ComASP® Cefiderocol 0,008-128 - płytka do oznaczenia MIC metodą mikrorozcieńczeń

Liofilchem ComASP Cefiderocol 0,008-128 µg/ml - panel BMD do oznaczania MIC, 8 testów

Liofilchem ComASP Cefiderocol 0,008-128 to wyrób diagnostyczny in vitro przeznaczony do ilościowego oznaczania minimalnego stężenia hamującego MIC cefiderokolu wobec wyizolowanych bakterii Gram-ujemnych. Panel wykorzystuje metodę mikrorozcieńczeń w bulionie BMD według ISO 20776-1.

Zakres przeznaczenia producenta obejmuje Enterobacterales, Pseudomonas aeruginosa, kompleks Acinetobacter baumannii i Stenotrophomonas maltophilia. Zestaw zawiera podłoże Mueller-Hinton zubożone w żelazo, wymagane do prawidłowego oznaczania aktywności cefiderokolu.

Kluczowe cechy i parametry techniczne

Zakres badanych mikroorganizmów

Zgodnie z deklarowanym przeznaczeniem panel może być stosowany do oznaczania MIC cefiderokolu wobec następujących niekapryśnych bakterii Gram-ujemnych:

• Enterobacterales,
• Pseudomonas aeruginosa,
• kompleks Acinetobacter baumannii,
• Stenotrophomonas maltophilia.

Panel nie jest przeznaczony do badania materiału klinicznego bezpośrednio. Drobnoustrój należy wcześniej wyizolować na nieselektywnym podłożu, takim jak agar z krwią lub agar tryptozowo-sojowy. Hodowla mieszana wymaga oczyszczenia przez subkulturę.

Producent zaleca stosowanie świeżej, czystej hodowli, która zasadniczo nie powinna być starsza niż 24 godziny. Do przygotowania subkultury nie należy używać podłoży różnicujących zawierających substraty chromogenne lub fluorogenne.

Konfiguracja stężeń cefiderokolu

Każdy z dwóch torów testowych zawiera studzienkę kontroli wzrostu oraz cefiderokol w następujących stężeniach:

0,008; 0,016; 0,032; 0,064; 0,125; 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 32; 64 i 128 µg/ml.

Studzienka kontroli wzrostu nie zawiera substancji przeciwdrobnoustrojowej. Obecność prawidłowego wzrostu w tej studzience jest warunkiem ważności oznaczenia.

Zawartość zestawu

• 4 panele ComASP Cefiderocol 0,008-128, pakowane indywidualnie z pochłaniaczem wilgoci,
• 8 probówek Iron-Depleted Mueller Hinton Broth, ID-MHB, po 3,6 ml,
• folia uszczelniająca,
• instrukcja użycia,
• formularz wyników.

Materiały wymagane, lecz niedostarczane

• jałowy roztwór fizjologiczny do przygotowania i rozcieńczenia zawiesiny,
• wzorzec mętności 0,5 McFarlanda lub urządzenie do standaryzacji inokulum,
• nieselektywne podłoże hodowlane,
• ezy, wymazówki i probówki laboratoryjne,
• pipety oraz jednorazowe końcówki,
• inkubator zapewniający wymagane warunki hodowli,
• odpowiednie szczepy kontroli jakości.

Przygotowanie inokulum i wykonanie oznaczenia

1. Wyjąć panel z koperty i pozostawić na 10 minut w temperaturze pokojowej.
2. Przygotować zawiesinę czystego izolatu metodą bezpośrednią z kolonii lub metodą hodowlaną.
3. Ustawić mętność zawiesiny na poziomie 0,5 McFarlanda.
4. Optymalnie w ciągu 15 minut rozcieńczyć zawiesinę w stosunku 1:20 w jałowym roztworze fizjologicznym, otrzymując roztwór A.
5. Dodać 0,4 ml roztworu A do probówki zawierającej 3,6 ml dołączonego bulionu ID-MHB, otrzymując roztwór B.
6. Do każdej studzienki wybranego toru testowego wprowadzić po 100 µl roztworu B.
7. Przykryć panel i inkubować przez 16-20 godzin w temperaturze 36 ±2°C, w powietrzu atmosferycznym.

Procedura panelowa jest wykonywana manualnie. Powyższy opis stanowi skrót i nie zastępuje aktualnej instrukcji użycia producenta ani zatwierdzonej procedury SOP.

Odczyt wartości MIC

Po inkubacji należy najpierw ocenić studzienkę kontroli wzrostu. Brak wzrostu w kontroli powoduje nieważność oznaczenia i wymaga sprawdzenia żywotności hodowli oraz powtórzenia badania.

Wzrost może występować w postaci zmętnienia albo osadu na dnie studzienki. Wartość MIC stanowi najniższe stężenie cefiderokolu, które hamuje widoczny wzrost drobnoustroju, tworząc wyraźny punkt końcowy.

Wizualną ocenę ułatwia jasne, pośrednie oświetlenie oraz ciemne tło. Instrukcja producenta dopuszcza również odczyt automatyczny, jeżeli laboratorium dysponuje odpowiednio zwalidowanym systemem i procedurą interpretacji.

Interpretacja wyników

Wynik MIC należy interpretować według aktualnych kryteriów przyjętych przez laboratorium, na przykład aktualnej tabeli EUCAST. Nie należy opierać kategoryzacji na punktach granicznych skopiowanych ze starszej wersji instrukcji produktu.

Dla Enterobacterales i Pseudomonas aeruginosa EUCAST publikuje kliniczne punkty graniczne umożliwiające przypisanie kategorii lekowrażliwości.

Dla kompleksu Acinetobacter baumannii i Stenotrophomonas maltophilia aktualne tabele EUCAST nie podają klasycznych klinicznych punktów granicznych S/I/R. Wyniki należy oceniać według szczegółowych uwag EUCAST dotyczących MIC, wykrywanych mechanizmów oporności, dostępnych danych klinicznych oraz możliwości terapeutycznych.

Wynik oznaczenia in vitro nie stanowi samodzielnej rekomendacji terapeutycznej. Powinien być interpretowany przez wykwalifikowany personel wraz z identyfikacją drobnoustroju, miejscem zakażenia, informacjami klinicznymi i aktualnymi wytycznymi.

Kontrola jakości

Producent wskazuje następujące szczepy kontroli jakości:

• Escherichia coli ATCC 25922 / NCTC 12241,
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 / NCTC 12903.

Deklarowany w instrukcji zakres MIC cefiderokolu dla obu szczepów wynosi 0,06-0,5 µg/ml. Wyników izolatów klinicznych nie należy zatwierdzać, jeżeli kontrola jakości znajduje się poza oczekiwanym zakresem.

Przy wyniku QC poza zakresem należy sprawdzić czystość i świeżość hodowli, gęstość inokulum, sposób przygotowania zawiesiny, warunki przechowywania zestawu, integralność opakowania oraz parametry inkubacji.

Charakterystyka działania

W badaniu producenta obejmującym 300 izolatów klinicznych całkowita zgodność zasadnicza z referencyjną metodą BMD wyniosła 94,3%. Wyniki dla poszczególnych grup przedstawiały się następująco:

• Enterobacterales: 94,2% dla 173 izolatów,
• Pseudomonas aeruginosa: 95,4% dla 65 izolatów,
• Acinetobacter baumannii: 93,0% dla 57 izolatów,
• Stenotrophomonas maltophilia: 100% dla 5 izolatów.

Zgodność zasadnicza oznacza wynik identyczny z metodą referencyjną lub różniący się od niego nie więcej niż o jedno dwukrotne rozcieńczenie. Wartość 100% dla S. maltophilia należy rozpatrywać z uwzględnieniem niewielkiej liczby pięciu izolatów.

Ograniczenia i bezpieczne użytkowanie

• Produkt jest przeznaczony wyłącznie do profesjonalnej diagnostyki in vitro.
• Panel należy stosować do czystych izolatów, a nie bezpośrednio do próbek klinicznych.
• Do oznaczania cefiderokolu należy używać dostarczonego podłoża ID-MHB.
• Niewłaściwa gęstość inokulum może prowadzić do zaniżenia lub zawyżenia wartości MIC.
• Zanieczyszczenie hodowli, niedokładne wymieszanie inokulum lub nieprawidłowe napełnienie studzienek mogą powodować pominięte studzienki i niejednoznaczny profil wzrostu.
• Nie należy mieszać elementów pochodzących z różnych serii zestawu.
• Paneli nie wolno używać po terminie ważności ani w przypadku uszkodzenia opakowania.
• Zużyte materiały należy dekontaminować i usuwać zgodnie z procedurami dotyczącymi materiału potencjalnie zakaźnego.

Przechowywanie i wykorzystanie drugiego testu

Zestaw należy przechowywać w temperaturze 2-8°C, w oryginalnym opakowaniu. Po otwarciu koperty panel należy wykorzystać w ciągu 7 dni i nadal przechowywać w temperaturze 2-8°C.

Jeżeli wykonano tylko jedno oznaczenie, wykorzystaną część panelu należy zabezpieczyć dostarczoną folią zgodnie z instrukcją, a panel ponownie umieścić w kopercie z pochłaniaczem wilgoci. Drugi tor może zostać wykorzystany w terminie wskazanym przez producenta.

FAQ - najczęściej zadawane pytania

Ile oznaczeń zawiera zestaw ComASP Cefiderocol?

Zestaw zawiera 4 panele, z których każdy umożliwia zbadanie dwóch izolatów. Opakowanie obejmuje łącznie 8 oznaczeń oraz 8 probówek podłoża ID-MHB.

Dlaczego test wymaga podłoża zubożonego w żelazo?

Aktywność cefiderokolu i uzyskiwana wartość MIC zależą od zawartości żelaza w podłożu. Z tego względu oznaczenie BMD należy wykonywać w specjalnym bulionie Mueller-Hinton zubożonym w żelazo.

Czy panel można zaszczepić bezpośrednio próbką kliniczną?

Nie. Drobnoustrój musi zostać wcześniej wyizolowany na nieselektywnym podłożu, a w przypadku hodowli mieszanej oczyszczony przez wykonanie subkultury.

Czy wszystkie wyniki można zaklasyfikować jako S, I lub R?

Nie. EUCAST publikuje kliniczne punkty graniczne cefiderokolu dla Enterobacterales i Pseudomonas aeruginosa. Dla Acinetobacter spp. oraz Stenotrophomonas maltophilia obowiązują szczegółowe uwagi interpretacyjne, ponieważ nie ustalono klasycznych punktów granicznych S/I/R.

Potrzebujesz pomocy w dobraniu idealnego produktu dla Twojego laboratorium? Informacje na ten temat znajdziesz tu:

Nie znalazłeś takiego produktu na BestLabs? Skontaktuj się z nami - specjaliści BestLabs na pewno znajdą odpowiedni dla Państwa produkt: