecności zastosowanego systemu selekcyjnego.

Wynik typu:

• kolonia różowo-fioletowa,
• kolonia niebieska

oznacza presumptywny wynik VRE, ale nie dostarcza wartości MIC dla wankomycyny.

Jeżeli wymagane jest ilościowe oznaczenie lekowrażliwości, należy zastosować zwalidowaną metodę AST oraz aktualne kryteria interpretacyjne, np. odpowiednie gradientowe paski diagnostyczne MIC lub inną metodę przewidzianą przez laboratorium.

Screening VRE nie zastępuje potwierdzenia identyfikacji

Podłoże pozwala bardzo szybko uzyskać wstępną informację o obecności VRE, ale producent klasyfikuje uzyskane rozpoznanie jako presumptywne.

W zależności od procedury potwierdzenie może obejmować:

• identyfikację gatunkową izolatu,
• oznaczenie lekowrażliwości,
• wyznaczenie MIC dla wankomycyny,
• testy biochemiczne,
• MALDI-TOF,
• metody molekularne wykrywające odpowiednie geny oporności.

Dobór metody potwierdzającej powinien odpowiadać aktualnemu SOP oraz wymaganiom laboratorium diagnostycznego.

Próbki dopuszczone przez aktualne IFU

Dla dokładnego wariantu PO1175A producent określa zastosowanie do:

• wymazów z odbytu,
• próbek kału.

Podłoże jest przeznaczone przede wszystkim do screeningu kolonizacji VRE w profesjonalnym workflow klinicznym.

Aktualne IFU PO1175A nie stanowi podstawy do deklarowania standardowego zastosowania w próbkach żywności, wody ani próbkach środowiskowych. Takich zastosowań nie należy przenosić do opisu produktu bez oddzielnej walidacji i dokumentacji producenta.

Warunki inkubacji

Producent określa podstawowe warunki badania jako:

Po inkubacji płytkę należy oceniać w dobrym oświetleniu pod kątem wzrostu i barwy kolonii.

W przypadku braku wzrostu wskazującego na VRE producent dopuszcza dodatkowe 24 godziny inkubacji i ponowną ocenę.

Należy jednak uwzględnić ważne ograniczenie: reinkubacja do 48 godzin zwiększa prawdopodobieństwo wyników fałszywie dodatnich. Dlatego obraz po wydłużonej inkubacji wymaga szczególnie ostrożnej interpretacji i potwierdzenia.

Skrócona procedura pracy z gotową płytką

Powyższa sekcja jest skrótem informacyjnym i nie zastępuje aktualnego IFU Thermo Scientific™ Oxoid™ ani procedury diagnostycznej obowiązującej w laboratorium.

Kontrola jakości Brilliance™ VRE Agar

Aktualne IFU wskazuje referencyjne szczepy umożliwiające kontrolę właściwości wzrostowych, różnicujących i selektywnych medium.

Dla dodatnich szczepów kontrolnych producent stosuje warunki 18-24 h w 37 ±2°C, tlenowo oraz kryterium wzrostu na poziomie co najmniej 50% liczby kolonii uzyskiwanej na podłożu kontrolnym.

Zakres rutynowej kontroli jakości wykonywanej przez użytkownika powinien odpowiadać lokalnym wymaganiom, zamierzonemu zastosowaniu medium i zatwierdzonym procedurom laboratorium.

Odpowiednie materiały referencyjne można dobrać w kategorii szczepy kontrolne.

Wyniki badań wydajności producenta - właściwa interpretacja

Thermo Scientific przedstawia w aktualnym IFU wyniki zewnętrznych ocen klinicznych Brilliance™ VRE Agar. W jednym z badań obejmującym 398 próbek kału i 250 wymazów z odbytu pobranych podczas screeningu kolonizacji VRE w czterech szpitalach uzyskano:

Wartości te opisują konkretne badanie kliniczne przedstawione przez producenta i nie powinny być interpretowane jako gwarantowany wynik dla każdej populacji, laboratorium, próbki lub procedury.

Na wydajność diagnostyczną mogą wpływać między innymi skład populacji badanej, częstość występowania VRE, sposób pobrania materiału, transport, jakość posiewu i warunki inkubacji.

Ograniczenia metody

Aktualna instrukcja producenta wskazuje kilka istotnych ograniczeń, które należy uwzględnić podczas interpretacji:

• mikroorganizmy o nietypowym profilu enzymatycznym mogą dawać anomalne reakcje chromogenne,
• materiał kałowy lub obecność krwi może powodować miejscowe przebarwienie podłoża,
• przebarwienia samego agaru nie należy mylić z prawdziwą reakcją, w której widoczne są zabarwione kolonie,
• identyfikacje na podłożu są presumptywne i wymagają potwierdzenia,
• wydłużenie inkubacji do 48 godzin zwiększa ryzyko wyników fałszywie dodatnich,
• podłoże nie identyfikuje bezpośrednio genów vanA, vanB lub vanC,
• podłoże nie dostarcza ilościowej wartości MIC dla wankomycyny.

Monitoring kolonizacji i kontrola zakażeń

Jednym z podstawowych zastosowań Brilliance™ VRE Agar jest screening nosicielstwa VRE. Szybkie wykrycie osób skolonizowanych może stanowić istotny element działań epidemiologicznych prowadzonych w szpitalach i innych placówkach ochrony zdrowia.

Wynik podłoża może być wykorzystywany jako część workflow obejmującego:

• pobranie wymazu z odbytu lub próbki kału,
• posiew na selektywne medium,
• inkubację,
• ocenę reakcji chromogennej,
• potwierdzenie podejrzanej kolonii,
• raportowanie wyniku zgodnie z procedurą laboratorium.

Decyzje dotyczące postępowania klinicznego i epidemiologicznego powinny opierać się na całym procesie diagnostycznym, a nie wyłącznie na kolorze kolonii na płytce.

Gotowe płytki - ergonomia i powtarzalność pracy

Format gotowego podłoża eliminuje konieczność samodzielnego przygotowania selektywnego medium chromogennego. Laboratorium nie musi wykonywać takich etapów jak:

• odważanie składników,
• przygotowanie bazy agarowej,
• sterylizacja,
• kontrolowane chłodzenie,
• dozowanie dodatków chromogennych i antybiotykowych,
• aseptyczne rozlewanie płytek.

Może to zmniejszyć liczbę etapów manualnych oraz wspierać standaryzację i powtarzalność rutynowego screeningu VRE.

Przechowywanie i trwałość

Brilliance™ VRE Agar PO1175A należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 2-10°C, z dala od światła.

Aktualna karta handlowa producenta określa trwałość 10 tygodni. Wiążący jest jednak zawsze termin ważności wskazany na etykiecie konkretnej partii.

Przed zastosowaniem płytkę należy doprowadzić do temperatury pokojowej. Producent wskazuje, aby nie wykonywać preinkubacji przed użyciem.

Nie należy stosować produktu:

• po upływie terminu ważności,
• w przypadku uszkodzonego opakowania lub płytki,
• przy widocznej kontaminacji,
• w przypadku nieprawidłowej zmiany barwy,
• jeżeli obserwowane są inne oznaki pogorszenia jakości medium.

IVD, bezpieczeństwo i profesjonalne zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar PO1175A jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania. Produkt nie jest zautomatyzowany i nie jest diagnostyką towarzyszącą.

Materiał kliniczny oraz kolonie wyhodowane na płytkach powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne. Laboratorium powinno posiadać odpowiednie procedury bezpieczeństwa biologicznego, dekontaminacji i usuwania odpadów.

Producent wskazuje również obecność surowców pochodzenia biologicznego w formulacji podłoża, dlatego postępowanie z produktem powinno być zgodne z aktualnym IFU oraz SDS.

GLP, SOP, LIMS i system jakości

Brilliance™ VRE Agar może stanowić element zwalidowanego workflow w laboratoriach działających zgodnie z GLP, zatwierdzonymi SOP i systemami zarządzania jakością.

W dokumentacji lub systemie LIMS można rejestrować między innymi:

• identyfikację próbki,
• numer katalogowy PO1175A,
• numer LOT podłoża,
• termin ważności,
• datę wykonania posiewu,
• temperaturę i czas inkubacji,
• barwę i charakter wzrostu kolonii,
• wynik testu potwierdzającego,
• identyfikację osoby wykonującej badanie.

Samo zastosowanie Brilliance™ VRE Agar nie powoduje automatycznej zgodności całej procedury z GLP, ISO, wymaganiami akredytacyjnymi ani innym standardem. Laboratorium odpowiada za kwalifikację medium, kontrolę jakości oraz cały proces przedanalityczny, analityczny i poanalityczny.

Zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar PO1175A znajduje zastosowanie przede wszystkim w:

• laboratoriach mikrobiologii klinicznej,
• screeningu kolonizacji VRE,
• wykrywaniu opornych na wankomycynę Enterococcus faecium,
• wykrywaniu opornych na wankomycynę Enterococcus faecalis,
• badaniu wymazów z odbytu,
• badaniu próbek kału,
• procedurach kontroli zakażeń szpitalnych,
• nadzorze epidemiologicznym,
• profesjonalnych workflow dotyczących antybiotykooporności.

Aktualne IFU nie wskazuje wody, żywności ani próbek środowiskowych jako standardowego materiału dla PO1175A.

FAQ - Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar PO1175A

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar w ofercie BestLabs

Thermo Scientific™ Oxoid™ Brilliance™ VRE Agar PO1175A łączy selekcję antybiotykową z technologią chromogenną, umożliwiając szybki screening VRE oraz wstępne różnicowanie E. faecium i E. faecalis bez konieczności przygotowywania podłoża w laboratorium.

Format 10 gotowych płytek 90 mm, podstawowy odczyt po 18-24 godzinach oraz łatwo rozpoznawalne reakcje chromogenne wspierają organizację rutynowych programów monitorowania kolonizacji VRE i kontroli zakażeń.

Sprawdź również pozostałe podłoża gotowe na płytkach, podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne, krążki antybiotykowe oraz gradientowe paski diagnostyczne MIC.