Shimadzu CompactDry™ EC - płytki chromogenne do oznaczania E. coli i bakterii grupy coli, 4 szt.

Shimadzu Diagnostics Corporation CompactDry™ EC to gotowe do użycia, odwodnione płytki chromogenne do jednoczesnego oznaczania liczby Escherichia coli i bakterii grupy coli. System został opracowany przede wszystkim z myślą o mikrobiologicznej kontroli jakości żywności, napojów, surowców oraz odpowiednich próbek środowiska produkcyjnego.

CompactDry™ EC wykorzystuje dwa substraty chromogenne - Magenta-Gal oraz X-Gluc. Bakterie grupy coli wykazujące aktywność β-galaktozydazy tworzą kolonie o barwie czerwonej lub różowej, natomiast typowe E. coli wykazujące dodatkowo aktywność β-glukuronidazy tworzą kolonie niebieskie lub niebiesko-fioletowe.

Do całkowitej liczby bakterii grupy coli zalicza się zarówno kolonie czerwone/różowe, jak i niebieskie/niebiesko-fioletowe. Dzięki temu na jednej płytce możliwe jest uzyskanie ilościowej informacji zarówno o E. coli, jak i o całkowitej liczbie coli.

Płytka zawiera gotowe suche podłoże hodowlane. Po naniesieniu 1 ml próbki medium samoistnie absorbuje ciecz i równomiernie rozprowadza ją po powierzchni, tworząc żel w ciągu kilku sekund. Eliminuje to konieczność samodzielnego przygotowywania i rozlewania klasycznego agaru.

Wariant oferowany przez BestLabs zawiera 4 płytki CompactDry™ EC. Kod produktu BestLabs: T0002516. Kod rodziny producenta podawany dla produktu: 54052-0EC.

Sprawdź także pełną kategorię testów Compact Dry™, wariant CompactDry™ EC 240 szt., wariant CompactDry™ EC 1400 szt. oraz produkty do mikrobiologicznej analizy wody.

CompactDry™ EC - jednoczesne oznaczanie E. coli i bakterii grupy coli

Bakterie grupy coli należą do podstawowych mikrobiologicznych wskaźników wykorzystywanych podczas oceny higieny procesu produkcyjnego, jakości surowców, produktów oraz wody wykorzystywanej w procesie technologicznym.

Escherichia coli ma szczególne znaczenie jako organizm wskaźnikowy związany z potencjalnym zanieczyszczeniem fekalnym. Jej wykrycie w określonych produktach lub środowisku produkcyjnym może wskazywać na nieprawidłowości higieniczne i wymagać dalszej oceny zgodnie z kryteriami stosowanymi dla konkretnego produktu lub procesu.

CompactDry™ EC pozwala połączyć oba oznaczenia na jednej płytce, dzięki czemu laboratorium nie musi prowadzić dwóch całkowicie niezależnych posiewów, jeżeli dana zwalidowana metoda dopuszcza wykorzystanie systemu.

Kluczowe cechy Shimadzu CompactDry™ EC

Specyfikacja techniczna CompactDry™ EC

Zasada chromogenna - Magenta-Gal i X-Gluc

CompactDry™ EC wykorzystuje dwa różne substraty enzymatyczne, które umożliwiają różnicowanie mikroorganizmów na podstawie aktywności enzymatycznej.

Całkowita liczba bakterii grupy coli jest obliczana jako:

Liczbę E. coli stanowią natomiast kolonie niebieskie i niebiesko-fioletowe, z uwzględnieniem ograniczeń reakcji enzymatycznej opisanych przez producenta.

Ważne ograniczenie - E. coli O157

Aktualne IFU wskazuje, że szczepy E. coli O157 typowo nie wytwarzają β-glukuronidazy. W konsekwencji nie tworzą charakterystycznych dla typowych E. coli niebieskich kolonii.

Na CompactDry™ EC E. coli O157 może tworzyć kolonie czerwone lub różowe i zostać sklasyfikowana w odczycie jako bakteria grupy coli, a nie jako E. coli.

Dlatego w badaniach ukierunkowanych na STEC / VTEC / E. coli O157 należy stosować odpowiednie, dedykowane metody detekcji i potwierdzenia.

Inne ograniczenia reakcji chromogennej

Producent wykazał również, że reakcja chromogenna nie jest absolutnie swoista dla każdego możliwego szczepu.

W badaniu inkluzywności NF VALIDATION:

• Escherichia vulneris oraz Buttiauxella agrestis utworzyły typowe niebieskie kolonie,
• niektóre szczepy Citrobacter braakii i Kluyvera intermedia wykazały niższy odzysk w porównaniu z metodą referencyjną.

Dlatego kolor kolonii jest przede wszystkim podstawą ilościowego odczytu metody CompactDry™ EC w jej zwalidowanym zakresie, a nie uniwersalnym systemem ostatecznej identyfikacji gatunkowej.

Zakres zliczania 1-250 CFU na płytkę

Aktualne IFU określa zakres roboczy CompactDry™ EC jako:

Jeżeli przewidywana liczba mikroorganizmów jest większa, próbkę należy odpowiednio rozcieńczyć sterylnym rozcieńczalnikiem, tak aby uzyskać wynik poniżej 250 CFU/płytkę.

Wartość ta jest istotna podczas planowania serii rozcieńczeń, ponieważ zbyt duża liczba mikroorganizmów może prowadzić do:

• nakładania się kolonii,
• utrudnionego rozróżniania barw,
• braku wiarygodnej enumeracji,
• jednolitego wybarwienia powierzchni podłoża.

Producent ostrzega, że przy inokulum przekraczającym około 10⁴ CFU/ml zamiast rozróżnialnych kolonii cała płytka może stać się jednorodnie zabarwiona.

Jak nanosi się próbkę?

Procedura aplikacji jest jedną z głównych zalet CompactDry™.

Powyższy opis jest skrótem informacyjnym i nie zastępuje aktualnego IFU Shimadzu Diagnostics ani procedury właściwej dla konkretnej walidacji AOAC, NF, MicroVal lub NordVal.

Automatyczne rozprowadzenie próbki

Po naniesieniu 1 ml cieczy próbka samoczynnie i równomiernie dyfunduje po odwodnionej powierzchni medium. W ciągu kilku sekund sucha pożywka zostaje uwodniona i tworzy warstwę żelową.

Nie jest wymagane:

• rozprowadzanie próbki głaszczką,
• rozlewanie stopionego agaru,
• mieszanie próbki z gorącym podłożem,
• przygotowywanie klasycznych płytek metodą pour plate.

Może to skrócić czas przygotowania badania i ograniczyć liczbę czynności manualnych wykonywanych podczas rutynowej kontroli jakości mikrobiologicznej.

Przygotowanie próbek stałych

Dla żywności stałej próbkę należy przygotować zgodnie z wymaganiami właściwej metody i zwalidowanego zakresu.

Aktualne IFU odwołuje się między innymi do serii ISO 6887 dotyczącej przygotowania próbek, zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesiętnych.

W zależności od procedury stosowane mogą być między innymi:

• Buffered Peptone Water - BPW,
• Maximum Recovery Diluent - MRD,
• Butterfield's Phosphate-Buffered Diluent - BPBD.

Po homogenizacji odpowiednie rozcieńczenie jest nanoszone na płytkę w objętości 1 ml.

Próbki o nieprawidłowym pH

Producent wskazuje, że dla optymalnego odzysku mikroorganizmów w przypadku próbek o niskim lub wysokim pH należy rozważyć dostosowanie pH zawiesiny do zakresu około:

Ma to szczególne znaczenie dla:

• próbek silnie kwaśnych,
• próbek zasadowych,
• produktów barwnych,
• próbek o wysokiej lepkości,
• matryc mogących oddziaływać z układem chromogennym lub redoks.

Rozcieńczanie lub korekta pH powinny wynikać z właściwej metody i walidacji danej matrycy.

Badanie próbek środowiskowych i powierzchni

CompactDry™ EC może być wykorzystywany w odpowiednich procedurach dotyczących próbek środowiska produkcyjnego.

Materiał z powierzchni może zostać pobrany za pomocą odpowiedniego systemu wymazowego, uwolniony do właściwego rozcieńczalnika, a następnie 1 ml zawiesiny może być wykorzystany do inokulacji CompactDry™ EC.

W zakresie NF VALIDATION producent odwołuje się do ISO 18593 przy przygotowaniu próbek środowiskowych.

Badanie może wspierać:

• monitoring powierzchni roboczych,
• kontrolę higieny linii technologicznych,
• monitoring urządzeń produkcyjnych,
• kontrolę środowiska w zakładach spożywczych.

CompactDry™ EC w analizie wody

Shimadzu Diagnostics wskazuje CompactDry™ EC również dla wody i innych próbek ciekłych. W przypadku próbki o odpowiedniej przewidywanej liczbie mikroorganizmów można zastosować 1 ml bezpośrednio lub wykonać odpowiednie rozcieńczenie.

W badaniach wody należy jednak zwrócić uwagę na wymaganą przez konkretną regulację:

• objętość badanego materiału,
• granice wykrywalności,
• metodę referencyjną,
• kryteria zgodności,
• wymaganą walidację metody alternatywnej.

Fakt, że CompactDry™ EC może być używany do próbek wody, nie oznacza automatycznie zgodności każdego badania wody pitnej z określoną normą prawną.

Zobacz również rozwiązania BestLabs do analizy wody.

Warunki inkubacji - nie stosować jednego zakresu 20-42°C

Temperatura inkubacji musi odpowiadać konkretnej zwalidowanej metodzie i matrycy.

Nie należy stosować zakresu 20-42°C jako uniwersalnej instrukcji inkubacji CompactDry™ EC. Taki szeroki zakres nie odpowiada procedurom zwalidowanym opisanym w aktualnym IFU.

Odczyt kolonii i przeliczenie CFU

Po inkubacji kolonie należy liczyć od spodu płytki. Umieszczenie białego podłoża pod płytką może poprawić kontrast i ułatwić odczyt.

Na spodzie CompactDry™ znajduje się siatka ułatwiająca zliczanie kolonii przy większej liczbie mikroorganizmów.

Końcową liczbę mikroorganizmów w:

• CFU/g,
• CFU/ml,
• lub innej właściwej jednostce

należy obliczyć z uwzględnieniem rozcieńczenia, objętości 1 ml oraz zasad właściwej metody. Producent odwołuje się przy obliczaniu i raportowaniu wyników między innymi do ISO 7218.

AOAC Performance Tested Methods

CompactDry™ EC został oceniony w programie AOAC Research Institute Performance Tested Methods.

Aktualne IFU wskazuje certyfikat AOAC PTM No. 110402 dla oznaczania bakterii grupy coli w surowym mięsie oraz późniejsze rozszerzenie zakresu matryc obejmujące między innymi:

• gotowanego kurczaka,
• świeżą sałatę,
• mrożone filety z dorsza,
• odtłuszczone mleko w proszku,
• mleko pasteryzowane.

Certyfikacja dotyczy określonej metody, matryc i warunków badania. Nie oznacza certyfikacji każdej możliwej aplikacji CompactDry™ EC.

NF VALIDATION i ISO 16140-2

Metoda CompactDry™ EC posiada również certyfikację NF VALIDATION jako alternatywna metoda oznaczania:

• bakterii grupy coli - SDC 42/01-12/24,
• Escherichia coli - SDC 42/02-12/24.

Walidację przeprowadzono zgodnie z protokołem EN ISO 16140-2 w porównaniu z odpowiednimi metodami referencyjnymi ISO 4832 i ISO 16649-2.

Zakres NF VALIDATION obejmuje szeroki zakres produktów spożywczych oraz próbki środowiska produkcyjnego.

Przed powołaniem się na certyfikat w dokumentacji badania należy sprawdzić jego aktualny zakres i termin ważności.

MicroVal i NordVal

CompactDry™ EC został również zwalidowany w systemie MicroVal 2008LR04/05 zgodnie z ISO 16140-2.

Producent wskazuje co najmniej równoważność w stosunku do metod referencyjnych:

• ISO 16649-2 dla oznaczania E. coli,
• ISO 4832 dla oznaczania bakterii grupy coli.

Zakres MicroVal obejmuje między innymi:

• szeroki zakres żywności,
• produkty mleczne,
• produkty rybne,
• warzywa i produkty roślinne,
• mięso i produkty mięsne,
• drób,
• karmę dla zwierząt,
• próbki środowiskowe.

„Zgodność z ISO” - poprawne sformułowanie

CompactDry™ EC posiada walidacje metod alternatywnych prowadzone względem określonych metod ISO. Nie oznacza to jednak, że samo użycie płytki powoduje automatyczną zgodność całego badania z ISO.

Prawidłowe wykonanie badania obejmuje również:

• dobór matrycy objętej zakresem walidacji,
• właściwe przygotowanie próbki,
• stosowanie odpowiedniego rozcieńczalnika,
• prawidłową objętość inokulum,
• temperaturę i czas inkubacji,
• sposób obliczenia wyniku,
• kontrolę jakości,
• dokumentację procedury.

Dlatego bezpieczniej stosować sformułowania takie jak „metoda zwalidowana zgodnie z ISO 16140-2 w określonym zakresie” zamiast „produkt zgodny z ISO”.

Nie do diagnostyki ludzi ani zwierząt

Produkt jest przeznaczony przede wszystkim do:

• mikrobiologii żywności,
• kontroli jakości produkcji,
• badania odpowiednich próbek środowiskowych,
• badania wody i próbek ciekłych zgodnie z właściwą procedurą.

Nie powinien być przedstawiany jako wyrób IVD do diagnostyki klinicznej, płytka do posiewu próbek pacjentów ani system do diagnostyki weterynaryjnej.

Kosmetyki i inne matryce poza zakresem certyfikacji

CompactDry™ jest wykorzystywany w różnych obszarach mikrobiologicznej kontroli jakości, w tym w praktyce laboratoryjnej dotyczącej kosmetyków i surowców. Należy jednak rozróżnić praktyczne zastosowanie laboratoryjne od formalnego zakresu konkretnej walidacji.

Aktualne IFU producenta stanowi:

Dlatego przy wykorzystaniu CompactDry™ EC np. do:

• kosmetyków,
• produktów farmaceutycznych,
• nietypowych surowców,
• nowych matryc środowiskowych

należy sprawdzić, czy dana matryca znajduje się w zakresie walidacji lub przeprowadzić odpowiednią weryfikację / walidację metody.

Więcej informacji o tym zastosowaniu znajdziesz w artykule Compact Dry™ w badaniach mikrobiologicznych kosmetyków.

Przechowywanie i trwałość

CompactDry™ EC należy przechowywać w temperaturze 1-30°C. Producent podaje trwałość 24 miesiące od daty produkcji.

Płytki są wrażliwe na:

• światło,
• wilgoć,
• uszkodzenie opakowania,
• przesuszenie.

Po otwarciu aluminiowej saszetki niewykorzystane płytki należy:

• umieścić ponownie w saszetce,
• szczelnie ją zabezpieczyć, np. taśmą,
• ograniczyć dostęp światła i wilgoci,
• przechowywać w wymaganej temperaturze pokojowej.

Producent zaleca wykorzystanie otwartych płytek tak szybko, jak to praktycznie możliwe.

Opakowanie 4 szt. a standardowe opakowania producenta

BestLabs oferuje ten produkt w praktycznym wariancie 4 płytki, odpowiednim między innymi do niewielkich serii, testów porównawczych lub laboratoriów wykonujących oznaczenia okazjonalnie.

Aktualny katalog Shimadzu Diagnostics wymienia dla CompactDry™ EC także standardowe większe konfiguracje:

• 240 płytek - 54052-0EC-0240,
• 1400 płytek - 54052-0EC-1400.

W BestLabs dostępne są również warianty 240 szt. i 1400 szt..

Ergonomia i organizacja pracy

CompactDry™ EC eliminuje wiele etapów typowych dla klasycznych metod agarowych. Laboratorium nie musi:

• odważać suchego podłoża,
• rozpuszczać i sterylizować medium,
• temperować agaru,
• rozlewać płytek,
• stosować dodatkowej głaszczki do równomiernego rozprowadzania 1 ml próbki.

Gotowy format może wspierać powtarzalność pracy, ograniczenie zużycia wyposażenia laboratoryjnego i skrócenie czasu przygotowania serii badań.

Cztery połączone płytki mogą być również wykorzystywane do kolejnych rozcieńczeń tej samej próbki, jeżeli odpowiada to przyjętej procedurze.

GLP, GMP, SOP i LIMS

CompactDry™ EC może być elementem procedur wykonywanych zgodnie z GLP, GMP oraz zatwierdzonym SOP, jeżeli metoda została odpowiednio zweryfikowana dla konkretnego zastosowania.

W dokumentacji lub systemie LIMS można rejestrować między innymi:

• identyfikację próbki,
• numer katalogowy / wariant CompactDry™ EC,
• numer LOT,
• termin ważności,
• rodzaj matrycy,
• rozcieńczenie próbki,
• objętość inokulum 1 ml,
• temperaturę i czas inkubacji,
• liczbę czerwonych/różowych kolonii,
• liczbę niebieskich/niebiesko-fioletowych kolonii,
• obliczoną wartość CFU/g lub CFU/ml,
• zastosowaną zwalidowaną metodę,
• identyfikację operatora.

Samo użycie CompactDry™ EC nie zapewnia automatycznej zgodności procesu z GLP, GMP, ISO, AOAC, NF Validation, MicroVal ani NordVal. Zgodność i możliwość powołania się na konkretną walidację zależą od kompletnego sposobu wykonania badania i zakresu matrycy.

Zastosowanie

Shimadzu CompactDry™ EC znajduje zastosowanie przede wszystkim w:

• oznaczaniu liczby Escherichia coli,
• oznaczaniu liczby bakterii grupy coli,
• mikrobiologicznej kontroli jakości żywności,
• badaniach surowców i produktów gotowych,
• kontroli higieny procesu produkcyjnego,
• badaniach odpowiednich próbek wody i cieczy,
• monitoringu powierzchni produkcyjnych,
• badaniach środowiska zakładów spożywczych,
• odpowiednio zwalidowanych badaniach innych matryc,
• laboratoriach mikrobiologicznych i działach kontroli jakości.

FAQ - Shimadzu CompactDry™ EC

Shimadzu CompactDry™ EC w ofercie BestLabs

CompactDry™ EC łączy prostą aplikację 1 ml próbki, odwodnione medium i dwukolorowy system chromogenny umożliwiający równoczesne oznaczanie E. coli oraz całkowitej liczby bakterii grupy coli.

Wariant BestLabs 4 szt. jest praktyczny przy małych seriach badań, testach wdrożeniowych i sporadycznej kontroli mikrobiologicznej. Dla laboratoriów wykonujących większą liczbę oznaczeń dostępne są również opakowania 240 i 1400 płytek.

Sprawdź pełną ofertę testów Compact Dry™, kategorię Compact Dry™ 4 szt., CompactDry™ CF do oznaczania bakterii grupy coli oraz rozwiązania do analizy wody.

Przeczytaj na blogu BestLabs - testy Compact Dry™ w szybkich oznaczeniach mikrobiologicznych Compact Dry™ w badaniach mikrobiologicznych kosmetyków i kontroli jakości Potrzebujesz pomocy w doborze Compact Dry™, rozcieńczalnika lub metody do oznaczania E. coli i bakterii coli? Skontaktuj się z BestLabs