Thermo Scientific™ Remel™ RapID™ ONE - zestaw do manualnej identyfikacji biochemicznej Enterobacteriaceae i pałeczek Gram-ujemnych

Thermo Scientific™ Remel™ RapID™ ONE to manualny, jakościowy system biochemicznej identyfikacji pałeczek Gram-ujemnych, wykorzystujący reakcje enzymatyczne, konwencjonalne testy biochemiczne oraz substraty chromogenne. System jest przeznaczony przede wszystkim do identyfikacji oksydazo-ujemnych pałeczek Gram-ujemnych, w tym przedstawicieli Enterobacteriaceae, wyizolowanych w czystej hodowli na podłożach agarowych.

Zastosowanie technologii enzymatycznej umożliwia uzyskanie profilu identyfikacyjnego już po około 4 godzinach inkubacji. Panel zawiera 18 studzienek reakcyjnych, z których uzyskuje się 19 wyników testowych - ostatnia studzienka jest dwufunkcyjna i umożliwia ocenę reakcji ADON oraz IND.

Identyfikacja badanego izolatu odbywa się na podstawie charakterystycznego układu reakcji dodatnich i ujemnych. Wyniki są przeliczane na kod identyfikacyjny, który można interpretować z wykorzystaniem bazy RapID ERIC™. System obejmuje profile reaktywności dla ponad 70 istotnych medycznie pałeczek Gram-ujemnych znajdujących się w bazie producenta.

RapID™ ONE znajduje zastosowanie w profesjonalnych laboratoriach mikrobiologicznych i diagnostycznych, w których istotna jest szybka, manualna identyfikacja wyizolowanych mikroorganizmów. Inne rozwiązania tego typu dostępne są w kategorii testy różnicowania biochemicznego oraz potwierdzenie i identyfikacja mikroorganizmów.

RapID™ ONE - identyfikacja bakterii Gram-ujemnych w około 4 godziny

W przeciwieństwie do części klasycznych systemów biochemicznych, których wynik zależy przede wszystkim od intensywnego namnażania mikroorganizmu i może wymagać dłuższej inkubacji, RapID™ ONE wykorzystuje między innymi aktywność wcześniej wytworzonych enzymów bakteryjnych. Pozwala to skrócić czas potrzebny do odczytania profilu biochemicznego.

Po przygotowaniu odpowiednio gęstej zawiesiny badanego izolatu w RapID™ Inoculation Fluid całe inokulum jest wprowadzane do panelu jednym portem. Odpowiednia konstrukcja tacki umożliwia równomierne rozprowadzenie zawiesiny do wszystkich studzienek reakcyjnych bez konieczności oddzielnego pipetowania każdej reakcji.

Po inkubacji w temperaturze 35-37°C przez 4 godziny poszczególne reakcje ocenia się na podstawie zabarwienia. Do części testów dodawany jest RapID™ ONE Reagent, a test indolowy wymaga zastosowania RapID™ Spot Indole Reagent.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ RapID™ ONE

Reakcje biochemiczne w panelu RapID™ ONE

Panel RapID™ ONE zawiera 18 studzienek, które umożliwiają uzyskanie 19 wyników reakcji biochemicznych. Studzienka nr 18 jest dwufunkcyjna - przed dodaniem odczynnika oceniana jest reakcja ADON, a po dodaniu RapID™ Spot Indole Reagent reakcja IND.

Specyfikacja techniczna RapID™ ONE

Zawartość zestawu RapID™ ONE R8311006

Materiały wymagane oddzielnie

Do prawidłowego wykonania oznaczenia potrzebne są także materiały i odczynniki, które nie są standardową częścią zestawu RapID™ ONE R8311006.

• RapID™ Inoculation Fluid 2 ml - R8325106,
• RapID™ Spot Indole Reagent - R8309002,
• wzorzec mętności 2 McFarlanda lub odpowiednik,
• odczynnik do testu oksydazowego,
• materiały do barwienia metodą Grama,
• ezy, wymazówki i podstawowe wyposażenie mikrobiologiczne,
• inkubator umożliwiający utrzymanie temperatury 35-37°C bez CO₂,
• odpowiednie podłoża do uzyskania czystej hodowli,
• RapID ERIC™ - opcjonalnie do interpretacji kodu identyfikacyjnego.

Sprzęt umożliwiający standaryzację zawiesin można znaleźć w kategorii densytometry laboratoryjne, natomiast odpowiednie pożywki do izolacji mikroorganizmów dostępne są w kategorii podłoża mikrobiologiczne.

Przygotowanie izolatu do badania

Przed zastosowaniem RapID™ ONE badany mikroorganizm powinien zostać uzyskany w postaci czystej hodowli. Producent zaleca wykonanie barwienia metodą Grama i testu oksydazowego przed rozpoczęciem identyfikacji.

Do panelu RapID™ ONE należy kierować oksydazo-ujemne pałeczki Gram-ujemne. Dla mikroorganizmów oksydazo-dodatnich producent przewiduje inne rozwiązania z rodziny RapID, między innymi RapID™ NF Plus, zależnie od charakterystyki badanego izolatu.

