Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar z 5% krwią owczą - gotowa pożywka na płytkach Petriego do hodowli mikroorganizmów i oceny hemolizy, 10 szt.

Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar with 5% Sheep Blood PB5012A to gotowa, bogata i nieselektywna pożywka mikrobiologiczna z 5% defibrynowanej krwi owczej, przeznaczona do hodowli szerokiego zakresu mikroorganizmów, w tym bakterii o zwiększonych wymaganiach odżywczych, oraz do oceny reakcji hemolitycznych.

Podstawę medium stanowi Tryptone Soya Agar - TSA, zawierający trypton i pepton sojowy jako źródła aminokwasów, peptydów oraz innych substancji odżywczych. Dodatek 50 ml defibrynowanej krwi owczej na litr podłoża - 5% dodatkowo wzbogaca medium i umożliwia obserwację wpływu wyhodowanych mikroorganizmów na erytrocyty.

Podłoże znajduje zastosowanie w profesjonalnej diagnostyce mikrobiologicznej, rutynowej izolacji bakterii, hodowli bardziej wymagających drobnoustrojów oraz wstępnej charakterystyce izolatów na podstawie morfologii kolonii i rodzaju hemolizy. Może wspierać wzrost zarówno odpowiednich bakterii tlenowych, jak i bakterii hodowanych w warunkach beztlenowych, jeżeli właściwa metoda przewiduje odpowiednią atmosferę inkubacji.

Wariant PB5012A jest dostarczany jako 10 gotowych płytek Petriego o średnicy 90 mm. Gotowa postać pozwala ograniczyć przygotowanie podłoża w laboratorium, w tym przygotowywanie TSA, sterylizację, kontrolowane chłodzenie, aseptyczne dodawanie krwi oraz rozlewanie medium.

Sprawdź również podłoża gotowe na płytkach, pełną kategorię podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne oraz testy różnicowania biochemicznego dostępne w BestLabs.

Tryptone Soya Agar z krwią owczą - uniwersalne wzbogacone podłoże mikrobiologiczne

Tryptone Soya Agar z 5% krwią owczą łączy właściwości odżywcze klasycznego TSA z dodatkowym wzbogaceniem w defibrynowaną krew. Dzięki temu podłoże może wspierać wzrost mikroorganizmów o większych wymaganiach odżywczych niż standardowy TSA oraz umożliwiać ocenę reakcji hemolitycznych kolonii.

Produkt jest podłożem nieselektywnym. Nie zawiera składników przeznaczonych do wybiórczego hamowania konkretnej grupy mikroorganizmów, dlatego na powierzchni mogą rozwijać się różne bakterie zdolne do wzrostu w zastosowanych warunkach.

W praktyce diagnostycznej obserwuje się jednocześnie wzrost, wielkość i morfologię kolonii oraz obecność i charakter hemolizy. Wyniki te mogą pomóc ukierunkować kolejne etapy identyfikacji, ale nie stanowią samodzielnego potwierdzenia gatunku.

Kluczowe cechy Thermo Scientific™ Oxoid™ PB5012A

Specyfikacja techniczna Tryptone Soya Agar with 5% Sheep Blood PB5012A

Skład Tryptone Soya Agar z 5% krwią owczą

* Typowa formulacja może być korygowana przez producenta w zakresie wymaganym do spełnienia określonych parametrów jakościowych gotowego medium.

Dlaczego do TSA dodawana jest krew owcza?

Klasyczny Tryptone Soya Agar jest już bogatym, nieselektywnym podłożem ogólnego przeznaczenia. Dodanie 5% defibrynowanej krwi owczej rozszerza jego zastosowanie o dwa ważne elementy.

Po pierwsze, krew stanowi dodatkowe źródło substancji odżywczych i może wspierać wzrost bakterii bardziej wymagających. Po drugie, zachowane erytrocyty pozwalają obserwować reakcje hemolityczne wywoływane przez izolat.

Dzięki temu na jednej płytce możliwa jest jednoczesna ocena:

• obecności wzrostu,
• wielkości i wyglądu kolonii,
• pigmentacji,
• morfologii kolonii,
• obecności hemolizy,
• charakteru reakcji hemolitycznej.

Hemoliza beta

Beta-hemoliza oznacza wyraźny rozpad erytrocytów wokół kolonii. W praktyce obserwowana jest jako przejrzysta strefa otaczająca wzrost.

Aktualne IFU dla PB5012A wykorzystuje jako przykład Streptococcus pyogenes ATCC® 12344™, który daje dobry wzrost szarych kolonii z beta-hemolizą.

Beta-hemolizę obserwuje się również w przypadku niektórych innych bakterii. Sam charakter hemolizy nie jest więc swoisty dla jednego gatunku i nie może stanowić podstawy ostatecznej identyfikacji.

Hemoliza alfa

Alfa-hemoliza jest częściową reakcją erytrocytów obserwowaną jako zielonkawe przebarwienie oraz wąska strefa częściowej hemolizy wokół kolonii.

Producent wykorzystuje w kontroli jakości między innymi Streptococcus pneumoniae ATCC® 6305™, który na PB5012A tworzy szare kolonie z alfa-hemolizą.

Podobnie jak w przypadku beta-hemolizy, jest to cecha fenotypowa o znaczeniu różnicującym, ale nie samodzielny test identyfikacyjny.

Brak hemolizy

Jeżeli rosnący mikroorganizm nie powoduje widocznego uszkodzenia erytrocytów, wokół kolonii nie obserwuje się charakterystycznej strefy przejaśnienia ani zielonkawego przebarwienia.

W tradycyjnym nazewnictwie taki obraz bywa określany jako „gamma-hemoliza”, jednak w praktyce oznacza po prostu brak widocznej hemolizy.

Kontrola jakości PB5012A

Thermo Scientific™ Oxoid™ prowadzi kontrolę jakości gotowego podłoża z wykorzystaniem odpowiednio scharakteryzowanych szczepów referencyjnych. Aktualna dokumentacja PB5012A obejmuje między innymi:

Dla ilościowej kontroli S. aureus, B. subtilis, P. aeruginosa i B. cereus producent wykorzystuje inokulum 50-120 CFU, a uzyskana liczba kolonii powinna wynosić co najmniej 50% wyniku podłoża kontrolnego TSA.

Warunki QC producenta nie stanowią uniwersalnych warunków inkubacji wszystkich próbek. Odpowiednie materiały do kontroli podłoży można znaleźć w kategorii szczepy kontrolne.

Warunki inkubacji

Aktualne IFU dla PB5012A wskazuje jako typowe warunki 36 ±1°C przez 24-48 godzin, jednocześnie wyraźnie zaznaczając, że atmosfera, temperatura i czas inkubacji zależą od rodzaju próbki i poszukiwanego mikroorganizmu.

Nie należy więc stosować jednego schematu inkubacji jako uniwersalnego dla wszystkich zastosowań TSA z krwią.

Właściwa procedura może wymagać:

• warunków tlenowych,
• atmosfery wzbogaconej w CO₂,
• warunków beztlenowych,
• innego czasu inkubacji,
• innej temperatury.

Parametry muszą wynikać z wymagań badanego mikroorganizmu oraz zatwierdzonej metody.

Skrócona procedura zastosowania gotowych płytek

Powyższa procedura ma charakter skrótu informacyjnego i nie zastępuje aktualnej instrukcji używania producenta ani SOP laboratorium.

TSA z krwią owczą a klasyczny Tryptone Soya Agar

Oba podłoża bazują na tej samej koncepcji odżywczego, nieselektywnego TSA, jednak dodatek 5% krwi owczej istotnie zmienia możliwości zastosowania medium.

Jeżeli celem jest standardowa hodowla bez potrzeby obserwacji hemolizy, sprawdź również Tryptone Soya Agar bez dodatku krwi.

TSA z krwią a Columbia Agar with Sheep Blood

Tryptone Soya Agar with Sheep Blood i Columbia Agar with Sheep Blood są odrębnymi formulacjami. Mimo że oba podłoża zawierają krew owczą i pozwalają oceniać reakcje hemolityczne, różnią się bazą odżywczą.

PB5012A wykorzystuje trypton i pepton sojowy, natomiast Columbia Agar opiera się na innej mieszaninie peptonów i składników odżywczych. Nie należy automatycznie traktować tych podłoży jako zamienników, jeżeli procedura wskazuje konkretną formulację.

Alternatywną formulację można znaleźć w produkcie Columbia Agar with Sheep Blood PLUS.

Streptococcus spp. i reakcje hemolityczne

Podłoża z krwią są szczególnie przydatne podczas wstępnej charakterystyki Streptococcus spp., ponieważ typ hemolizy może stanowić istotny element obrazu fenotypowego izolatu.

Na PB5012A producent dokumentuje między innymi:

• Streptococcus pneumoniae - szare kolonie z alfa-hemolizą,
• Streptococcus pyogenes - szare kolonie z beta-hemolizą.

Obserwacja ta powinna być jednak traktowana jako wstępny element różnicowania. Ostateczna identyfikacja wymaga odpowiednich badań potwierdzających.

Staphylococcus aureus na TSA z krwią

W kontroli jakości dokładnego wariantu PB5012A producent wykorzystuje również Staphylococcus aureus ATCC® 6538™, dla którego obserwuje kolonie żółte, błyszczące z hemolizą.

Wygląd kolonii zależy jednak od konkretnego szczepu i warunków hodowli. Żółta kolonia z hemolizą nie może być automatycznie identyfikowana jako S. aureus bez dalszego potwierdzenia.

Bacillus cereus i podwójna hemoliza

Dla Bacillus cereus ATCC® 11778™ producent opisuje w kontroli jakości wzrost dużych, szorstkich kolonii z charakterystyczną podwójną strefą hemolizy.

Jest to przykład wykorzystania podłoża z krwią do obserwacji dodatkowych cech fenotypowych bakterii, ale podobnie jak w pozostałych przypadkach wynik wymaga interpretacji wraz z innymi badaniami.

Istotne ograniczenie - Haemophilus spp.

Większość szczepów Haemophilus spp. nie jest odpowiednio hodowana na agarach z krwią owczą PB5012A.

Producent wyjaśnia, że podłoże z krwią owczą dostarcza heminę - czynnik X, ale nie zapewnia odpowiedniej dostępności NAD - czynnika V, wymaganego przez wiele gatunków Haemophilus.

Jeżeli celem badania jest hodowla takich wymagających mikroorganizmów, konieczne może być zastosowanie odpowiedniego podłoża czekoladowego lub innego medium zapewniającego wymagane czynniki wzrostowe.

Podłoże nieselektywne - znaczenie dla interpretacji

PB5012A nie zawiera selektywnych antybiotyków ani inhibitorów. W materiale zawierającym mieszaną mikroflorę na płytce może więc rozwijać się kilka różnych typów kolonii.

Jest to korzystne podczas izolacji szerokiego spektrum mikroorganizmów, ale oznacza jednocześnie, że w określonych badaniach konieczne może być zastosowanie równolegle:

• podłoży selektywnych,
• podłoży różnicujących,
• podłoży chromogennych,
• testów potwierdzających.

Produkty przeznaczone do kolejnych etapów analizy można znaleźć w kategorii badania potwierdzające.

Przechowywanie i trwałość

Tryptone Soya Agar with 5% Sheep Blood PB5012A należy przechowywać w oryginalnym opakowaniu w temperaturze 2-12°C, z dala od światła.

Aktualna karta produktu podaje trwałość 8 tygodni. Wiążący jest zawsze termin ważności znajdujący się na opakowaniu konkretnej partii.

Przed użyciem producent zaleca pozwolić płytce osiągnąć temperaturę pokojową. Płytek nie należy preinkubować przed zaszczepieniem.

Nie należy używać produktu:

• po upływie terminu ważności,
• jeżeli opakowanie jest uszkodzone,
• przy widocznej kontaminacji,
• przy znacznym odwodnieniu agaru,
• w przypadku nieprawidłowej barwy lub innych oznak pogorszenia jakości.

Ergonomia gotowych płytek z krwią

Samodzielne przygotowanie agaru z krwią wymaga prawidłowego przygotowania bazy, sterylizacji, schłodzenia do odpowiedniej temperatury, aseptycznego dodania krwi bez uszkodzenia erytrocytów oraz równomiernego rozlania medium.

Gotowy wariant PB5012A eliminuje te etapy i może ograniczyć zmienność związaną z:

• przygotowaniem bazy TSA,
• parametrami autoklawowania,
• temperaturą dodawania krwi,
• jakością i ilością krwi,
• homogenizacją medium,
• objętością napełnienia płytek.

Gotowe podłoże jest szczególnie praktyczne w laboratoriach wykonujących rutynowe serie posiewów diagnostycznych.

Zastosowanie

Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar with 5% Sheep Blood PB5012A znajduje zastosowanie przede wszystkim w:

• mikrobiologii klinicznej,
• izolacji bakterii z próbek klinicznych,
• hodowli bardziej wymagających mikroorganizmów,
• ocenie alfa- i beta-hemolizy,
• hodowli Streptococcus spp.,
• hodowli odpowiednich Staphylococcus spp.,
• hodowli Bacillus spp.,
• rutynowej mikrobiologii laboratoryjnej,
• utrzymywaniu odpowiednich kultur zgodnie z metodą,
• kontroli jakości,
• laboratoriach badawczych i R&D.

IVD, bezpieczeństwo, GLP, SOP i LIMS

Thermo Scientific™ Oxoid™ PB5012A jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania laboratoryjnego. Produkt nie jest zautomatyzowany i nie jest diagnostyką towarzyszącą.

Próbki kliniczne i uzyskane hodowle należy traktować jako potencjalnie zakaźne. Personel powinien stosować właściwe procedury bezpieczeństwa biologicznego, środki ochrony indywidualnej oraz obowiązujące zasady dekontaminacji i usuwania odpadów.

Podłoże może być wykorzystywane jako element procedur realizowanych zgodnie z GLP, zatwierdzonymi SOP oraz systemami zarządzania jakością, jeżeli zostało prawidłowo dobrane, zweryfikowane i objęte odpowiednią kontrolą jakości.

Numer katalogowy, numer LOT, data ważności, warunki przechowywania, identyfikacja próbki, parametry inkubacji i wynik hodowli mogą być dokumentowane w systemie LIMS.

Samo zastosowanie gotowego TSA z 5% krwią owczą nie oznacza automatycznej zgodności całej procedury z GLP, GMP, ISO ani innym systemem jakości.

FAQ - Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar with 5% Sheep Blood PB5012A

Thermo Scientific™ Oxoid™ Tryptone Soya Agar z 5% krwią owczą w ofercie BestLabs

Thermo Scientific™ Oxoid™ PB5012A to profesjonalne, gotowe podłoże łączące uniwersalną bazę Tryptone Soya Agar z dodatkiem 5% defibrynowanej krwi owczej. Formulacja umożliwia hodowlę szerokiego zakresu bakterii i zapewnia możliwość obserwowania ich reakcji hemolitycznych.

Format 10 gotowych płytek Petriego 90 mm ogranicza pracochłonność przygotowywania agaru z krwią i wspiera powtarzalność rutynowych posiewów w profesjonalnym laboratorium.

Sprawdź również pozostałe podłoża gotowe na płytkach, podłoża mikrobiologiczne, szczepy kontrolne, testy różnicowania biochemicznego oraz produkty do badań potwierdzających.