Liofilchem® Mueller Hinton II Agar - gotowa pożywka na płytkach 140 mm do oznaczania lekowrażliwości, 10 szt.

Liofilchem® Mueller Hinton II Agar 140 mm to gotowa do użycia pożywka mikrobiologiczna przeznaczona do oznaczania lekowrażliwości bakterii metodą dyfuzyjno-krążkową Kirby-Bauera. Podłoże zostało opracowane do badań AST - Antimicrobial Susceptibility Testing - typowych, szybko rosnących mikroorganizmów tlenowych zgodnie z zaleceniami CLSI i EUCAST.

Wariant o numerze katalogowym 10231 jest dostarczany na dużych płytkach Petriego o średnicy 140 mm. Opakowanie zawiera 10 gotowych płytek. Zwiększona powierzchnia robocza w porównaniu ze standardową płytką 90 mm ułatwia organizację rozbudowanych antybiogramów i pozwala na wygodne rozmieszczenie krążków antybiotykowych lub odpowiednich pasków gradientowych z zachowaniem odstępów wymaganych przez stosowaną metodę.

Mueller Hinton II Agar charakteryzuje się kontrolowanym stężeniem jonów wapnia i magnezu oraz niską zawartością tyminy i tymidyny. Parametry te zostały dostosowane do wymagań standaryzowanych badań lekowrażliwości i pomagają ograniczać zmienność wynikającą ze składu podłoża.

Sprawdź również krążki antybiotykowe, gradientowe paski diagnostyczne MIC, densytometry do standaryzacji inokulum oraz pozostałe podłoża gotowe na płytkach dostępne w BestLabs.

Mueller Hinton II Agar - standaryzowane podłoże do antybiogramów

Mueller Hinton II Agar jest podłożem nieselektywnym wykorzystywanym przede wszystkim w oznaczaniu wrażliwości bakterii na substancje przeciwdrobnoustrojowe. Zapewnia dobry wzrost większości typowych bakterii tlenowych, a jego skład został dostosowany do wymagań metod referencyjnych stosowanych w laboratoriach wykonujących antybiogramy.

W metodzie dyfuzyjno-krążkowej antybiotyk zawarty w krążku dyfunduje w agarze i tworzy gradient stężenia. Jeżeli badany mikroorganizm jest hamowany przez daną substancję, wokół krążka powstaje strefa zahamowania wzrostu. Jej średnicę mierzy się w milimetrach i interpretuje zgodnie z aktualnymi breakpointami właściwego systemu - EUCAST lub CLSI.

Podłoże może być również wykorzystywane w procedurach wykorzystujących odpowiednie gradientowe paski do oznaczania MIC, jeżeli dany pasek i badany mikroorganizm wymagają Mueller Hinton II Agar zgodnie z dokumentacją producenta.

Kluczowe cechy Liofilchem® Mueller Hinton II Agar 10231

Specyfikacja techniczna Mueller Hinton II Agar 140 mm

Skład Mueller Hinton II Agar

Typowa formulacja podłoża została opracowana tak, aby zapewnić wzrost większości szybko rosnących bakterii tlenowych przy jednoczesnym utrzymaniu parametrów wymaganych dla standaryzowanych oznaczeń lekowrażliwości.

* Skład może być korygowany lub suplementowany przez producenta odpowiednimi solami w celu osiągnięcia wymaganych parametrów jonowych i właściwości użytkowych podłoża.

Kontrolowane stężenie jonów - istotny parametr Mueller Hinton II

Jedną z charakterystycznych cech Mueller Hinton II Agar jest kontrolowane stężenie wybranych jonów w podłożu. Producent określa zakres:

Formulacja jest dostosowywana tak, aby spełniać określone przez producenta parametry użytkowe zgodne z wymaganiami dla podłoży stosowanych w antimicrobial susceptibility testing. Kontrola składu chemicznego jest istotna, ponieważ wynik testu dyfuzyjnego zależy nie tylko od mikroorganizmu i antybiotyku, ale także od właściwości samego agaru.

Niska zawartość tyminy i tymidyny

Producent wskazuje, że Mueller Hinton II Agar charakteryzuje się niskim poziomem tyminy i tymidyny. Jest to jedna z właściwości odróżniających podłoża przygotowywane specjalnie do standaryzowanych testów lekowrażliwości od zwykłych podłoży wzrostowych.

W kontrolowanych badaniach AST istotne jest ograniczenie czynników środowiskowych mogących zmieniać obserwowaną aktywność substancji przeciwdrobnoustrojowych. Z tego względu podczas wykonywania antybiogramów należy używać podłoża o odpowiednio zweryfikowanych parametrach jakościowych.

Dlaczego grubość agaru 4,0 ±0,5 mm jest ważna?

Dla gotowego Mueller Hinton II Agar producent określa głębokość warstwy agaru na 4,0 ±0,5 mm. Jest to ważny parametr standaryzacji testu dyfuzyjno-krążkowego.

Głębokość podłoża wpływa na sposób dyfuzji substancji przeciwdrobnoustrojowej i tym samym może wpływać na średnicę uzyskiwanej strefy zahamowania wzrostu. Zbyt głęboka lub zbyt płytka warstwa agaru może zmienić rezultat pomiaru i utrudniać poprawną interpretację według breakpointów.

Zastosowanie gotowych płytek ogranicza konieczność samodzielnego przygotowywania i standaryzowania głębokości warstwy podłoża w laboratorium.

Płytka 140 mm - większa powierzchnia do antybiogramu

Wariant 10231 wykorzystuje płytkę o średnicy 140 mm. Większa powierzchnia w porównaniu z popularnymi płytkami 90 mm może usprawniać organizację rozbudowanych oznaczeń wymagających zastosowania kilku elementów testowych na jednym posiewie.

Na jednej dużej płytce można odpowiednio rozmieszczać krążki antybiotykowe lub kompatybilne paski gradientowe, pod warunkiem zachowania wymaganych odstępów i zasad określonych w aktualnej metodzie.

Do badań metodą dyfuzyjno-krążkową dostępne są krążki antybiotykowe do AST. Przykładem nowoczesnego produktu do badania bakterii Gram-ujemnych jest Thermo Scientific™ Cefiderocol FDC30 AST Disc.

Mueller Hinton II Agar i paski gradientowe MIC

Duże płytki 140 mm są również wykorzystywane w procedurach z odpowiednimi gradientowymi paskami diagnostycznymi do oznaczania MIC. W metodzie gradientowej pasek tworzy na powierzchni podłoża ciągły gradient stężenia substancji przeciwdrobnoustrojowej, a po inkubacji odczytuje się punkt przecięcia elipsy zahamowania wzrostu ze skalą MIC.

Dobór podłoża zależy od konkretnego mikroorganizmu i badanego antybiotyku. Dlatego przed wykonaniem oznaczenia należy zawsze sprawdzić dokumentację właściwego paska.

Pełna oferta dostępna jest w kategorii gradientowe paski diagnostyczne MIC.

Przygotowanie inokulum 0,5 McFarlanda

Aktualna instrukcja Liofilchem dla klasycznej metody dyfuzyjno-krążkowej wskazuje przygotowanie standaryzowanej zawiesiny badanego mikroorganizmu o zmętnieniu odpowiadającym 0,5 McFarlanda.

Prawidłowa koncentracja inokulum ma kluczowe znaczenie dla powtarzalności antybiogramu. Zbyt duża liczba komórek może prowadzić do uzyskania mniejszych stref zahamowania wzrostu, natomiast zbyt niskie inokulum może powodować strefy nadmiernie duże i trudniejsze do prawidłowej interpretacji.

Do obiektywnego przygotowania zawiesin warto zastosować densytometr laboratoryjny lub właściwy wzorzec McFarlanda.

Mueller Hinton II Agar nie służy do bezpośredniego posiewu materiału klinicznego

Podłoże 10231 jest przeznaczone do wykonywania AST z wcześniej wyizolowanej czystej kultury. Materiał kliniczny nie powinien być nanoszony bezpośrednio na Mueller Hinton II Agar w celu wykonania standardowego antybiogramu.

Badany mikroorganizm należy najpierw wyizolować na odpowiednim nieselektywnym podłożu stałym, takim jak agar z krwią lub Tryptic Soy Agar, a następnie przygotować z czystych kolonii odpowiednią zawiesinę do badania lekowrażliwości.

