Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS - gotowa pożywka z 5% krwią owczą do hodowli bakterii wymagających i oceny hemolizy, 10 szt.

Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS PB5039A to gotowa, bogata i nieselektywna pożywka mikrobiologiczna z 5% defibrynowanej krwi owczej, przeznaczona do izolacji oraz hodowli wymagających mikroorganizmów, a także do czytelnej oceny ich reakcji hemolitycznych. Podłoże znajduje zastosowanie przede wszystkim podczas pracy z bakteriami z rodzaju Staphylococcus i Streptococcus, ale wspiera również wzrost wielu innych mikroorganizmów zdolnych do namnażania się na wzbogaconym agarze z krwią.

Połączenie odżywczej bazy Columbia Agar i 5% krwi owczej umożliwia uzyskanie dobrze rozwiniętych kolonii oraz ocenę zmian zachodzących w erytrocytach wokół wzrostu. Pozwala to obserwować między innymi hemolizę alfa i beta, będące istotnymi cechami fenotypowymi wykorzystywanymi podczas wstępnego różnicowania mikroorganizmów.

Wariant o numerze katalogowym PB5039A jest dostarczany jako 10 gotowych płytek Petriego o średnicy 90 mm. Producent określa masę napełnienia na 17 g ±5%, pH na 7,3 ±0,2 oraz wygląd jako nieprzezroczyste podłoże o intensywnie czerwonej barwie.

Produkt jest wyrobem do diagnostyki in vitro - IVD, przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania. Dla wariantu PB5039A producent wskazuje również możliwość wykorzystania próbek weterynaryjnych.

Sprawdź także podłoża gotowe na płytkach, pełną kategorię podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne oraz testy różnicowania biochemicznego dostępne w BestLabs.

Columbia Agar with Sheep Blood PLUS - wzbogacone podłoże do hodowli i oceny hemolizy

Columbia Blood Agar należy do klasycznych wzbogaconych podłoży stosowanych w mikrobiologii klinicznej i weterynaryjnej. Baza Columbia została opracowana w celu połączenia dobrych właściwości wzrostowych z możliwością uzyskania wyraźnych reakcji hemolitycznych i dobrej morfologii kolonii.

Dodatek krwi pełni podwójną funkcję. Z jednej strony zwiększa wartość odżywczą pożywki i wspiera rozwój bardziej wymagających mikroorganizmów, a z drugiej umożliwia ocenę zdolności izolatu do uszkadzania lub rozkładania erytrocytów.

Reakcja hemolityczna, wielkość jej strefy oraz morfologia kolonii mogą stanowić ważny element wstępnej charakterystyki fenotypowej. Nie są jednak wystarczające do samodzielnego potwierdzenia identyfikacji gatunkowej.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS PB5039A

Specyfikacja techniczna PB5039A

Skład Columbia Agar with Sheep Blood PLUS

Dlaczego do Columbia Agar dodawana jest krew owcza?

Defibrynowana krew owcza zwiększa wartość odżywczą podłoża oraz umożliwia obserwację wpływu rosnących mikroorganizmów na erytrocyty. Jest to szczególnie istotne w przypadku bakterii, dla których charakter hemolizy stanowi jedną z klasycznych cech fenotypowych.

Wariant PB5039A zawiera 5% krwi owczej. Nie należy mylić go z innymi produktami Columbia Agar producenta zawierającymi inne stężenie krwi.

Wartość 5% jest istotna także z punktu widzenia powtarzalności obrazu kolonii i reakcji hemolitycznych - dlatego w procedurach laboratoryjnych należy stosować dokładnie wariant podłoża wymagany przez daną metodę.

Hemoliza beta - całkowita hemoliza erytrocytów

Beta-hemoliza jest obserwowana jako wyraźna, przejrzysta strefa wokół kolonii, wynikająca z rozkładu erytrocytów w podłożu.

W kontroli jakości PB5039A producent wykorzystuje między innymi Streptococcus pyogenes ATCC® 12344™, dla którego oczekiwany jest wzrost jasnoszarych kolonii z beta-hemolizą.

Beta-hemoliza może być ważną cechą podczas wstępnego różnicowania paciorkowców i innych bakterii, ale nie jest sama w sobie wystarczająca do identyfikacji gatunkowej.

Hemoliza alfa - częściowa hemoliza

Alfa-hemoliza prowadzi do powstania zielonkawego zabarwienia oraz wąskiej strefy częściowej hemolizy wokół kolonii.

W aktualnym IFU PB5039A producent wykorzystuje jako organizm kontrolny Streptococcus pneumoniae ATCC® 6305™, który tworzy ciemnoszare kolonie z typową alfa-hemolizą.

Thermo Scientific wskazuje również, że Columbia Agar with Sheep Blood PLUS zapewnia typowy wzrost S. pneumoniae, w tym charakterystyczną morfologię kolonii określaną jako dent morphology.

