Oxoid RapID™ ANA II zestaw do manualnej identyfikacji biochemicznej (beztlenowce) 20 szt.

RapID™ ANA II – zestaw do identyfikacji bakterii beztlenowych, 20 paneli

Thermo Scientific™ RapID™ ANA II to manualny system biochemiczny przeznaczony do jakościowej identyfikacji istotnych klinicznie bakterii beztlenowych wyizolowanych z ludzkich materiałów klinicznych. Panel wykorzystuje substraty konwencjonalne i chromogenne, pozwalając uzyskać profil identyfikacyjny mikroorganizmu po 4–6 godzinach inkubacji.

System obejmuje 18 reakcji biochemicznych umożliwiających różnicowanie ponad 90 gatunków i taksonów bakterii beztlenowych. Może być stosowany jako samodzielna metoda identyfikacyjna albo rozwiązanie uzupełniające systemy automatyczne w laboratorium mikrobiologicznym.

RapID ANA II jest przeznaczony wyłącznie do badania czystych hodowli. Materiału klinicznego ani mieszanych populacji drobnoustrojów nie należy nanosić bezpośrednio na panel.

Kluczowe cechy i parametry techniczne

Zakres identyfikowanych bakterii

RapID ANA II jest przeznaczony do identyfikacji istotnych klinicznie bakterii beztlenowych należących do różnych grup morfologicznych. Zakres systemu obejmuje między innymi wybranych przedstawicieli rodzajów:

• Bacteroides i Parabacteroides,
• Prevotella i Porphyromonas,
• Fusobacterium,
• Clostridium i innych beztlenowych laseczek,
• Anaerococcus, Peptoniphilus i Peptostreptococcus,
• Veillonella oraz innych beztlenowych ziarniaków.

Pełny zakres identyfikowanych mikroorganizmów należy sprawdzać w aktualnych diagramach różnicujących i bazie systemu RapID. Zastosowanie panelu do organizmu nieujętego w bazie może prowadzić do błędnej identyfikacji.

Zasada działania RapID ANA II

Panel składa się z 10 studzienek zawierających odwodnione substraty. Studzienki od 3 do 10 są dwufunkcyjne, dzięki czemu po wykonaniu odczytów przed dodaniem odczynników oraz po ich dodaniu uzyskuje się łącznie 18 wyników biochemicznych.

Zawiesina badanego izolatu przygotowana w płynie inokulacyjnym jednocześnie rehydratuje wszystkie substraty. Po inkubacji ocenia się rozwój charakterystycznych barw, a następnie dodaje odczynnik RapID ANA II oraz RapID Spot Indole do wskazanych studzienek.

Układ reakcji dodatnich i ujemnych przekształcany jest w mikrocode. Otrzymany profil porównuje się z aktualną bazą ERIC – Electronic RapID Compendium albo z diagramami różnicującymi RapID ANA II.

Przygotowanie czystej hodowli

Przed wykonaniem identyfikacji badany mikroorganizm musi zostać wyhodowany w warunkach beztlenowych jako czysta kultura. Izolat należy również ocenić metodą barwienia Grama.

Producent dopuszcza pobieranie wzrostu z odpowiednich nieselektywnych lub selektywnych podłoży agarowych. Zastosowanie niewłaściwego podłoża może wpłynąć na aktywność enzymatyczną mikroorganizmu i zmienić profil reakcji.

Nie należy wykorzystywać podłoży zawierających niezalecane substancje redukujące ani podłoży wskazanych przez producenta jako interferujące z reakcjami panelu. Szczegółowy wykaz odpowiednich podłoży należy sprawdzić w aktualnej instrukcji IFU.

Procedura wykonania identyfikacji

1. Potwierdzić czystość hodowli oraz wykonać barwienie metodą Grama.
2. Przenieść odpowiednią ilość wzrostu do 1 ml płynu inokulacyjnego RapID.
3. Przygotować jednorodną zawiesinę o zmętnieniu odpowiadającym wzorcowi McFarlanda nr 3.
4. W razie potrzeby dokładnie wymieszać zawiesinę. Wykorzystać ją w ciągu 15 minut od przygotowania.
5. Przenieść całą zawartość probówki z płynem inokulacyjnym do portu panelu.
6. Rozprowadzić inokulum zgodnie z instrukcją, zwracając uwagę na równomierne napełnienie studzienek i brak dużych pęcherzyków powietrza.
7. Inkubować panel w temperaturze 35–37°C przez co najmniej 4 godziny, ale nie dłużej niż 6 godzin.
8. Odczytać reakcje niewymagające dodatkowych odczynników na białym tle.
9. Dodać RapID Spot Indole do studzienki reakcji indolowej oraz odczynnik RapID ANA II do wskazanych studzienek dwufunkcyjnych.
10. Odczekać od 30 sekund do maksymalnie 2 minut, a następnie wykonać odczyt końcowy.
11. Zapisać wyniki, utworzyć mikrocode i przeprowadzić identyfikację w aktualnej bazie ERIC lub za pomocą diagramów różnicujących.

Panel umożliwia jednoczesne napełnienie wszystkich studzienek. Ogranicza to liczbę oddzielnych operacji dozowania w porównaniu z metodami wymagającymi indywidualnej inokulacji każdej reakcji.

Zawartość zestawu

• 20 paneli RapID ANA II,
• 20 formularzy raportowych,
• odczynnik RapID ANA II w ilości wystarczającej do wykonania 20 oznaczeń,
• 2 tacki inkubacyjne,
• przewodnik kolorystyczny,
• instrukcja użytkowania.

Materiały wymagane, ale niedostarczane z zestawem

• RapID Inoculation Fluid 1 ml – płyn do przygotowania zawiesiny izolatu,
• RapID Spot Indole – odczynnik do oceny reakcji indolowej,
• wzorzec McFarlanda nr 3 lub jego odpowiednik,
• odpowiednie podłoża do hodowli bakterii beztlenowych,
• system do prowadzenia hodowli w warunkach beztlenowych,
• inkubator utrzymujący temperaturę 35–37°C,
• materiały do barwienia metodą Grama,
• wyposażenie do przenoszenia i mieszania zawiesiny,
• zalecane szczepy kontroli jakości.

Oprogramowanie lub baza ERIC stanowią narzędzie pomocnicze do interpretacji mikrocode. Należy korzystać z aktualnej wersji bazy, ponieważ zakres taksonów i nazewnictwo mikroorganizmów mogą być aktualizowane.

Interpretacja wyników

Reakcje należy oceniać zgodnie z przewodnikiem kolorystycznym i aktualną instrukcją producenta. Pierwszy odczyt wykonywany jest przed dodaniem odczynników, a drugi po ich aplikacji do studzienek dwufunkcyjnych.

Wyniki poszczególnych testów tworzą profil liczbowy wykorzystywany do probabilistycznego dopasowania badanego izolatu do taksonów zapisanych w bazie. Pojedyncza reakcja nie może stanowić samodzielnej podstawy identyfikacji.

Podczas interpretacji należy uwzględnić także źródło izolatu, morfologię w barwieniu Grama, aerotolerancję oraz wzrost na podłożach selektywnych i różnicujących. Wyniki nietypowe lub niespójne wymagają dodatkowej weryfikacji.

Kontrola jakości i ograniczenia

Kontrolę jakości należy wykonywać zgodnie z procedurami obowiązującymi w laboratorium. Producent wskazuje szczepy referencyjne przeznaczone do sprawdzania reaktywności panelu, w tym Clostridium sordellii, Parabacteroides distasonis i Bacteroides uniformis.

Nie należy raportować wyników izolatów klinicznych, jeżeli kontrola jakości nie spełnia ustalonych kryteriów akceptacji. Szczepy kontrolne powinny być przygotowywane, przechowywane i pasażowane zgodnie z aktualną instrukcją oraz procedurą SOP.

RapID ANA II nie jest przeznaczony do bezpośredniego badania materiału klinicznego ani hodowli mieszanych. System identyfikuje wyłącznie mikroorganizmy objęte aktualną bazą. Nie określa lekowrażliwości i nie zastępuje antybiogramu.

Przechowywanie i bezpieczeństwo

Panele oraz odczynniki RapID ANA II i RapID Spot Indole należy przechowywać w oryginalnych opakowaniach w temperaturze 2–8°C. Przed użyciem materiały powinny osiągnąć temperaturę pokojową.

Z opakowania należy wyjąć wyłącznie liczbę paneli potrzebną do bieżącej pracy. Pozostałe panele trzeba niezwłocznie zabezpieczyć i ponownie umieścić w temperaturze 2–8°C. Panel powinien zostać użyty w dniu wyjęcia z opakowania ochronnego.

Produkt jest przeznaczony do profesjonalnej diagnostyki in vitro. Podczas pracy należy przestrzegać zasad bezpieczeństwa biologicznego, stosować odpowiednie środki ochrony indywidualnej i postępować zgodnie z kartami charakterystyki odczynników. Zużyte hodowle i panele wymagają dekontaminacji przed utylizacją.

FAQ – najczęściej zadawane pytania

Jakie bakterie identyfikuje RapID ANA II?

System służy do identyfikacji ponad 90 istotnych klinicznie gatunków i taksonów bakterii beztlenowych, w tym wybranych przedstawicieli rodzajów Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium, Clostridium, Anaerococcus i Peptostreptococcus.

Czy panel można zaszczepić bezpośrednio materiałem klinicznym?

Nie. RapID ANA II wymaga czystej hodowli mikroorganizmu wyizolowanego wcześniej z ludzkiego materiału klinicznego. Bezpośrednie badanie próbki albo hodowli mieszanej może prowadzić do nieprawidłowych wyników.

Czy panel trzeba inkubować w warunkach beztlenowych?

Nie. Czystą hodowlę badanego izolatu należy wcześniej uzyskać w warunkach beztlenowych, ale sam panel RapID ANA II inkubuje się przez 4–6 godzin w temperaturze 35–37°C w inkubatorze bez wzbogacania atmosfery w CO₂.

Jakie materiały dodatkowe są potrzebne?

Do wykonania identyfikacji potrzebne są przede wszystkim płyn inokulacyjny RapID 1 ml, RapID Spot Indole oraz wzorzec McFarlanda nr 3. Laboratorium musi również dysponować odpowiednimi podłożami, systemem hodowli beztlenowej, inkubatorem i materiałami do barwienia metodą Grama.

Potrzebujesz pomocy w dobraniu idealnego produktu dla Twojego laboratorium? Informacje na ten temat znajdziesz tu:

Nie znalazłeś takiego produktu na BestLabs? Skontaktuj się z nami - specjaliści BestLabs na pewno znajdą odpowiedni dla Państwa produkt: