Thermo Scientific™ Oxoid™ CASO Tryptone Soya Agar PO5012A - gotowe podłoże TSA do hodowli i oznaczania liczby drobnoustrojów, 10 płytek 90 mm

Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar - Casein Soya Bean Digest Agar PO5012A, określany również jako CASO Agar, TSA Agar lub agar kazeinowo-sojowy, to gotowe, bogate i nieselektywne podłoże mikrobiologiczne ogólnego przeznaczenia. Medium umożliwia wzrost szerokiego spektrum mikroorganizmów i może być wykorzystywane między innymi w hodowli bakterii, drożdży i pleśni, badaniach liczby drobnoustrojów, kontroli jakości oraz jako podłoże referencyjne podczas oceny selektywności innych mediów.

Dokładny wariant PO5012A jest dostarczany jako 10 gotowych płytek Petriego o średnicy 90 mm. Każda płytka zawiera około 17 ml medium, a masa napełnienia według aktualnego IFU wynosi 17 g ±5%. Gotowa forma pozwala ograniczyć etapy związane z samodzielnym recepturowaniem, autoklawowaniem i rozlewaniem podłoża.

Formulacja zawierająca trypton i pepton sojowy zapewnia źródło azotu, aminokwasów i peptydów wymaganych przez wiele mikroorganizmów. Chlorek sodu pomaga utrzymywać równowagę osmotyczną, a agar tworzy stabilną powierzchnię hodowlaną.

Aktualne IFU Thermo Scientific™ określa PO5012A jako medium przeznaczone do wzrostu mikroorganizmów z różnych typów próbek, obejmujących materiały kliniczne i niekliniczne. Podłoże może być stosowane w procedurach oznaczania liczby mikroorganizmów, jeżeli TSA/CASO zostało przewidziane przez właściwą metodę, farmakopeę, normę lub zatwierdzony SOP.

PO5012A jest wyrobem medycznym do diagnostyki in vitro - IVD przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania laboratoryjnego.

Sprawdź również podłoża gotowe na płytkach, podłoża mikrobiologiczne, Tryptone Soya Agar CM0131B w postaci sypkiej, szczepy kontrolne oraz rozwiązania do kontroli jakości mikrobiologicznej.

CASO Agar, TSA i Casein Soya Bean Digest Agar - to samo podłoże pod różnymi nazwami

Tryptone Soya Agar - TSA jest jednym z najbardziej uniwersalnych nieselektywnych podłoży mikrobiologicznych. W zależności od producenta, farmakopei i przyjętego nazewnictwa można spotkać również określenia:

• CASO Agar,
• Casein Soya Bean Digest Agar,
• Soybean-Casein Digest Agar,
• agar kazeinowo-sojowy,
• agar tryptonowo-sojowy,
• TSA Agar.

Wszystkie te określenia odnoszą się do rodziny bogatych podłoży bazujących na peptonie kazeinowym i peptonie sojowym. Dokładna specyfikacja konkretnego produktu powinna jednak zawsze wynikać z numeru katalogowego - w tym przypadku PO5012A.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ Oxoid™ PO5012A

Specyfikacja techniczna CASO Tryptone Soya Agar PO5012A

Typowa formulacja Tryptone Soya Agar

* Formulacja ma charakter typowy. Producent może dostosowywać skład w zakresie koniecznym do spełnienia wymaganych parametrów wydajności.

Nieselektywny charakter TSA - co oznacza w praktyce?

Tryptone Soya Agar nie zawiera składników mających wybiórczo hamować określone grupy mikroorganizmów ani chromogenów przeznaczonych do ich różnicowania.

Dzięki temu podłoże zapewnia szerokie spektrum wzrostowe i może być wykorzystane wtedy, gdy celem procedury jest:

• uzyskanie ogólnego wzrostu mikroorganizmów,
• odzysk możliwie szerokiej grupy drobnoustrojów,
• izolacja czystych kultur,
• kontrola produktywności innych podłoży,
• oznaczenie liczby mikroorganizmów zgodnie z właściwą metodą.

Brak selektywności oznacza jednocześnie, że sam wygląd kolonii na TSA zwykle nie pozwala na ostateczną identyfikację mikroorganizmu. W przypadku materiałów mieszanych dalsze różnicowanie może wymagać podłoży selektywnych, testów biochemicznych, MALDI-TOF, metod molekularnych lub innych technik identyfikacyjnych.

Oznaczanie ogólnej liczby drobnoustrojów - właściwa interpretacja zastosowania

PO5012A może być wykorzystywany w mikrobiologicznych testach ilościowych, w tym w oznaczaniu liczby żywych mikroorganizmów, jeżeli dana metoda przewiduje zastosowanie Tryptone Soya Agar / Soybean-Casein Digest Agar.

Nie istnieje jednak jedna uniwersalna procedura określana jako „ogólna liczba drobnoustrojów”, właściwa dla wszystkich matryc.

W zależności od badanego materiału różnić mogą się:

• sposób przygotowania próbki,
• rodzaj rozcieńczalnika,
• objętość inokulum,
• technika posiewu,
• temperatura inkubacji,
• czas inkubacji,
• warunki tlenowe lub beztlenowe,
• kryteria obliczania i raportowania CFU.

Dlatego produktu nie należy opisywać jako podłoża automatycznie właściwego do każdego oznaczenia Total Plate Count, TAMC, TVC czy ogólnej liczby drobnoustrojów. Zastosowanie musi wynikać z konkretnej normy, farmakopei, instrukcji produktu badanego lub zwalidowanego SOP.

TSA w badaniach farmakopealnych

Thermo Scientific™ opisuje Tryptone Soya Agar jako medium stosowane w różnych farmakopeach międzynarodowych oraz metodach badań mikrobiologicznych.

Casein Soya Bean Digest Agar jest powszechnie wykorzystywany jako podłoże odżywcze w procedurach związanych między innymi z:

• microbial enumeration tests,
• oceną zdolności wzrostowej podłoża,
• kontrolą jakości mikrobiologicznej,
• badaniem odpowiednich produktów niesterylnych,
• procedurami wymagającymi uniwersalnego nieselektywnego medium.

Nie należy jednak zakładać, że zakup samej płytki PO5012A powoduje automatyczną zgodność całego badania z Farmakopeą Europejską, USP, JP lub inną farmakopeą. Zgodność dotyczy kompletnej metody, obejmującej między innymi przygotowanie próbki, inokulum, warunki inkubacji, szczepy QC i kryteria akceptacji.

Podłoże referencyjne do oceny selektywności innych mediów

Jednym z zastosowań wskazanych bezpośrednio przez Thermo Scientific™ jest wykorzystanie Tryptone Soya Agar jako medium referencyjnego podczas testowania podłoży selektywnych.

W takim układzie liczba kolonii uzyskana na podłożu selektywnym może być porównywana z odzyskiem na bogatym medium nieselektywnym, co pozwala określić stopień inhibicji i produktywność badanego medium.

TSA może dzięki temu stanowić element kontroli jakości podczas:

• kwalifikacji nowych partii podłoża,
• porównywania podłoża selektywnego z kontrolą nieselektywną,
• weryfikacji metody hodowlanej,
• oceny odzysku mikroorganizmów kontrolnych.

Bakterie tlenowe i względnie beztlenowe

Peptonowa formulacja TSA umożliwia wzrost szerokiego spektrum bakterii tlenowych i względnie beztlenowych.

Podłoże może również umożliwiać wzrost odpowiednich bakterii beztlenowych, jeżeli zapewnione zostaną właściwe warunki atmosferyczne.

Samo podłoże nie tworzy środowiska beztlenowego. W przypadku hodowli beztlenowców wymagane są odpowiednie systemy gazowe, komory, pojemniki lub inne rozwiązania pozwalające uzyskać atmosferę wymaganą przez konkretny organizm.

Drożdże i pleśnie na Tryptone Soya Agar

Aktualna kontrola jakości PO5012A obejmuje również Candida albicans oraz Aspergillus brasiliensis, co potwierdza możliwość wzrostu odpowiednich drożdży i pleśni na tym bogatym podłożu.

Nie oznacza to jednak, że TSA jest zawsze optymalnym medium dla wszystkich badań mykologicznych. W procedurach wymagających selektywnej izolacji grzybów lub silniejszego wzrostu określonych drożdży i pleśni stosowane mogą być dedykowane podłoża, np. Sabouraud Dextrose Agar.

Kontrola jakości PO5012A - bakterie tlenowe

Thermo Scientific™ wykorzystuje w kontroli jakości dokładnego wariantu PO5012A między innymi następujące szczepy:

Dla kontroli producent stosuje inokulum 10-100 CFU. Liczba kolonii powinna wynosić co najmniej 70% wyniku uzyskanego na właściwym medium kontrolnym.

Kontrola jakości - beztlenowce, drożdże i pleśnie

Są to warunki kontroli jakości producenta, a nie jedna uniwersalna procedura inkubacji wszystkich próbek na PO5012A.

Nie ma jednej temperatury inkubacji dla TSA

Aktualne IFU PO5012A nie narzuca jednej temperatury i jednego czasu dla wszystkich zastosowań. Producent wskazuje, aby płytki inkubować w temperaturze i atmosferze odpowiedniej dla badanego mikroorganizmu oraz stosowanej metody.

Jest to istotne, ponieważ wymagania dla:

• bakterii mezofilnych,
• drożdży,
• pleśni,
• beztlenowców,
• procedur farmakopealnych,
• badań produktów lub próbek środowiskowych

mogą się istotnie różnić.

Nie należy więc wpisywać jednej wartości, np. „37°C / 24 h”, jako uniwersalnego sposobu stosowania PO5012A.

Ograniczenia - Neisseria, Haemophilus i inne organizmy wymagające

Mimo bogatego składu Tryptone Soya Agar nie zapewnia optymalnych warunków wszystkim mikroorganizmom.

Aktualne IFU Thermo Scientific™ wyraźnie wskazuje, że medium nie jest odpowiednie do izolacji i hodowli bardzo wymagających bakterii, takich jak:

• Neisseria spp.,
• Haemophilus spp.,
• inne mikroorganizmy posiadające szczególne wymagania żywieniowe.

W takich zastosowaniach należy stosować odpowiednio wzbogacone lub specjalistyczne podłoża.

Izolacja na TSA nie jest identyfikacją gatunku

PO5012A pozwala na nieselektywny wzrost mikroorganizmów. Nie zawiera układu biochemicznego, chromogennego ani selekcyjnego umożliwiającego jednoznaczne oznaczenie gatunku.

Kolor, wielkość, kształt czy konsystencja kolonii mogą stanowić wskazówkę podczas dalszej pracy, ale nie są samodzielnym potwierdzeniem identyfikacji.

Wyizolowane kolonie mogą wymagać dalszych badań, np. testów biochemicznych, serologicznych, MALDI-TOF lub metod molekularnych.

Próbki kliniczne i status IVD

Aktualne IFU producenta obejmuje próbki kliniczne i niekliniczne. W zastosowaniach klinicznych medium może stanowić element workflow diagnostycznego służącego do hodowli mikroorganizmów z materiału pobranego od pacjenta z podejrzeniem zakażenia.

PO5012A nie jest jednak samodzielnym testem diagnostycznym. Wzrost mikroorganizmu na nieselektywnym medium wymaga dalszej identyfikacji i, jeśli jest to wskazane, wykonania dodatkowych badań.

Produkt jest:

• IVD,
• przeznaczony do profesjonalnego stosowania,
• nieautomatyczny,
• nie jest diagnostyką towarzyszącą.

Zastosowania niekliniczne - żywność, przemysł i kontrola jakości

Thermo Scientific™ opisuje TSA również w kontekście metod badania żywności oraz zastosowań nieklinicznych. Dzięki nieselektywnej formulacji medium może być stosowane w procedurach przemysłowych i kontroli jakości, jeżeli odpowiednia metoda wskazuje Casein Soya Bean Digest Agar.

Może to obejmować odpowiednio zwalidowane:

• badania produktów,
• kontrole mikrobiologiczne surowców,
• badania czystości,
• procedury kontroli jakości,
• badania rozwojowe i porównawcze,
• ocenę odzysku mikroorganizmów.

Nie należy jednak przenosić jednego protokołu inkubacji lub jednego kryterium CFU pomiędzy różnymi branżami i matrycami.

Gotowe płytki a TSA w postaci sypkiej

PO5012A jest wariantem gotowym do bezpośredniego użycia. Laboratorium nie musi samodzielnie:

• odważać podłoża,
• rozpuszczać składników,
• korygować parametrów przygotowania,
• prowadzić sterylizacji w autoklawie,
• aseptycznie rozlewać płytek.

Gotowe medium może dzięki temu wspierać powtarzalność kolejnych serii analiz i ograniczać czas potrzebny na przygotowanie rutynowych badań.

Laboratoria wymagające samodzielnego przygotowania większych objętości mogą wybrać Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar CM0131B 500 g.

Przechowywanie i przygotowanie do użycia

PO5012A należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 2-12°C i chronić przed światłem.

Przed wykonaniem posiewu:

• płytki należy doprowadzić do temperatury pokojowej,
• nie należy ich preinkubować,
• należy sprawdzić integralność opakowania,
• należy ocenić wygląd medium,
• nie stosować po upływie terminu ważności.