Brak hemolizy - hemoliza gamma

W klasycznej terminologii mikrobiologicznej gamma-hemoliza oznacza brak widocznego rozkładu erytrocytów wokół kolonii. Podłoże zachowuje wówczas swoją typową barwę w bezpośrednim otoczeniu wzrostu.

Ocena reakcji alfa, beta lub braku hemolizy powinna być wykonywana przy odpowiednim oświetleniu i wraz z oceną morfologii kolonii.

Typ hemolizy może być zależny od szczepu oraz od rodzaju krwi zastosowanej w podłożu. Wyniku nie należy interpretować w oderwaniu od dalszych badań identyfikacyjnych.

Columbia Agar with Sheep Blood PLUS a identyfikacja Staphylococcus spp.

Producent wskazuje podłoże między innymi do pracy z Staphylococcus spp.. Krew owcza pozwala obserwować reakcje hemolityczne, które mogą być elementem wstępnej charakterystyki izolatu.

W kontroli jakości PB5039A stosowane są między innymi:

• Staphylococcus aureus ATCC® 25923™ - dobry wzrost, białe kolonie,
• Staphylococcus aureus ATCC® 6538™ - dobry wzrost, żółte kolonie z hemolizą.

Nie każdy szczep S. aureus musi jednak dawać identyczny obraz. Kolor kolonii oraz obecność hemolizy są cechami presumptywnymi i wymagają dalszego potwierdzenia.

Do kolejnych etapów diagnostyki można wykorzystać odpowiednie testy różnicowania biochemicznego.

Columbia Agar with Sheep Blood PLUS a Streptococcus spp.

Agar z krwią jest jednym z podstawowych podłoży wykorzystywanych podczas izolacji i oceny paciorkowców, ponieważ różnice w obrazie hemolizy mogą dostarczać istotnych informacji diagnostycznych.

Na jednej płytce można jednocześnie oceniać:

• wzrost mikroorganizmu,
• wielkość kolonii,
• barwę kolonii,
• morfologię powierzchni,
• obecność lub brak hemolizy,
• typ reakcji hemolitycznej.

Informacje te mogą ukierunkować dalszy workflow, ale nie zastępują testów potwierdzających, takich jak badania biochemiczne, serologiczne, MALDI-TOF lub metody molekularne.

Podłoże wzbogacone, ale nieselektywne

PB5039A jest podłożem nieselektywnym. Oznacza to, że w formulacji nie zastosowano czynników mających wybiórczo hamować określoną grupę mikroorganizmów.

Dzięki temu na Columbia Agar with Sheep Blood PLUS może rosnąć szeroki zakres bakterii, w tym mikroorganizmy wymagające oraz bardziej typowe bakterie niewymagające.

Aktualna kontrola jakości producenta potwierdza wzrost między innymi:

• Streptococcus pyogenes,
• Streptococcus pneumoniae,
• Staphylococcus aureus,
• Pseudomonas aeruginosa,
• Escherichia coli.

Jeżeli celem badania jest selektywna izolacja określonej grupy bakterii, należy zastosować właściwe podłoże selektywne lub chromogenne.

Próbki kliniczne i weterynaryjne

Aktualne IFU Thermo Scientific wskazuje PB5039A do izolacji i hodowli wymagających mikroorganizmów z próbek klinicznych. Producent wymienia jako przykłady materiały pochodzące między innymi z:

• ran,
• gardła,
• nosa,
• okolicy pachwinowej,
• dróg rodnych / materiałów genitalnych,
• innych lokalizacji zgodnych z właściwą procedurą diagnostyczną.

Dla dokładnego wariantu PB5039A producent potwierdza również możliwość wykorzystania materiału weterynaryjnego.

Sposób pobierania, transportu i przygotowania próbki powinien zawsze wynikać z właściwych wytycznych i SOP laboratorium.

Skrócona procedura według aktualnego IFU

Dla standardowej procedury opisanej w aktualnym IFU producent wskazuje:

Powyższy opis jest skrótem handlowo-informacyjnym, a nie instrukcją diagnostyczną. W praktyce należy stosować aktualne IFU oraz procedurę właściwą dla rodzaju próbki i badanego mikroorganizmu.

Kontrola jakości PB5039A

Aktualne IFU Thermo Scientific wymienia dla dokładnego wariantu PB5039A następujące organizmy kontrolne:

Dla S. pyogenes producent stosuje inokulum 50-120 CFU i kryterium liczby kolonii wynoszącej co najmniej 50% wyniku uzyskanego na podłożu kontrolnym. Dla pozostałych wskazanych szczepów kontrolnych w IFU wykorzystywane jest wyższe inokulum.

Własny zakres QC powinien być dostosowany do zamierzonego zastosowania, lokalnych wymagań oraz systemu jakości laboratorium. Odpowiednie materiały referencyjne znajdziesz w kategorii szczepy kontrolne.

Ograniczenia interpretacji hemolizy

Producent podkreśla, że reakcja hemolityczna zależy od konkretnego szczepu i w przypadku niektórych mikroorganizmów może również zmieniać się w zależności od rodzaju krwi zastosowanej w medium.

Dlatego:

• nie należy identyfikować mikroorganizmu wyłącznie na podstawie hemolizy,
• brak typowej reakcji nie musi wykluczać danego gatunku,
• nietypowa morfologia powinna zostać zweryfikowana,
• należy uwzględnić wyniki innych badań identyfikacyjnych,
• wszystkie identyfikacje na podstawie obrazu wzrostu są presumptywne.

Ograniczenia wzrostu mikroorganizmów

Mimo że Columbia Agar with Sheep Blood PLUS jest bogatym medium wzbogaconym, nie zapewnia wzrostu każdego możliwego mikroorganizmu.

Producent wskazuje, że ze względu na różnice w wymaganiach odżywczych niektóre szczepy mogą:

• rosnąć wolniej,
• tworzyć mniej typowe kolonie,
• wykazywać odmienną hemolizę,
• rosnąć słabo lub nie rosnąć w danych warunkach.

W razie potrzeby należy zastosować dodatkowe podłoża, warunki atmosferyczne oraz metody przewidziane w odpowiednim workflow diagnostycznym.

Przechowywanie i trwałość

Columbia Agar with Sheep Blood PLUS PB5039A należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 2-12°C, z dala od światła.

Aktualna karta Thermo Scientific podaje dla tego wariantu trwałość 12 tygodni. Wiążącą informacją pozostaje jednak zawsze termin ważności znajdujący się na etykiecie konkretnej partii.

Producent zaleca przed użyciem doprowadzenie płytki do temperatury pokojowej. Podłoża nie należy preinkubować przed zastosowaniem.

Nie należy używać płytek:

• po upływie terminu ważności,
• z uszkodzonym opakowaniem,
• z widocznym zanieczyszczeniem,
• w przypadku zmiany barwy,
• w przypadku wysuszenia lub innych oznak pogorszenia jakości.

Gotowe podłoże - ergonomia i powtarzalność

Gotowy format PB5039A eliminuje konieczność samodzielnego przygotowywania agaru z krwią. Laboratorium nie musi wykonywać takich etapów jak:

• przygotowanie bazy Columbia Agar,
• sterylizacja medium,
• kontrolowane schładzanie podłoża,
• aseptyczne dodawanie krwi,
• homogenizacja wzbogaconego medium,
• rozlewanie płytek,
• kontrola ilości medium w każdej płytce.

Może to ograniczyć zmienność związaną z przygotowaniem własnych partii i usprawnić codzienną pracę w laboratoriach diagnostycznych i badawczych.

Zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS PB5039A znajduje zastosowanie między innymi w:

• mikrobiologii klinicznej,
• mikrobiologii weterynaryjnej,
• izolacji wymagających bakterii,
• hodowli Staphylococcus spp.,
• hodowli Streptococcus spp.,
• ocenie hemolizy alfa i beta,
• obserwacji morfologii kolonii,
• przygotowaniu czystych izolatów do dalszej identyfikacji,
• kontroli jakości,
• laboratoriach badawczych i R&D.

IVD, GLP, SOP i systemy jakości

PB5039A jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym do profesjonalnego stosowania. Produkt nie jest systemem automatycznym ani diagnostyką towarzyszącą.

Może być elementem procedur realizowanych zgodnie z GLP, SOP i systemami zarządzania jakością, jeżeli został właściwie dobrany do badania, zweryfikowany i objęty odpowiednią kontrolą jakości.

Numer partii, data ważności, warunki przechowywania, informacje o próbce, warunki inkubacji i wynik mogą być dokumentowane w systemie LIMS lub innym systemie wykorzystywanym przez laboratorium.

Samo zastosowanie gotowego Columbia Agar with Sheep Blood PLUS nie powoduje automatycznej zgodności całej procedury z określoną normą, GLP, GMP ani innym systemem jakości.

FAQ - Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS PB5039A

Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS w ofercie BestLabs

Thermo Scientific™ Oxoid™ Columbia Agar with Sheep Blood PLUS PB5039A to profesjonalne, wzbogacone podłoże z 5% defibrynowanej krwi owczej przeznaczone do hodowli wymagających mikroorganizmów i czytelnej obserwacji reakcji hemolitycznych.

Format 10 gotowych płytek 90 mm, kontrolowany skład oraz wysoka wartość odżywcza pozwalają wykorzystać medium w rutynowych procedurach diagnostycznych, weterynaryjnych, badawczych i kontrolnych.

Sprawdź również pozostałe podłoża gotowe na płytkach, podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne oraz testy różnicowania biochemicznego.