Do przygotowania inokulum mogą być wykorzystywane kolonie uzyskane między innymi na odpowiednich podłożach nieselektywnych, selektywnych lub różnicujących. W dokumentacji RapID™ ONE wymieniono między innymi Tryptic Soy Agar z krwią, Hektoen Enteric Agar, MacConkey Agar, EMB Agar, Desoxycholate Agar oraz Salmonella-Shigella Agar.

Gotowe podłoża do hodowli mikroorganizmów dostępne są w kategorii podłoża gotowe na płytkach. Do izolacji pałeczek Gram-ujemnych można wykorzystać również MacConkey Agar dostępny w BestLabs, jeżeli takie podłoże jest odpowiednie dla stosowanej procedury.

Przygotowanie inokulum - 2 McFarlanda

Kolonie z czystej hodowli należy zawiesić w 2 ml RapID™ Inoculation Fluid do uzyskania wizualnej mętności odpowiadającej wzorcowi 2 McFarlanda.

Producent zwraca uwagę, że zbyt mała gęstość inokulum może prowadzić do nieprawidłowych lub nietypowych reakcji. Zawiesinę należy dokładnie wymieszać, a w razie potrzeby użyć worteksu. Przygotowane inokulum powinno zostać wykorzystane w ciągu 15 minut.

Do kontroli mętności zawiesiny przydatne są densytometry laboratoryjne, które umożliwiają standaryzację gęstości inokulum i ograniczenie subiektywności oceny wizualnej.

Inokulacja panelu RapID™ ONE

Konstrukcja RapID™ ONE pozwala na jednoczesne zaszczepienie wszystkich studzienek z jednego portu inokulacyjnego. Po wprowadzeniu całej zawiesiny do panelu należy przechylić tackę zgodnie z instrukcją producenta tak, aby inokulum równomiernie rozprowadziło się w tylnej części panelu, a następnie wypełniło poszczególne studzienki reakcyjne.

Po prawidłowym rozprowadzeniu zawiesiny studzienki powinny być równomiernie wypełnione i pozbawione większych pęcherzyków powietrza. Panel należy następnie ułożyć poziomo.

Panel inkubuje się przez 4 godziny w temperaturze 35-37°C w atmosferze bez CO₂.

Odczyt reakcji po inkubacji

Po zakończeniu inkubacji poszczególne studzienki ocenia się zgodnie z przewodnikiem barwnym RapID™ ONE. Część reakcji jest odczytywana bezpośrednio, natomiast studzienki PRO, GGT i PYR wymagają dodania RapID™ ONE Reagent.

Do testów PRO, GGT i PYR dodaje się po 2 krople RapID™ ONE Reagent. Następnie należy odczytać i zapisać reakcje zgodnie z kryteriami barwnymi producenta.

Studzienka nr 18 jest dwufunkcyjna. Najpierw odczytywana jest reakcja ADON, a następnie do tej samej studzienki dodawane są 2 krople RapID™ Spot Indole Reagent. Reakcję IND odczytuje się po rozwinięciu barwy zgodnie z czasem określonym w instrukcji producenta.

Do reakcji IND należy stosować RapID™ Spot Indole Reagent. Producent wskazuje, że klasyczne odczynniki Kovacsa lub Ehrlicha nie zapewniają odpowiednich wyników w tym systemie.

Interpretacja wyników i RapID ERIC™

Wyniki poszczególnych reakcji przypisywane są jako dodatnie lub ujemne zgodnie z kryteriami producenta. Układ wyników tworzy charakterystyczny profil biochemiczny badanego izolatu.

Na podstawie otrzymanych reakcji tworzony jest mikrokod, który następnie można wprowadzić do systemu RapID ERIC™ - Electronic RapID Compendium. Baza porównuje profil badanego mikroorganizmu z zapisanymi wzorcami reaktywności i wspiera końcową identyfikację.

Wynik powinien być zawsze oceniany razem z barwieniem Grama, wynikiem oksydazy, morfologią kolonii, pochodzeniem izolatu oraz innymi informacjami laboratoryjnymi. Nietypowe lub sprzeczne profile mogą wymagać wykonania dodatkowych badań potwierdzających.

Jakie bakterie może identyfikować RapID™ ONE?

Baza systemu obejmuje ponad 70 profili oksydazo-ujemnych pałeczek Gram-ujemnych, w tym liczne gatunki i grupy należące do Enterobacterales oraz innych mikroorganizmów objętych tabelą różnicowania producenta.

Wśród mikroorganizmów ujętych w aktualnej dokumentacji znajdują się między innymi przedstawiciele rodzajów:

• Escherichia,
• Klebsiella,
• Enterobacter,
• Citrobacter,
• Salmonella,
• Shigella,
• Proteus,
• Providencia,
• Morganella,
• Serratia,
• Yersinia,
• Edwardsiella,
• Hafnia,
• Kluyvera oraz inne taksony ujęte w aktualnej bazie RapID™ ONE.

Zakres identyfikacji należy każdorazowo sprawdzić w aktualnej tabeli różnicowania RapID™ ONE, ponieważ klasyfikacja i nazewnictwo mikroorganizmów mogą ulegać zmianom.

Zastosowanie RapID™ ONE

RapID™ ONE jest przeznaczony do profesjonalnej identyfikacji wyizolowanych bakterii Gram-ujemnych i może stanowić element procesu diagnostycznego w laboratoriach wykonujących identyfikację mikrobiologiczną.

System może być wykorzystywany między innymi w:

• laboratoriach mikrobiologicznych,
• laboratoriach diagnostycznych,
• pracowniach identyfikacji bakterii Gram-ujemnych,
• procedurach identyfikacji Enterobacteriaceae i innych odpowiednich pałeczek Gram-ujemnych,
• laboratoriach wykorzystujących manualne systemy jako uzupełnienie metod automatycznych,
• procedurach wymagających szybkiego uzyskania profilu biochemicznego izolatu.

Więcej produktów do tego etapu badań znajduje się w kategorii potwierdzenie i identyfikacja mikroorganizmów oraz testy różnicowania biochemicznego.

Ergonomia i organizacja pracy

RapID™ ONE został zaprojektowany jako manualny system wielotestowy, który pozwala wykonywać wiele reakcji biochemicznych jednocześnie w jednym panelu. Jednoetapowe nanoszenie zawiesiny ogranicza liczbę pojedynczych operacji pipetowania i może usprawnić przygotowanie oznaczenia.

Czterogodzinna inkubacja umożliwia otrzymanie wyniku identyfikacyjnego tego samego dnia roboczego w sytuacjach, w których tradycyjne zestawy wymagające intensywnego wzrostu mikroorganizmu potrzebowałyby dłuższej inkubacji.

Dołączone formularze wyników i przewodnik barwny wspierają standaryzowany odczyt reakcji, natomiast system RapID ERIC™ umożliwia porównanie otrzymanego kodu z bazą profili producenta.

Kontrola jakości

W aktualnej instrukcji producenta do kontroli jakości systemu RapID™ ONE wymieniono szczepy referencyjne reprezentujące różne profile reakcji. Są to między innymi:

• Proteus vulgaris ATCC® 6380,
• Escherichia coli ATCC® 25922,
• Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853,
• Klebsiella aerogenes ATCC® 13048.

Zakres i częstotliwość kontroli jakości powinny wynikać z aktualnej instrukcji producenta, wymagań obowiązujących w laboratorium i odpowiednich procedur jakościowych.

Przechowywanie i trwałość

RapID™ ONE System oraz RapID™ Spot Indole Reagent należy przechowywać w oryginalnych opakowaniach w temperaturze 2-8°C. Przed zastosowaniem produkty należy doprowadzić do temperatury pokojowej.

Z opakowania należy wyjąć wyłącznie liczbę paneli potrzebną do bieżącego badania. Pozostałe panele należy ponownie szczelnie zamknąć i możliwie szybko umieścić w temperaturze 2-8°C.

Panel wyjęty z warunków chłodniczych powinien zostać wykorzystany tego samego dnia. RapID™ Inoculation Fluid jest przechowywany oddzielnie zgodnie z dokumentacją producenta, w temperaturze pokojowej 20-25°C.

Bezpieczeństwo, IVD i zgodność

RapID™ ONE jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym do profesjonalnego stosowania przez odpowiednio przeszkolony personel. Nie jest systemem automatycznym ani testem typu companion diagnostic.

Podczas pracy należy przestrzegać zasad bezpieczeństwa biologicznego oraz odpowiednich procedur dotyczących materiału potencjalnie zakaźnego. Po zakończeniu oznaczenia próbki, materiały hodowlane, pojemniki i zużyte panele powinny zostać poddane właściwej dekontaminacji i utylizacji.

RapID™ ONE Reagent zawiera substancje wymagające zachowania odpowiednich środków ostrożności. Przed użyciem należy zapoznać się z aktualną instrukcją oraz kartą charakterystyki producenta i stosować wymagane środki ochrony indywidualnej.

Aktualna dokumentacja produktu wskazuje oznakowanie CE dla wyrobu IVD. W zastosowaniach regulowanych należy każdorazowo zweryfikować aktualny status regulacyjny konkretnego numeru katalogowego i partii produktu.

FAQ - Thermo Scientific™ RapID™ ONE

RapID™ ONE w ofercie BestLabs

Thermo Scientific™ Remel™ RapID™ ONE stanowi kompletne rozwiązanie do szybkiej, manualnej identyfikacji biochemicznej Enterobacteriaceae i innych odpowiednich pałeczek Gram-ujemnych. Połączenie 19 reakcji testowych, czterogodzinnej inkubacji, wizualnego odczytu i możliwości wykorzystania systemu RapID ERIC™ pozwala sprawnie uzyskać charakterystyczny profil badanego izolatu.

W BestLabs dostępne są również pozostałe testy różnicowania biochemicznego, produkty do potwierdzania i identyfikacji mikroorganizmów, podłoża mikrobiologiczne oraz densytometry do standaryzacji zawiesin.