Oxoid RapID™ Yeast Plus zestaw do manualnej identyfikacji biochemicznej (drożdże) 20 szt.

RapID Yeast Plus - system do identyfikacji drożdży, 20 paneli

Thermo Scientific RapID Yeast Plus to manualny system biochemiczny przeznaczony do jakościowej identyfikacji ważnych klinicznie drożdży, mikroorganizmów drożdżopodobnych i pokrewnych. System wykorzystuje reakcje enzymatyczne oraz konwencjonalne i chromogenne substraty umieszczone w jednorazowym panelu.

RapID Yeast Plus jest przeznaczony do badania czystych izolatów klinicznych wyhodowanych na podłożu agarowym. Stanowi element profesjonalnego wyposażenia laboratoryjnego wspierający diagnostykę zakażeń wywoływanych przez drożdże i organizmy drożdżopodobne. Nie służy do bezpośredniej analizy materiału klinicznego ani do identyfikacji bakterii beztlenowych.

Kluczowe cechy i parametry techniczne

Zakres identyfikacji

RapID Yeast Plus jest przeznaczony do różnicowania ponad 40 drożdży, organizmów drożdżopodobnych i pokrewnych. Baza systemu obejmuje między innymi wybrane mikroorganizmy należące do rodzajów:

• Candida i Nakaseomyces,
• Cryptococcus i Naganishia,
• Clavispora,
• Cyberlindnera,
• Debaryomyces,
• Geotrichum,
• Kluyveromyces,
• Meyerozyma,
• Pichia,
• Rhodotorula,
• Saccharomyces,
• Trichosporon,
• Yarrowia.

System uwzględnia również wybrane organizmy pokrewne, takie jak Aureobasidium pullulans, Prototheca spp. i Sporobolomyces salmonicolor. Pełny zakres taksonów należy każdorazowo sprawdzić w aktualnej tabeli różnicującej producenta.

RapID Yeast Plus nie jest panelem do identyfikacji bakterii beztlenowych. Do identyfikacji klinicznie istotnych beztlenowców przeznaczony jest odrębny system RapID ANA II.

Zasada działania RapID Yeast Plus

Jednorazowy panel zawiera 18 komór z odwodnionymi substratami. Po wprowadzeniu zawiesiny badanego izolatu następuje jednoczesne uwodnienie wszystkich komór i rozpoczęcie reakcji biochemicznych.

Testy opierają się na wykorzystaniu węglowodanów, hydrolizie estru kwasu tłuszczowego, hydrolizie glikozydów i fosfoestrów, aktywności ureazy oraz hydrolizie substratów arylamidowych. Zachodzące reakcje powodują zmiany barwy oceniane wizualnie po inkubacji i dodaniu właściwych odczynników.

Panel obejmuje reakcje:

• GLU, MAL, SUC, TRE i RAF – wykorzystanie węglowodanów,
• LIP – aktywność lipolityczna,
• NAGA, αGLU, βGLU, ONPG, αGAL, βFUC, PHS i PCHO – hydroliza substratów chromogennych,
• URE – aktywność ureazy,
• PRO, HIST i LGY – hydroliza substratów arylamidowych.

Układ wyników dodatnich i ujemnych tworzy mikrokod porównywany z profilami zapisanymi w bazie systemu RapID. Identyfikacja ma charakter probabilistyczny i nie stanowi pomiaru ilościowego.

Przygotowanie izolatu

1. Do wykonania testu należy wykorzystać mikroorganizm wyhodowany w czystej kulturze.
2. Przed badaniem należy potwierdzić drożdżopodobny wygląd i charakter wzrostu izolatu oraz ocenić preparat metodą Grama lub w preparacie przyżyciowym.
3. Zalecane podłoża obejmują agar Sabourauda z dekstrozą w formulacji Emmonsa, agar Sabourauda z glukozą oraz agar Sabourauda z chloramfenikolem.
4. Hodowla przeznaczona do przygotowania inokulum powinna być inkubowana przez 48 godzin w temperaturze 30°C.
5. Kolonie należy zawiesić w 2 ml płynu RapID do inokulacji, doprowadzając zawiesinę do mętności określonej za pomocą dołączonej karty inokulacyjnej.
6. Przygotowaną zawiesinę należy dokładnie wymieszać i wykorzystać w ciągu 15 minut.