Oferta podłoży do izolacji mikroorganizmów dostępna jest w kategorii podłoża mikrobiologiczne.

Skrócony przebieg antybiogramu metodą Kirby-Bauera

W standardowej procedurze dyfuzyjno-krążkowej z wykorzystaniem Mueller Hinton II Agar kolejne etapy obejmują:

1. uzyskanie czystej kultury badanego mikroorganizmu,
2. przygotowanie zawiesiny odpowiadającej wymaganej gęstości, standardowo 0,5 McFarlanda,
3. równomierne zaszczepienie całej powierzchni podłoża,
4. naniesienie odpowiednio dobranych krążków antybiotykowych,
5. inkubację w warunkach określonych przez aktualną metodę EUCAST lub CLSI,
6. pomiar średnic stref zahamowania wzrostu,
7. interpretację według aktualnych breakpointów.

Powyższy opis jest skrótem informacyjnym i nie stanowi instrukcji wykonania antybiogramu. Szczegółowe zasady przygotowania inokulum, czasy pomiędzy poszczególnymi etapami, warunki inkubacji, sposób odczytu oraz kryteria interpretacyjne należy przyjmować z aktualnej wersji EUCAST albo CLSI.

Warunki inkubacji zależne od systemu interpretacyjnego

W aktualnej instrukcji producenta dla klasycznych, szybko rosnących bakterii tlenowych wskazano:

Producent zaleca korzystanie z aktualnie obowiązującej wersji wytycznych CLSI lub EUCAST, ponieważ warunki mogą zależeć od mikroorganizmu i badanej substancji.

Nie należy bez uzasadnienia wydłużać inkubacji, ponieważ może to wpływać na wielkość stref i w konsekwencji na prawidłowość interpretacji wyniku.

Zasada 15 minut w organizacji testu

W instrukcji Liofilchem zwrócono uwagę na sprawną organizację poszczególnych etapów oznaczenia. Producent rekomenduje wykorzystanie przygotowanej zawiesiny w ciągu około 15 minut, nałożenie krążków w ciągu około 15 minut od inokulacji oraz rozpoczęcie inkubacji w ciągu około 15 minut od aplikacji krążków.

Ograniczenie czasu pomiędzy etapami pomaga utrzymać powtarzalne warunki dyfuzji i wzrostu. W laboratorium wymagania te powinny być uwzględnione w odpowiednim SOP.

Odczyt i interpretacja wyników

Po zakończeniu inkubacji mierzy się średnice stref zahamowania wzrostu w milimetrach. Uzyskane wartości należy porównać z aktualnymi tabelami interpretacyjnymi dla badanego mikroorganizmu i substancji przeciwdrobnoustrojowej.

Nie należy stosować uniwersalnych wartości granicznych dla wszystkich antybiotyków i gatunków. Breakpointy mogą różnić się zależnie od mikroorganizmu, substancji oraz wybranego systemu interpretacyjnego i są okresowo aktualizowane.

Z tego względu opis handlowy produktu nie zawiera stałych tabel breakpointów EUCAST ani CLSI.

Kontrola jakości Mueller Hinton II Agar

Liofilchem prowadzi kontrolę jakości podłoża z wykorzystaniem referencyjnych mikroorganizmów i odpowiednich środków przeciwdrobnoustrojowych. W aktualnej dokumentacji wymienione są między innymi:

Producent określa dla poszczególnych kombinacji szczep-antybiotyk oczekiwane zakresy średnic stref zahamowania wzrostu. W rutynowej kontroli należy korzystać z aktualnych kryteriów EUCAST lub CLSI oraz Certificate of Analysis właściwego dla konkretnej partii podłoża.

Materiały referencyjne dostępne są również w kategorii szczepy kontrolne.

Ograniczenia Mueller Hinton II Agar

Standardowy Mueller Hinton II Agar nie jest odpowiednim podłożem do oznaczania lekowrażliwości wszystkich mikroorganizmów. Producent wskazuje, że nie jest właściwy do rutynowego AST wymagających drobnoustrojów takich jak między innymi:

• Haemophilus influenzae,
• Neisseria gonorrhoeae,
• Streptococcus pneumoniae.

Dla mikroorganizmów wymagających należy zastosować właściwe, suplementowane podłoże wskazane w odpowiedniej metodzie referencyjnej, np. Mueller Hinton Fastidious Agar lub inną formulację przewidzianą przez EUCAST/CLSI.

Producent zwraca również uwagę, że niektóre szczepy o szczególnych wymaganiach odżywczych mogą wykazywać słaby wzrost lub nie rosnąć na standardowym MH II Agar.

Ergonomia gotowych płytek

Gotowa postać podłoża eliminuje konieczność samodzielnego:

• odważania suchej pożywki,
• rozpuszczania składników,
• sterylizacji w autoklawie,
• rozlewania do płytek,
• kontrolowania końcowej głębokości warstwy agaru.

Ułatwia to standaryzację rutynowej pracy i skraca czas potrzebny na przygotowanie stanowiska do oznaczania lekowrażliwości. Wariant 140 mm jest szczególnie przydatny przy rozbudowanych panelach antybiotykowych i zastosowaniach wymagających większej powierzchni agaru.

Przechowywanie i trwałość

Aktualna instrukcja Liofilchem dla gotowych płytek Mueller Hinton II Agar wskazuje przechowywanie w temperaturze 10-25°C, z dala od światła. Produktu nie należy stosować po terminie ważności ani w przypadku stwierdzenia oznak kontaminacji, odwodnienia lub innego pogorszenia jakości.

Producent deklaruje dla gotowych płytek okres trwałości do 6 miesięcy. Wiążącą informacją jest jednak zawsze data ważności oraz warunki przechowywania znajdujące się na etykiecie konkretnej otrzymanej partii.

Przed użyciem należy upewnić się, że powierzchnia podłoża nie wykazuje widocznej nadmiernej wilgoci.

IVD, EUCAST, CLSI i ISO/TS 16782

Liofilchem® Mueller Hinton II Agar jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym do profesjonalnego zastosowania laboratoryjnego. Aktualna instrukcja producenta opisuje zastosowanie w metodzie dyfuzyjno-krążkowej standaryzowanej przez CLSI i EUCAST.

Producent wskazuje także dostosowanie zawartości określonych jonów do parametrów użytkowych opisanych w ISO/TS 16782.

Aktualna wersja IFU została przygotowana z uwzględnieniem wymagań IVDR 2017/746. W zastosowaniu diagnostycznym wiążące znaczenie ma zawsze oznakowanie konkretnej partii produktu i odpowiadająca jej dokumentacja.

Podłoże może stanowić element procedur prowadzonych zgodnie z GLP, SOP i systemami zarządzania jakością, jednak samo zastosowanie gotowej płytki nie oznacza automatycznej zgodności całego procesu badawczego z konkretną normą.

Zastosowanie

Mueller Hinton II Agar 140 mm znajduje zastosowanie przede wszystkim w:

• laboratoriach mikrobiologicznych,
• laboratoriach diagnostycznych,
• pracowniach wykonujących antybiogramy,
• oznaczaniu lekowrażliwości metodą dyfuzyjno-krążkową,
• wybranych procedurach z gradientowymi paskami MIC,
• badaniach antybiotykooporności,
• kontroli jakości procedur AST,
• laboratoriach referencyjnych,
• laboratoriach badawczych i jednostkach R&D.

Pełną ofertę produktów wspierających oznaczanie lekowrażliwości znajdziesz w kategoriach krążki antybiotykowe, paski do oznaczania MIC, densytometry oraz akcesoria do badań mikrobiologicznych.

FAQ - Liofilchem® Mueller Hinton II Agar 140 mm

Liofilchem® Mueller Hinton II Agar 140 mm w ofercie BestLabs

Liofilchem® Mueller Hinton II Agar 10231 to gotowe, standaryzowane podłoże przeznaczone do profesjonalnego wykonywania antybiogramów i oznaczeń lekowrażliwości. Płytka 140 mm zapewnia dużą powierzchnię roboczą, a kontrolowany skład, odpowiednia głębokość agaru oraz parametry jonowe wspierają powtarzalność oznaczeń AST.

Sprawdź także krążki antybiotykowe, gradientowe paski diagnostyczne MIC, densytometry, szczepy kontrolne oraz pełną kategorię podłoża gotowe na płytkach.