Produktu nie należy używać w przypadku:

• widocznego uszkodzenia płytki lub opakowania,
• oznaki kontaminacji,
• nietypowej zmiany barwy,
• innych oznak pogorszenia jakości.

Aktualna karta produktu wskazuje 26 tygodni trwałości katalogowej, natomiast nadrzędny jest zawsze termin przydatności umieszczony na etykiecie konkretnej partii.

Ergonomia i trwałość

Gotowe płytki PO5012A ograniczają liczbę operacji manualnych wymaganych przed wykonaniem posiewu. Ma to szczególne znaczenie w laboratoriach prowadzących rutynowe serie analiz mikrobiologicznych, gdzie standaryzacja medium może ułatwiać kontrolę zmienności procesu.

Opakowanie zawiera 10 płytek 90 mm owiniętych folią. Gotowe podłoże umożliwia szybkie włączenie nowej partii do pracy po wykonaniu wymaganej przez laboratorium kontroli przyjęcia i kwalifikacji.

Normy, farmakopee, GLP, GMP i SOP

Tryptone Soya Agar jest medium występującym w licznych metodach farmakopealnych i mikrobiologicznych. Producent określa jego formulację jako zgodną z formulacjami opisanymi w odpowiednich międzynarodowych farmakopeach.

PO5012A może być stosowany w laboratoriach pracujących zgodnie z:

• GLP,
• GMP,
• zatwierdzonymi SOP,
• systemami zarządzania jakością,
• odpowiednimi metodami farmakopealnymi i normatywnymi

- jeżeli konkretna metoda dopuszcza ten wariant medium i laboratorium prawidłowo go zakwalifikowało.

Samo użycie PO5012A nie zapewnia automatycznej zgodności badania z USP, Ph. Eur., JP, ISO, GLP lub GMP. Zgodność odnosi się do całego procesu badawczego.

SOP i LIMS - dokumentowanie użycia gotowego medium

W ramach rutynowej kontroli jakości można dokumentować między innymi:

• numer katalogowy PO5012A,
• numer LOT,
• termin ważności,
• datę otwarcia opakowania,
• rodzaj próbki,
• zastosowaną metodę,
• objętość lub sposób naniesienia inokulum,
• warunki inkubacji,
• liczbę uzyskanych CFU,
• wynik kontroli jakości,
• identyfikację operatora.

Dane te mogą być integrowane z systemem LIMS zgodnie z procedurami funkcjonującymi w danym laboratorium.

Zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ CASO / Tryptone Soya Agar PO5012A może być stosowany między innymi w:

• ogólnej hodowli mikroorganizmów,
• odpowiednich testach oznaczania liczby drobnoustrojów,
• izolacji czystych kultur,
• utrzymywaniu odpowiednich kultur laboratoryjnych,
• kontroli produktywności i selektywności podłoży,
• badaniach mikrobiologicznych próbek klinicznych,
• badaniach próbek nieklinicznych,
• procedurach farmakopealnych, jeśli wymagają TSA / Soybean-Casein Digest Agar,
• kontroli jakości produktów i procesów,
• laboratoriach mikrobiologicznych, klinicznych, farmaceutycznych, przemysłowych i badawczych.

FAQ - Thermo Scientific™ Oxoid™ CASO Tryptone Soya Agar PO5012A

Thermo Scientific™ Oxoid™ CASO Tryptone Soya Agar w ofercie BestLabs

Thermo Scientific™ Oxoid™ PO5012A to gotowe, bogate podłoże TSA łączące szerokie spektrum wzrostowe z wygodnym formatem 10 płytek 90 mm po około 17 ml. Nieselektywna formulacja oparta na tryptonie i peptonie sojowym umożliwia wykorzystanie medium w wielu profesjonalnych procedurach mikrobiologicznych.

Podłoże może być stosowane do hodowli mikroorganizmów, odpowiednich oznaczeń liczby drobnoustrojów, izolacji kultur oraz jako medium referencyjne w kontroli jakości podłoży selektywnych. Dokładne warunki badania powinny zawsze wynikać z właściwej normy, farmakopei, IFU lub zatwierdzonego SOP.

Sprawdź także Oxoid™ Tryptone Soya Agar CM0131B w postaci sypkiej, pozostałe podłoża gotowe na płytkach, szczepy kontrolne oraz pełną kategorię podłoża mikrobiologiczne.