Zastosowanie podłoża innego niż wskazane w instrukcji, niewłaściwy wiek hodowli lub zbyt mała albo nadmierna gęstość inokulum mogą powodować nieprawidłowe reakcje.

Procedura wykonania testu

1. Całą zawartość probówki ze standaryzowaną zawiesiną przenieść pipetą do portu inokulacyjnego panelu.
2. Zamknąć port i rozprowadzić zawiesinę w tylnej części panelu.
3. Powoli przechylić panel w kierunku komór reakcyjnych, umożliwiając ich równomierne napełnienie.
4. Sprawdzić, czy komory są równomiernie wypełnione i nie zawierają dużych pęcherzyków powietrza.
5. Inkubować panel przez 4 godziny w temperaturze 30°C w inkubatorze bez atmosfery CO₂.
6. Po inkubacji odsłonić komory reakcyjne.
7. Dodać po 1 kropli odczynnika RapID Yeast Plus A do komór od 7 do 14.
8. Dodać po 1 kropli odczynnika RapID Yeast Plus B do komór od 16 do 18.
9. Odczekać co najmniej 30 sekund, lecz nie dłużej niż 1 minutę, a następnie ocenić reakcje względem dołączonego przewodnika kolorystycznego.
10. Zapisać wyniki i utworzyć mikrokod służący do identyfikacji izolatu.

Panel można inkubować w kontrolowanej temperaturze pokojowej, jeżeli inkubator 30°C bez CO₂ nie jest dostępny i dopuszcza to aktualna instrukcja. Inkubacja w temperaturze 35–37°C może prowadzić do nieprawidłowych reakcji.

Zawartość zestawu

• 20 paneli RapID Yeast Plus,
• 20 formularzy do zapisywania wyników,
• odczynnik RapID Yeast Plus A w ilości wystarczającej do wykonania 20 paneli,
• odczynnik RapID Yeast Plus B w ilości wystarczającej do wykonania 20 paneli,
• 2 tacki inkubacyjne,
• karta do przygotowania inokulum,
• przewodnik kolorystyczny,
• instrukcja użycia.

Materiały wymagane, lecz niedostarczane w zestawie

• RapID Płyn do inokulacji, 2 ml,
• pipety umożliwiające przeniesienie inokulum,
• ezy, wymazówki i pojemniki do pracy z hodowlą,
• inkubator utrzymujący temperaturę 30°C bez atmosfery CO₂,
• odpowiednie podłoża hodowlane,
• materiały do wykonania barwienia metodą Grama lub preparatu przyżyciowego,
• szczepy kontroli jakości,
• standardowe wyposażenie laboratorium mikrobiologicznego.

Interpretacja wyników

Zmiany barwy należy oceniać, patrząc pionowo na komory reakcyjne umieszczone na białym tle. Wyniki zapisuje się jako dodatnie lub ujemne zgodnie z kryteriami zawartymi w instrukcji i przewodniku kolorystycznym.

Na podstawie punktacji poszczególnych reakcji tworzony jest mikrokod. Kod można interpretować za pomocą systemu ERIC, który porównuje profil z bazą prawdopodobieństwa właściwą dla RapID Yeast Plus.

Oprogramowanie producenta jest dostępne na stronie dotyczącej interpretacji systemów identyfikacji biochemicznej.

ERIC jest narzędziem wspomagającym interpretację, a nie systemem automatycznego odczytu panelu. Ocena reakcji pozostaje manualna i powinna być wykonywana przez odpowiednio przeszkolony personel.

Kontrola jakości

Kontrolę jakości należy prowadzić zgodnie z procedurami obowiązującymi w laboratorium oraz aktualną instrukcją producenta. W instrukcji jako przykładowe szczepy kontrolne wskazano między innymi:

• Candida albicans,
• Nakaseomyces glabrata, wcześniej klasyfikowany jako Candida glabrata,
• Kluyveromyces marxianus, wcześniej klasyfikowany jako Candida kefyr,
• Cryptococcus laurentii,
• Yarrowia lipolytica.

Jeżeli wyniki kontroli jakości są nieprawidłowe, nie należy raportować wyników badanych izolatów. Na aktywność enzymatyczną mogą wpływać skład i seria zastosowanego podłoża oraz wielokrotne pasażowanie szczepów.

Ograniczenia metody

• System jest przeznaczony wyłącznie do badania czystych kultur.
• Badanie hodowli mieszanej lub bezpośredniego materiału klinicznego może prowadzić do nieprawidłowych wyników.
• Testować należy wyłącznie organizmy o wyglądzie i charakterze wzrostu właściwym dla drożdży lub mikroorganizmów drożdżopodobnych.
• Izolaty niewymienione w aktualnej tabeli różnicującej mogą zostać błędnie zidentyfikowane.
• Identyfikacja wynika z łącznego profilu reakcji i nie powinna być ustalana na podstawie pojedynczego testu.
• Niektóre blisko spokrewnione gatunki mogą wymagać dodatkowych badań różnicujących.
• Wynik należy rozpatrywać łącznie z morfologią, charakterem wzrostu i pozostałymi informacjami laboratoryjnymi.

Przechowywanie i bezpieczne użytkowanie

Zestaw RapID Yeast Plus należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 2–8°C. Przed użyciem panel i odczynniki powinny osiągnąć temperaturę pokojową. Z opakowania należy wyjmować wyłącznie potrzebną liczbę paneli, a następnie szczelnie je zamknąć i niezwłocznie ponownie umieścić w warunkach chłodniczych.

Panel wyjęty z opakowania należy wykorzystać tego samego dnia. Oddzielnie dostarczany płyn RapID do inokulacji należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 20–25°C. Nie wolno zamieniać odczynników pomiędzy różnymi systemami RapID.

Odczynniki A i B zawierają substancje niebezpieczne. Przed użyciem należy zapoznać się z kartą charakterystyki, stosować odpowiednie środki ochrony indywidualnej i pracować w dobrze wentylowanym miejscu. Hodowle i zużyte panele należy traktować jako materiał potencjalnie zakaźny oraz usuwać zgodnie z procedurami bezpieczeństwa biologicznego.

FAQ - najczęściej zadawane pytania

Czy RapID Yeast Plus identyfikuje bakterie beztlenowe?

Nie. RapID Yeast Plus jest przeznaczony do identyfikacji ważnych klinicznie drożdży, organizmów drożdżopodobnych i pokrewnych. Do identyfikacji klinicznie istotnych bakterii beztlenowych przeznaczony jest odrębny system RapID ANA II.

Jak długo trwa identyfikacja za pomocą RapID Yeast Plus?

Panel wymaga 4 godzin inkubacji w temperaturze 30°C. Czas ten nie obejmuje wcześniejszego wyhodowania 48-godzinnej czystej kultury, przygotowania inokulum ani końcowej interpretacji profilu.

Czy wszystkie odczynniki potrzebne do wykonania panelu znajdują się w zestawie?

Odczynniki RapID Yeast Plus A i B oraz karta do przygotowania inokulum znajdują się w zestawie. Oddzielnie wymagany jest RapID Płyn do inokulacji w probówkach po 2 ml oraz standardowe materiały laboratoryjne.

Czy panel można zaszczepić bezpośrednio materiałem klinicznym?

Nie. RapID Yeast Plus jest przeznaczony wyłącznie do badania czystych izolatów wyhodowanych na odpowiednim podłożu agarowym. Bezpośrednie badanie próbki klinicznej lub hodowli mieszanej może prowadzić do nieprawidłowych wyników.

Potrzebujesz pomocy w dobraniu idealnego produktu dla Twojego laboratorium? Informacje na ten temat znajdziesz tu:

Nie znalazłeś takiego produktu na BestLabs? Skontaktuj się z nami - specjaliści BestLabs na pewno znajdą odpowiedni dla Państwa produkt: