ComASP Ceftolozane-tazobactam / Ceftazidime-avibactam m 0.008/4-128/4 µg/ml / 0.008/4-128/4 µg/ml płytka do oznaczenia MIC metodą mikrorozcieńczeń op. 4 oznaczenia

ComASP® Ceftolozane-tazobactam / Ceftazidime-avibactam – panel do oznaczania MIC, 4 testy

Liofilchem® ComASP® Ceftolozane-tazobactam / Ceftazidime-avibactam to wyrób medyczny do diagnostyki in vitro przeznaczony do ilościowego oznaczania minimalnego stężenia hamującego – MIC – dwóch połączeń przeciwdrobnoustrojowych wobec tego samego izolatu:

• ceftolozanu z tazobaktamem,
• ceftazydymu z awibaktamem.

Panel stanowi kompaktową wersję referencyjnej metody mikrorozcieńczeń w bulionie – BMD. Jest przeznaczony do badania wielolekoopornych bakterii Gram-ujemnych, w tym Enterobacterales i Pseudomonas aeruginosa.

Kluczowe cechy i parametry techniczne

Konfiguracja panelu

Panel jest podzielony na dwie części. Każda zawiera osobny dołek kontroli wzrostu oraz 15 dwukrotnych rozcieńczeń odpowiedniego antybiotyku.

Ceftolozan z tazobaktamem – C/T

Stężenia ceftolozanu:

0,008; 0,016; 0,032; 0,064; 0,125; 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 32; 64 i 128 µg/ml.

W każdym dołku zawierającym antybiotyk stężenie tazobaktamu jest stałe i wynosi 4 µg/ml. Zakres należy zapisywać jako 0,008/4–128/4 µg/ml.

Ceftazydym z awibaktamem – CZA

Stężenia ceftazydymu:

0,008; 0,016; 0,032; 0,064; 0,125; 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 32; 64 i 128 µg/ml.

W każdym dołku zawierającym antybiotyk stężenie awibaktamu jest stałe i wynosi 4 µg/ml. Zakres należy zapisywać jako 0,008/4–128/4 µg/ml.

Przeznaczenie

ComASP® Ceftolozane-tazobactam / Ceftazidime-avibactam służy do oznaczania lekowrażliwości wyizolowanych, niewymagających bakterii Gram-ujemnych, w szczególności:

• Enterobacterales,
• Pseudomonas aeruginosa,
• izolatów o fenotypie wielolekooporności – MDR, należących do zatwierdzonego zakresu produktu.

Panel może wspierać diagnostykę zakażeń wywoływanych przez bakterie Gram-ujemne, w których wymagane jest ilościowe określenie wrażliwości na oba połączenia antybiotykowe.

Produkt nie służy do identyfikacji gatunku bakterii ani do bezpośredniego badania próbek klinicznych.

Zawartość zestawu

• 4 panele ComASP® Ceftolozane-tazobactam / Ceftazidime-avibactam,
• 4 probówki Mueller Hinton II Broth po 7,2 ml,
• instrukcja użycia,
• formularz wyników.

Każdy panel jest pakowany oddzielnie w foliową kopertę zawierającą środek osuszający. Jedna probówka bulionu Mueller Hinton II jest przeznaczona do przygotowania inokulum dla jednego panelu.

Materiały wymagane, ale niedostarczane

• czysta i odpowiednio świeża hodowla badanego izolatu,
• jałowy roztwór fizjologiczny,
• wzorzec mętności 0,5 McFarlanda lub urządzenie do pomiaru mętności,
• pipety i jałowe końcówki jednorazowe,
• ezy lub inne materiały do pobierania kolonii,
• probówki laboratoryjne,
• odpowiednie podłoża nieselektywne,
• inkubator zapewniający temperaturę 36 ± 2°C,
• szczepy kontroli jakości.

Przygotowanie izolatu

Panel nie jest przeznaczony do bezpośredniego stosowania z materiałem klinicznym. Drobnoustrój należy wcześniej wyizolować na nieselektywnym podłożu, takim jak agar z krwią lub TSA.

W przypadku hodowli mieszanej wybraną kolonię należy oczyścić przez wykonanie subkultury. Producent nie zaleca stosowania podłoży różnicujących zawierających substraty chromogenne lub fluorogenne do przygotowania subkultury przeznaczonej do oznaczenia.

Zalecane jest stosowanie hodowli nie starszej niż 24 godziny, chyba że dłuższa inkubacja jest niezbędna do uzyskania wystarczającego wzrostu.

Procedura wykonania oznaczenia

1. Wyjąć panel z foliowej koperty i pozostawić w temperaturze pokojowej przez około 10 minut.
2. Przygotować zawiesinę czystej hodowli badanego izolatu.
3. Ustawić mętność zawiesiny na poziomie 0,5 McFarlanda.
4. Optymalnie w ciągu 15 minut rozcieńczyć przygotowaną zawiesinę w stosunku 1:20 w jałowym roztworze fizjologicznym.
5. Dodać 0,8 ml rozcieńczonej zawiesiny do probówki zawierającej 7,2 ml bulionu Mueller Hinton II.
6. Dokładnie wymieszać przygotowane inokulum.
7. Nanieść po 100 µl inokulum do każdego dołka panelu, w obu częściach testowych.
8. Zamknąć panel i inkubować przez 16–20 godzin w temperaturze 36 ± 2°C, w powietrzu atmosferycznym.
9. Po zakończeniu inkubacji ocenić wzrost i wyznaczyć osobną wartość MIC dla każdego połączenia antybiotykowego.

Procedurę należy wykonywać zgodnie z aktualną instrukcją producenta oraz zatwierdzoną procedurą SOP laboratorium.

Odczyt wyników

Odczyt można wykonać wizualnie lub za pomocą odpowiedniego systemu automatycznego. Przy ocenie wzrokowej pomocne jest jasne, pośrednie oświetlenie oraz ciemne tło.

Wzrost może być widoczny jako zmętnienie albo osad na dnie dołka. Odczyt każdej części panelu należy rozpocząć od odpowiadającego jej dołka kontroli wzrostu.

• MIC ceftolozanu z tazobaktamem: najniższe stężenie ceftolozanu przy 4 µg/ml tazobaktamu, które hamuje widoczny wzrost.
• MIC ceftazydymu z awibaktamem: najniższe stężenie ceftazydymu przy 4 µg/ml awibaktamu, które hamuje widoczny wzrost.

Jeżeli w odpowiednim dołku kontrolnym nie występuje wzrost, wyniku tej części panelu nie można uznać za ważny. Należy sprawdzić żywotność hodowli oraz powtórzyć oznaczenie przy użyciu nowego panelu i świeżej kultury.

Interpretacja wartości MIC

Uzyskane wartości MIC należy interpretować zgodnie z aktualną wersją kryteriów EUCAST lub CLSI, właściwą dla badanego gatunku i standardu stosowanego w laboratorium.

Sam wynik MIC nie powinien być interpretowany bez uwzględnienia identyfikacji drobnoustroju, mechanizmów oporności, miejsca zakażenia, danych klinicznych oraz obowiązujących zasad raportowania.

Kontrola jakości

Producent wskazuje następujące szczepy kontrolne i oczekiwane zakresy MIC:

Stężenie tazobaktamu i awibaktamu w oznaczeniach kontroli jakości jest stałe i wynosi 4 µg/ml. Wykorzystanie S. aureus jako szczepu kontrolnego nie rozszerza przeznaczenia klinicznego panelu na bakterie Gram-dodatnie.

Jeżeli wynik kontroli znajduje się poza właściwym zakresem, nie należy raportować wyników klinicznych do czasu ustalenia przyczyny i uzyskania prawidłowego wyniku QC.

Charakterystyka działania według producenta

W ocenie producenta obejmującej 300 izolatów klinicznych wyniki panelu porównano z referencyjną metodą mikrorozcieńczeń w bulionie.

Ceftolozan z tazobaktamem

• Zgodność zasadnicza – EA: 94,0%.
• Zgodność kategorii – CA: 98,3%.

Ceftazydym z awibaktamem

• Zgodność zasadnicza – EA: 93,0%.
• Zgodność kategorii – CA: 98,3%.

Producent deklaruje ponadto odtwarzalność na poziomie 98,1%. Powtarzalność w granicach jednego dwukrotnego rozcieńczenia wyniosła 100% dla ceftolozanu z tazobaktamem oraz 96,7% dla ceftazydymu z awibaktamem.

Dane te opisują walidację producenta i nie zastępują weryfikacji systemu przeprowadzanej przez laboratorium przed wdrożeniem metody do rutynowej diagnostyki.

Warunki przechowywania

• Przechowywać w temperaturze 2–8°C.
• Przechowywać w oryginalnym opakowaniu.
• Nie otwierać foliowej koperty przed rozpoczęciem oznaczenia.
• Nie stosować po upływie terminu ważności podanego na etykiecie.
• Nie używać paneli lub probówek wykazujących oznaki uszkodzenia albo pogorszenia jakości.
• Nie łączyć komponentów pochodzących z różnych serii produktu.

Panel jest przeznaczony do jednorazowego wykonania kompletnego oznaczenia jednego izolatu wobec obu połączeń antybiotykowych.

Bezpieczeństwo i ograniczenia

• Produkt jest przeznaczony wyłącznie do profesjonalnej diagnostyki in vitro.
• Nie stosować bezpośrednio z materiałem klinicznym.
• Panel nie identyfikuje gatunku ani mechanizmu oporności badanego izolatu.
• Nieprawidłowa gęstość inokulum może prowadzić do zaniżenia lub zawyżenia wartości MIC.
• Brak prawidłowego wzrostu w dołku kontrolnym powoduje nieważność oznaczenia.
• Nieregularny wzrost lub pominięte dołki mogą wskazywać na kontaminację, nieprawidłowe wymieszanie albo błędne zaszczepienie panelu.

Badane hodowle oraz wszystkie materiały mające z nimi kontakt należy traktować jako potencjalnie zakaźne. Po użyciu panel i pozostałe materiały należy poddać dekontaminacji i usunąć zgodnie z procedurami laboratorium.

FAQ – najczęściej zadawane pytania

Ile testów zawiera zestaw?

Zestaw zawiera cztery panele. Każdy panel umożliwia zbadanie jednego izolatu wobec dwóch połączeń antybiotykowych, dlatego opakowanie wystarcza na cztery kompletne oznaczenia.

Czy jeden panel można wykorzystać do zbadania dwóch izolatów?

Nie. Cały panel jest przeznaczony dla jednego izolatu. Jedna część oznacza MIC ceftolozanu z tazobaktamem, a druga MIC ceftazydymu z awibaktamem.

Jakie są zakresy stężeń antybiotyków?

Ceftolozan i ceftazydym występują w zakresie od 0,008 do 128 µg/ml. Stężenie tazobaktamu i awibaktamu jest stałe i wynosi 4 µg/ml.

Dla jakich drobnoustrojów przeznaczony jest panel?

Panel służy do badania bakterii Gram-ujemnych, w tym Enterobacterales i Pseudomonas aeruginosa, należących do zakresu przeznaczenia określonego przez producenta.

Czy panel można zaszczepić bezpośrednio materiałem klinicznym?

Nie. Drobnoustrój musi zostać wcześniej wyizolowany i uzyskany w postaci czystej, odpowiednio świeżej hodowli.

Jak długo trwa inkubacja?

Panel inkubuje się przez 16–20 godzin w temperaturze 36 ± 2°C, w powietrzu atmosferycznym.

Jak odczytuje się wynik?

Dla każdego połączenia antybiotykowego MIC odpowiada najniższemu stężeniu cefalosporyny, przy stałym stężeniu inhibitora 4 µg/ml, które całkowicie hamuje widoczny wzrost izolatu.

Czy można stosować wartości graniczne wydrukowane w instrukcji bez weryfikacji?

Nie. Wynik należy interpretować według aktualnych kryteriów EUCAST lub CLSI obowiązujących w laboratorium, ponieważ wartości graniczne są regularnie aktualizowane.

Potrzebujesz pomocy w dobraniu panelu do oznaczania MIC lub właściwych szczepów kontroli jakości? Informacje na ten temat znajdziesz tu:

Nie znalazłeś odpowiedniego panelu na BestLabs? Skontaktuj się z nami – specjaliści BestLabs pomogą dobrać produkt do badanego drobnoustroju i stosowanego standardu AST: