Liofilchem® Amphotericin B AMB 0,002-32 µg/ml - paski gradientowe MTS™ do oznaczania MIC amfoterycyny B, 10 szt.

Liofilchem® MTS™ Amphotericin B AMB 0,002-32, ref. 921531 to profesjonalne paski gradientowe do ilościowego oznaczania minimalnego stężenia hamującego - MIC - amfoterycyny B wobec odpowiednich grzybów. Produkt jest przeznaczony do badań wrażliwości przeciwgrzybiczej wykonywanych metodą gradientowej dyfuzji na odpowiednio przygotowanym podłożu agarowym.

Każdy pasek MTS™ wykonany jest ze specjalnego wysokiej jakości papieru impregnowanego zdefiniowanym gradientem amfoterycyny B. Zakres stężeń wynosi 0,002-32 µg/ml i obejmuje 15 dwukrotnych rozcieńczeń odpowiadających koncepcji stosowanej w klasycznych metodach oznaczania MIC.

Po umieszczeniu paska na równomiernie zaszczepionej powierzchni agaru amfoterycyna B dyfunduje do podłoża, tworząc ciągły gradient stężenia. Po inkubacji wokół paska powstaje eliptyczna strefa zahamowania wzrostu. Wartość MIC odczytuje się bezpośrednio w µg/ml w miejscu przecięcia brzegu elipsy zahamowania z podziałką paska.

Produkt o numerze katalogowym 921531 zawiera 10 indywidualnie pakowanych pasków MTS™. Każde jednostkowe opakowanie zawiera desykant ograniczający wpływ wilgoci na właściwości gradientu.

Liofilchem® klasyfikuje ten wariant jako CE IVD - wyrób do diagnostyki in vitro przeznaczony wyłącznie do profesjonalnego stosowania laboratoryjnego.

Sprawdź również gradientowe paski diagnostyczne MIC, Liofilchem® RPMI Agar, Physiological Solution 0,85% NaCl, densytometry oraz szczepy kontrolne dostępne w BestLabs.

Amphotericin B MTS™ - ilościowe oznaczanie MIC leku przeciwgrzybiczego

MIC - Minimum Inhibitory Concentration oznacza najmniejsze stężenie substancji przeciwdrobnoustrojowej, które w określonych i standaryzowanych warunkach in vitro hamuje widoczny wzrost badanego mikroorganizmu.

W przeciwieństwie do klasycznej metody krążkowo-dyfuzyjnej, w której podstawowym wynikiem jest średnica strefy zahamowania, pasek gradientowy umożliwia uzyskanie ilościowej wartości MIC wyrażonej w µg/ml.

Wynik taki może być następnie interpretowany w odniesieniu do aktualnych kryteriów:

• EUCAST,
• CLSI,
• krajowej grupy referencyjnej,
• lub innych kryteriów właściwych dla badanego gatunku i zastosowania.

Wartość MIC jest wynikiem badania in vitro. Nie jest sama w sobie decyzją terapeutyczną i musi być interpretowana w odniesieniu do gatunku mikroorganizmu, aktualnych breakpointów, farmakokinetyki i farmakodynamiki leku oraz kontekstu klinicznego.

Kluczowe cechy Liofilchem® Amphotericin B AMB 921531

Specyfikacja techniczna Amphotericin B AMB MTS™

Jak działa pasek gradientowy MTS™?

Pasek MTS™ zawiera predefiniowany, wykładniczy gradient amfoterycyny B. Po jego nałożeniu na świeżo zaszczepioną powierzchnię odpowiedniego agaru substancja przeciwgrzybicza zaczyna dyfundować z paska do podłoża.

W rezultacie wokół paska powstaje gradient stężenia, którego wartość maleje wraz z oddalaniem się od obszaru zawierającego najwyższą koncentrację leku.

Po inkubacji obserwowany jest wzrost grzyba oraz eliptyczna strefa inhibicji. Punkt, w którym brzeg elipsy przecina skalę paska, odpowiada wartości MIC.

Amfoterycyna B - lek przeciwgrzybiczy z grupy polienów

Amfoterycyna B jest polienowym lekiem przeciwgrzybiczym wykazującym aktywność wobec wielu gatunków drożdży i grzybów strzępkowych.

Jej działanie jest związane przede wszystkim z oddziaływaniem z ergosterolem błony komórkowej grzyba, prowadzącym do zaburzenia prawidłowej funkcji błony i integralności komórki.

Badanie MIC umożliwia określenie, przy jakim stężeniu amfoterycyny B wzrost konkretnego izolatu zostaje zahamowany w standardowych warunkach in vitro.

MIC nie jest stężeniem dawkowania leku u pacjenta i nie może być interpretowane bez właściwych breakpointów oraz informacji klinicznych.

Badanie drożdży

Application Guide Liofilchem® wskazuje Amphotericin B AMB jako jeden z pasków przeznaczonych do badania wrażliwości drożdży.

Dla tej grupy producent wskazuje typowo:

Producent wymienia amfoterycynę B w przykładowym panelu badania drożdży razem między innymi z flukonazolem, itrakonazolem, flucytozyną, worykonazolem i kaspofunginą.

Parametry te stanowią ogólne zalecenia aplikacyjne producenta. Przy badaniu konkretnego gatunku należy stosować aktualną dokumentację MTS™, obowiązującą metodę AFST oraz aktualne kryteria interpretacyjne.

Badanie Aspergillus i innych grzybów pleśniowych

Liofilchem® wskazuje AMB również w przykładowym panelu do badania wrażliwości grzybów pleśniowych.

Dla pleśni Application Guide określa:

• podłoże: RPMI Agar,
• zawiesinę w 0,85% NaCl z Tween 20,
• dla Aspergillus spp. - około 0,5 McFarlanda,
• dla Fusarium / Rhizopus spp. - około 1 McFarlanda,
• inkubację w 35 ±2°C,
• czas od około 16 do 72 godzin zależnie od rodzaju grzyba.

Nie należy stosować jednego czasu inkubacji jako uniwersalnego dla wszystkich pleśni. Szybkość wzrostu oraz wymagania testowe są zależne od rodzaju i gatunku.

RPMI Agar - właściwe podłoże do pasków przeciwgrzybiczych

Dla testów przeciwgrzybiczych Liofilchem® wskazuje RPMI Agar, a nie standardowy Mueller-Hinton Agar stosowany w wielu badaniach lekowrażliwości bakterii.

W BestLabs dostępny jest dedykowany Liofilchem® RPMI Agar na gotowych płytkach, przeznaczony między innymi do badań wrażliwości grzybów przy użyciu pasków gradientowych MIC.

Dobór medium jest krytyczny, ponieważ skład, pH, grubość warstwy agaru i właściwości wzrostowe podłoża mogą wpływać na dyfuzję substancji oraz uzyskaną wartość MIC.

Przygotowanie inokulum

Do przygotowania zawiesiny drożdży producent wskazuje 0,85% NaCl. W BestLabs dostępny jest Liofilchem® Physiological Solution 0,85% NaCl.

Odpowiednia gęstość inokulum ma kluczowe znaczenie dla wyniku:

• zbyt mała liczba komórek może prowadzić do pozornie niższej wartości MIC,
• zbyt duża liczba komórek może wpływać na wielkość strefy zahamowania i utrudniać odczyt,
• nierównomierne pokrycie powierzchni może powodować nieregularny kształt elipsy.

Do obiektywnej kontroli mętności można wykorzystać odpowiedni densytometr.

Skrócona procedura wykonania testu MTS™

Powyższy opis ma charakter skrótu technicznego i nie zastępuje aktualnego IFU Liofilchem®, Application Guide ani procedury AFST obowiązującej w laboratorium.

Jak prawidłowo odczytać MIC?

Odczyt należy wykonywać dopiero wtedy, gdy na płytce widoczny jest równomierny i prawidłowy wzrost badanego mikroorganizmu.

Nie należy interpretować testu, jeśli:

• hodowla jest mieszana,
• wzrost jest zbyt słaby,
• wzrost jest nadmiernie gęsty lub nieregularny,
• elipsa ma kształt uniemożliwiający wiarygodny odczyt.

Producent podaje kilka podstawowych reguł:

• MIC odczytuje się w miejscu przecięcia granicy zahamowania wzrostu z paskiem,
• jeśli granica znajduje się pomiędzy dwiema wartościami skali, wynik należy zaokrąglić w górę,
• jeżeli wzrost występuje w całym zakresie gradientu, wynik jest raportowany jako ≥ najwyższej wartości skali,
• jeżeli elipsa przecina obszar poniżej najniższej wartości, wynik jest raportowany jako < najniższej wartości skali,
• przy nierównym przecięciu należy przyjąć wartość wyższą,
• przy różnicy większej niż jedno rozcieńczenie producent zaleca powtórzenie testu.

MIC 0,002-32 µg/ml - co oznacza zakres paska?

Zakres 0,002-32 µg/ml określa najniższą i najwyższą wartość możliwą do bezpośredniego odczytu na pasku.

Jeżeli wzrost badanego organizmu zostaje zahamowany poniżej najniższego poziomu, wynik będzie raportowany jako:

MIC <0,002 µg/ml.

Jeżeli natomiast nie obserwuje się prawidłowej elipsy zahamowania w całym dostępnym zakresie, wynik może zostać zapisany jako:

MIC ≥32 µg/ml.

Wartości te są wynikiem ilościowym badania in vitro i dopiero ich porównanie z aktualnymi kryteriami odpowiednimi dla organizmu pozwala na dalszą klasyfikację.

EUCAST i CLSI - nie należy wpisywać jednego breakpointu dla wszystkich grzybów

Interpretacja wartości MIC zależy od konkretnego gatunku grzyba i aktualnej wersji dokumentu interpretacyjnego.

Liofilchem® w instrukcji MTS™ zaleca odnoszenie wyników do aktualnych breakpointów publikowanych przez:

• EUCAST - European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing,
• CLSI - Clinical and Laboratory Standards Institute,
• lub właściwą krajową grupę referencyjną.

Nie istnieje jeden uniwersalny breakpoint amfoterycyny B, który można zastosować do każdego gatunku Candida, Aspergillus, Cryptococcus lub innego grzyba.

Co więcej, breakpointy i zasady interpretacji są okresowo aktualizowane. Dlatego wartości zapisanych w starych tabelach producenta lub starszych procedurach laboratoryjnych nie należy przenosić automatycznie do aktualnego wyniku.

Ważne ograniczenie 2026 - Candida auris

Jest to ważne, ponieważ komercyjne metody oznaczania amfoterycyny B mogą dla niektórych kombinacji organizm-metoda wykazywać większą zmienność lub przesunięcie rozkładu MIC względem metod referencyjnych.

MTS™ nie jest metodą referencyjną mikrorozcieńczeń

Paski gradientowe są wygodną metodą ilościowego oznaczania MIC na agarze, jednak metody referencyjne MIC dla grzybów opierają się na odpowiednio standaryzowanych metodach rozcieńczeniowych.

Liofilchem® sam wskazuje, że procedury rozcieńczeń w bulionie i agarze bazujące na dwukrotnych rozcieńczeniach stanowią metody referencyjne, a spodziewana odtwarzalność takich oznaczeń wynosi około ±1 dwukrotne rozcieńczenie.

Wyniku MTS™ nie należy więc przedstawiać jako bezwzględnej wartości analitycznej niezależnej od metody. MIC zawsze należy interpretować w kontekście zastosowanego systemu testowego.

Kontrola jakości pasków Amphotericin B

Aktualna tabela interpretacyjna Liofilchem® dla MTS™ wskazuje dla AMB między innymi następujące szczepy kontrolne:

Producent wskazuje, że wyniki izolatów nie powinny być raportowane, jeżeli odpowiednia kontrola jakości znajduje się poza wymaganym zakresem.

Przed wdrożeniem danej serii testów należy sprawdzić aktualną tabelę QC właściwą dla produktu i zastosowanej procedury. Odpowiednie materiały można dobrać w kategorii szczepy kontrolne.

Przechowywanie pasków MTS™

Ogólne IFU Liofilchem® dla MTS™ określa zakres przechowywania nieotwartych produktów od -20°C do +8°C, jednocześnie wymagając sprawdzenia temperatury podanej na etykiecie konkretnej substancji i numeru katalogowego.

Dla ref. 921531 Amphotericin B AMB 0,002-32 w bieżącej dokumentacji dystrybucyjnej stosowany jest zakres 2-8°C. Nadrzędna pozostaje etykieta konkretnej otrzymanej partii.

Niezależnie od zakresu temperatury paski należy chronić przed:

• wilgocią,
• nadmiernym ciepłem,
• silnym światłem,
• gwałtownymi zmianami temperatury.

Przed otwarciem schłodzonego opakowania producent zaleca pozostawienie go na około 30 minut do osiągnięcia temperatury pokojowej. Pozwala to ograniczyć kondensację wilgoci na pasku.

Indywidualne opakowanie 10 pasków

Wariant 921531 zawiera 10 pasków pakowanych indywidualnie. W każdym opakowaniu jednostkowym znajduje się materiał osuszający.

Takie rozwiązanie:

• chroni niewykorzystane paski przed wilgocią,
• pozwala otworzyć tylko jeden test bez narażania pozostałych,
• ułatwia magazynowanie mniejszych serii badań,
• wspiera identyfikowalność i organizację pracy laboratoryjnej.

Liofilchem oferuje tę samą konfigurację AMB również w większych opakowaniach 30 i 100 testów, którym odpowiadają osobne numery katalogowe.

Ograniczenia wyniku MIC

Wynik uzyskany za pomocą MTS™ może zostać zaburzony między innymi przez:

• nieprawidłową gęstość inokulum,
• mieszaną kulturę,
• niewłaściwe podłoże,
• nieodpowiednie pH lub grubość warstwy agaru,
• zbyt mokrą powierzchnię płyty,
• nierównomierny posiew,
• niepełny kontakt paska z agarem,
• przesunięcie paska po jego aplikacji,
• nieprawidłową temperaturę lub czas inkubacji,
• nieprawidłową interpretację nietypowej elipsy.

W przypadku niejednoznacznego punktu końcowego test należy ocenić zgodnie z dokumentacją producenta, a jeśli jest to wymagane - powtórzyć lub potwierdzić metodą referencyjną.

IVD, bezpieczeństwo i zastosowanie profesjonalne

Liofilchem® MTS™ Amphotericin B 921531 jest wyrobem do diagnostyki in vitro - CE IVD - przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania laboratoryjnego.

Sam pasek nie jest według ogólnego IFU klasyfikowany jako materiał niebezpieczny, jednak podczas testu pozostaje w kontakcie z żywą kulturą potencjalnie chorobotwórczego grzyba.

Zużyte paski, płytki, wymazówki oraz pozostałe materiały mające kontakt z izolatem należy traktować jako potencjalnie zakaźne i:

• dekontaminować zgodnie z SOP,
• usuwać jako właściwy odpad laboratoryjny,
• stosować wymagane środki ochrony indywidualnej,
• pracować zgodnie z zasadami bezpieczeństwa biologicznego.

GLP, SOP, LIMS i dokumentacja badania

Paski MTS™ mogą być wykorzystywane jako element procedur prowadzonych zgodnie z GLP, zatwierdzonym SOP i systemem zarządzania jakością laboratorium.

W ramach badania można dokumentować:

• identyfikację izolatu,
• gatunek mikroorganizmu,
• numer katalogowy 921531,
• numer LOT pasków,
• termin ważności,
• numer partii RPMI Agar,
• gęstość inokulum,
• warunki inkubacji,
• wartość MIC,
• zastosowaną wersję breakpointów EUCAST lub CLSI,
• wynik kontroli jakości,
• dane operatora,
• wynik w systemie LIMS.

Samo zastosowanie pasków MTS™ nie powoduje automatycznej zgodności badania z EUCAST, CLSI, ISO, GLP ani innym standardem. Cała procedura musi być właściwie wdrożona, zweryfikowana i kontrolowana.

Zastosowanie

Liofilchem® Amphotericin B AMB 0,002-32 MTS™ 921531 znajduje zastosowanie przede wszystkim w:

• oznaczaniu MIC amfoterycyny B,
• badaniu wrażliwości odpowiednich drożdży,
• badaniu wrażliwości odpowiednich grzybów pleśniowych,
• AFST - antifungal susceptibility testing,
• mikrobiologii i mykologii klinicznej,
• ocenie fenotypów o zmniejszonej wrażliwości,
• monitorowaniu trendów wrażliwości laboratoryjnej,
• kontroli jakości badań przeciwgrzybiczych,
• laboratoriach diagnostycznych i referencyjnych,
• badaniach R&D - zgodnie z zakresem dopuszczonym dla produktu i właściwą procedurą.

FAQ - Liofilchem® Amphotericin B AMB 0,002-32 MTS™

Liofilchem® Amphotericin B AMB MTS™ w ofercie BestLabs

Liofilchem® Amphotericin B AMB 0,002-32, ref. 921531 to ilościowy test gradientowy pozwalający oznaczyć MIC amfoterycyny B bez konieczności wykonywania pełnej serii manualnych rozcieńczeń.

Zakres 0,002-32 µg/ml, bezpośrednia skala odczytu MIC oraz format 10 indywidualnie pakowanych pasków sprawiają, że produkt może być wygodnym elementem profesjonalnego workflow AFST prowadzonego na odpowiednio przygotowanym RPMI Agar.

Do wykonania kompletnej procedury sprawdź Liofilchem® RPMI Agar, Physiological Solution 0,85% NaCl, densytometry oraz odpowiednie szczepy kontrolne.

Pełna oferta dostępna jest w kategorii gradientowe paski diagnostyczne do oznaczania MIC.