ComASP Piperacillin-tazobactam 0.008/4-128/4 µg/ml, płytka do oznaczenia MIC metodą mikrorozcieńczeń op. 8 oznaczeń

Liofilchem® ComASP® Piperacillin-tazobactam 0,008/4–128/4 – panel do oznaczania MIC

ComASP® Piperacillin-tazobactam 0,008/4–128/4 to wyrób medyczny do diagnostyki in vitro przeznaczony do ilościowego oznaczania minimalnego stężenia hamującego – MIC piperacyliny z tazobaktamem wobec wyizolowanych bakterii Gram-ujemnych.

Panel stanowi kompaktową wersję referencyjnej metody mikrorozcieńczeń w bulionie – BMD. Zawiera wysuszoną kombinację piperacyliny i tazobaktamu w 15 kolejnych, dwukrotnych rozcieńczeniach oraz dołek kontroli wzrostu. System jest przeznaczony do wykonywania oznaczeń manualnych przez wykwalifikowany personel laboratorium mikrobiologicznego.

Kluczowe cechy i parametry techniczne

Zakres stężeń na panelu

Każdy z dwóch torów testowych zawiera dołek kontroli wzrostu oraz następujące stężenia piperacyliny:

0,008; 0,016; 0,032; 0,064; 0,125; 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 32; 64 i 128 µg/ml.

We wszystkich dołkach zawierających antybiotyk stężenie tazobaktamu jest stałe i wynosi 4 µg/ml. Prawidłowy zapis zakresu produktu to zatem 0,008/4–128/4 µg/ml.

Zapis „0,008/4–128/8” występujący w jednym miejscu instrukcji producenta należy traktować jako omyłkę redakcyjną. Nazwa produktu, konfiguracja panelu i przypis do tabeli jednoznacznie wskazują na stałe stężenie tazobaktamu wynoszące 4 µg/ml.

Przeznaczenie

ComASP® Piperacillin-tazobactam jest przeznaczony do oznaczania lekowrażliwości czystych hodowli niewymagających bakterii Gram-ujemnych należących do:

• Enterobacterales,
• Pseudomonas aeruginosa.

Produkt może być stosowany w laboratoriach diagnostycznych wykonujących oznaczenia AST izolatów pochodzących z materiałów klinicznych. Wynik MIC, po interpretacji według aktualnych kryteriów, może wspierać dobór właściwego postępowania przeciwdrobnoustrojowego.

Panel nie służy do identyfikacji gatunku bakterii. Przed wykonaniem oznaczenia izolat powinien zostać prawidłowo zidentyfikowany, a hodowla musi być czysta i odpowiednio świeża.

Zawartość zestawu

• 4 panele ComASP®, każdy przeznaczony do wykonania dwóch oznaczeń,
• 8 probówek Mueller Hinton II Broth po 3,6 ml,
• folia uszczelniająca,
• instrukcja użycia,
• formularz wyników.

Każdy panel jest pakowany oddzielnie w foliową kopertę zawierającą środek osuszający. Łącznie zestaw umożliwia wykonanie 8 oznaczeń MIC.

Materiały wymagane, ale niedostarczane z zestawem

• czysta, świeża hodowla badanego izolatu,
• jałowy roztwór fizjologiczny,
• wzorzec mętności 0,5 McFarlanda lub urządzenie do pomiaru mętności,
• pipety i jałowe końcówki jednorazowe,
• ezy lub inne materiały do pobierania kolonii,
• probówki laboratoryjne,
• odpowiednie podłoża nieselektywne,
• inkubator zapewniający temperaturę 36 ± 2°C,
• szczepy kontroli jakości.

Przygotowanie izolatu

Panelu nie należy inokulować bezpośrednio materiałem klinicznym. Badany drobnoustrój musi zostać wcześniej wyizolowany na nieselektywnym podłożu, takim jak agar z krwią lub TSA.

W przypadku hodowli mieszanej wybraną kolonię należy oczyścić przez wykonanie subkultury. Producent nie zaleca stosowania podłoży różnicujących zawierających substraty chromogenne lub fluorogenne do przygotowania subkultury przeznaczonej do oznaczenia.

Zalecane jest stosowanie hodowli nie starszej niż 24 godziny, chyba że dłuższa inkubacja jest niezbędna do uzyskania odpowiedniego wzrostu.

Procedura wykonania oznaczenia

1. Wyjąć panel z koperty i pozostawić w temperaturze pokojowej przez około 10 minut.
2. Przygotować zawiesinę czystej hodowli badanego izolatu.
3. Ustawić mętność zawiesiny na poziomie 0,5 McFarlanda.
4. Optymalnie w ciągu 15 minut rozcieńczyć zawiesinę w stosunku 1:20 w jałowym roztworze fizjologicznym.
5. Dodać 0,4 ml rozcieńczonej zawiesiny do probówki zawierającej 3,6 ml bulionu Mueller Hinton II.
6. Dokładnie wymieszać przygotowane inokulum.
7. Nanieść po 100 µl inokulum do każdego dołka wybranego toru A lub B.
8. Zamknąć panel i inkubować przez 16–20 godzin w temperaturze 36 ± 2°C, w powietrzu atmosferycznym.
9. Po inkubacji ocenić wzrost i wyznaczyć wartość MIC.

Procedurę należy wykonywać zgodnie z aktualną instrukcją producenta oraz zatwierdzoną procedurą SOP laboratorium.

Odczyt wyniku MIC

Odczyt należy rozpocząć od dołka kontroli wzrostu. Widoczny wzrost w tym dołku potwierdza żywotność badanego izolatu i prawidłowy przebieg inkubacji.

• Wzrost: zmętnienie lub osad widoczny na dnie dołka.
• Brak wzrostu: przejrzysta zawartość dołka bez osadu odpowiadającego wzrostowi w kontroli.
• Wartość MIC: najniższe stężenie piperacyliny z 4 µg/ml tazobaktamu, przy którym nie stwierdza się widocznego wzrostu.

Wynik może być oceniany wizualnie przy użyciu jasnego, pośredniego oświetlenia i ciemnego tła albo za pomocą kompatybilnego systemu automatycznego.

Jeśli w dołku kontroli nie wystąpi wzrost, oznaczenie jest nieważne. Należy sprawdzić żywotność hodowli i powtórzyć badanie, wykorzystując świeży izolat oraz nieużywany tor panelu.

Interpretacja wyniku

Otrzymaną wartość MIC należy interpretować zgodnie z aktualnie obowiązującymi kryteriami EUCAST lub CLSI, właściwymi dla badanego gatunku, miejsca zakażenia i standardu stosowanego przez laboratorium.

Dla niektórych kombinacji drobnoustrój–antybiotyk wynik może być raportowany w kategorii I – wrażliwy przy zwiększonej ekspozycji. Kategoria ta nie oznacza wyniku pośredniego i wymaga uwzględnienia właściwego schematu ekspozycji na lek.

Kontrola jakości

Producent wskazuje następujące szczepy referencyjne i zakresy QC:

• Staphylococcus aureus ATCC® 29213 – 0,25–2 µg/ml,
• Enterococcus faecalis ATCC® 29212 – 1–4 µg/ml,
• Escherichia coli ATCC® 25922 – 1–4 µg/ml,
• Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 – 1–8 µg/ml,
• Escherichia coli ATCC® 35218 – 0,5–2 µg/ml,
• Klebsiella pneumoniae ATCC® 700603 – 8–32 µg/ml.

Wymienienie S. aureus i E. faecalis wśród szczepów kontrolnych nie oznacza rozszerzenia przeznaczenia klinicznego panelu na bakterie Gram-dodatnie. Szczepy te służą wyłącznie do kontroli jakości metody.

Jeżeli wynik szczepu kontrolnego znajduje się poza oczekiwanym zakresem, nie należy raportować wyników klinicznych do czasu ustalenia przyczyny i uzyskania prawidłowej kontroli.

Charakterystyka działania

W badaniu producenta obejmującym 300 izolatów klinicznych wyniki ComASP® porównano z referencyjną metodą mikrorozcieńczeń w bulionie. Producent deklaruje:

• zgodność zasadniczą EA: 99,0%,
• zgodność kategorii CA: 97,3%,
• powtarzalność: 100% wyników w zakresie jednego podwójnego rozcieńczenia,
• odtwarzalność: 98,9% wyników w zakresie jednego podwójnego rozcieńczenia.

Dane te opisują wyniki walidacji producenta i nie zastępują lokalnej weryfikacji metody wymaganej przed wdrożeniem systemu do rutynowej diagnostyki.

Przechowywanie otwartego panelu

Każdy panel zawiera dwa niezależne tory testowe. Jeżeli wykorzystano tylko jeden z nich:

1. zaszczepione dołki należy szczelnie zabezpieczyć dołączoną folią,
2. panel należy umieścić ponownie w jego oryginalnej kopercie ze środkiem osuszającym,
3. panel należy przechowywać w temperaturze 2–8°C,
4. drugi tor należy wykorzystać w ciągu 7 dni od otwarcia opakowania.

Zużytego toru nie wolno wykorzystywać ponownie.

Warunki przechowywania i bezpieczeństwo

• Przechowywać kompletne zestawy w temperaturze 2–8°C.
• Nie stosować po upływie terminu ważności.
• Nie używać paneli, probówek lub opakowań wykazujących oznaki uszkodzenia.
• Nie łączyć komponentów pochodzących z różnych serii produktu.
• Stosować wyłącznie przez przeszkolony personel laboratoryjny.

Badane izolaty i wszystkie materiały mające z nimi kontakt należy traktować jako potencjalnie zakaźne. Po zakończeniu badania panel i materiały jednorazowe należy poddać dekontaminacji oraz usunąć zgodnie z procedurami laboratorium.

FAQ – najczęściej zadawane pytania

Ile oznaczeń zawiera zestaw ComASP® Piperacillin-tazobactam?

Zestaw zawiera cztery panele. Każdy panel posiada dwa niezależne tory testowe, dlatego komplet umożliwia wykonanie łącznie 8 oznaczeń MIC.

Czy prawidłowy zakres produktu kończy się wartością 128/4 czy 128/8?

Prawidłowy zakres wynosi 0,008/4–128/4 µg/ml. Stężenie tazobaktamu jest stałe i wynosi 4 µg/ml. Zapis 128/8 w sekcji zawartości instrukcji jest omyłką redakcyjną.

Czy panel można zaszczepić bezpośrednio materiałem klinicznym?

Nie. Drobnoustrój musi zostać wcześniej wyizolowany w czystej hodowli na odpowiednim podłożu nieselektywnym.

Dla jakich drobnoustrojów przeznaczony jest panel?

Panel jest przeznaczony do oznaczania MIC piperacyliny z tazobaktamem wobec Enterobacterales i Pseudomonas aeruginosa.

Jak długo trwa inkubacja?

Panel inkubuje się przez 16–20 godzin w temperaturze 36 ± 2°C, w powietrzu atmosferycznym.

Jak odczytuje się wartość MIC?

MIC jest najniższym stężeniem piperacyliny, przy stałej zawartości 4 µg/ml tazobaktamu, które całkowicie hamuje widoczny wzrost badanego izolatu.

Czy wartości graniczne z instrukcji producenta można stosować bez dodatkowej weryfikacji?

Nie. Wynik należy interpretować według aktualnej wersji kryteriów EUCAST lub CLSI obowiązującej w laboratorium. Tabele i kryteria interpretacyjne są regularnie aktualizowane.

Jak przechowywać otwarty panel?

Jeśli wykorzystano tylko jeden tor, należy go szczelnie zabezpieczyć, a panel umieścić ponownie w oryginalnej kopercie ze środkiem osuszającym. Przechowywać w temperaturze 2–8°C i wykorzystać w ciągu 7 dni.

Potrzebujesz pomocy w dobraniu panelu do oznaczania MIC lub materiałów do kontroli jakości? Informacje na ten temat znajdziesz tu:

Nie znalazłeś odpowiedniego panelu na BestLabs? Skontaktuj się z nami – specjaliści BestLabs pomogą dobrać produkt do badanego drobnoustroju i stosowanego standardu AST: