Liofilchem® Aztreonam-avibactam AZA 0,016/4-256/4 - paski gradientowe MTS™ do oznaczania MIC, 10 szt.

Liofilchem® MTS™ Aztreonam-avibactam AZA 0,016/4-256/4, ref. 920891 to profesjonalne paski gradientowe do ilościowego oznaczania minimalnego stężenia hamującego - MIC - aztreonamu w obecności stałego stężenia awibaktamu wobec klinicznych izolatów należących do rzędu Enterobacterales.

Każdy pasek zawiera predefiniowany gradient aztreonamu od 0,016 do 256 µg/ml, podczas gdy stężenie inhibitora β-laktamaz - awibaktamu - pozostaje stałe i wynosi 4 µg/ml. Gradient obejmuje zakres odpowiadający 15 kolejnym dwukrotnym rozcieńczeniom, analogicznie do klasycznych ilościowych metod oznaczania MIC.

Po umieszczeniu paska na równomiernie zaszczepionej powierzchni Mueller-Hinton Agar substancje przeciwdrobnoustrojowe dyfundują do podłoża i tworzą gradient stężenia. Po inkubacji powstaje charakterystyczna elipsa zahamowania wzrostu, a wartość MIC odczytuje się bezpośrednio ze skali paska w punkcie przecięcia granicy pełnego zahamowania wzrostu z paskiem.

Dokładny wariant 920891 zawiera 10 pasków pakowanych indywidualnie w koperty z desykantem. Indywidualne opakowanie ogranicza ekspozycję niewykorzystanych pasków na wilgoć i ułatwia prowadzenie niewielkich serii badań lekowrażliwości.

Produkt jest wyrobem do diagnostyki in vitro - IVD, przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego stosowania laboratoryjnego.

Sprawdź również gradientowe paski diagnostyczne do oznaczania MIC, Mueller-Hinton Agar, Physiological Solution 0,85% NaCl, densytometry oraz szczepy kontrolne.

Aztreonam-avibactam MTS™ - ilościowe oznaczanie MIC wobec Enterobacterales

MIC - Minimum Inhibitory Concentration jest najmniejszym stężeniem substancji przeciwdrobnoustrojowej hamującym widoczny wzrost badanego mikroorganizmu w zdefiniowanych warunkach in vitro.

W przypadku paska AZA wynikiem oznaczenia jest stężenie aztreonamu przy stałej obecności 4 µg/ml awibaktamu. Z tego względu wartości mogą być zapisywane np. jako 0,25/4 µg/ml, 2/4 µg/ml czy 4/4 µg/ml.

Metoda gradientowa umożliwia uzyskanie ilościowej wartości MIC bez wykonywania pełnej serii manualnych rozcieńczeń. Wynik może następnie zostać skategoryzowany zgodnie z aktualnymi breakpointami właściwej organizacji, np. EUCAST lub CLSI.

Nie należy jednak interpretować samego MIC bez uwzględnienia badanego gatunku, aktualnej wersji breakpointów oraz zastosowanej metody AST.

Kluczowe cechy Liofilchem® Aztreonam-avibactam AZA 920891

Specyfikacja techniczna Aztreonam-avibactam AZA 0,016/4-256/4

Aztreonam i awibaktam - dlaczego stosuje się tę kombinację?

Aztreonam jest antybiotykiem β-laktamowym należącym do monobaktamów. Jedną z istotnych właściwości tej cząsteczki jest względna stabilność wobec hydrolizy przez metalo-β-laktamazy - MBL, takie jak NDM, VIM czy IMP.

Problem polega na tym, że bakterie produkujące MBL mogą jednocześnie wytwarzać inne β-laktamazy serynowe, zdolne do hydrolizy aztreonamu.

Awibaktam nie jest inhibitorem metalo-β-laktamaz. Jego rola polega na hamowaniu odpowiednich serynowych β-laktamaz, dzięki czemu może chronić aztreonam przed ich działaniem.

Takie połączenie jest szczególnie istotne podczas oceny odpowiednich wielolekoopornych Enterobacterales, w tym izolatów wytwarzających określone karbapenemazy.

Sam wynik AZA nie identyfikuje jednak rodzaju karbapenemazy. Wykrywanie NDM, VIM, IMP, KPC, OXA-48-like lub innych mechanizmów wymaga odpowiedniego testu fenotypowego lub molekularnego.

Stałe 4 µg/ml awibaktamu - jak czytać zapis 0,016/4-256/4?

Zapis AZA 0,016/4-256/4 oznacza, że wzdłuż paska:

• stężenie aztreonamu zmienia się od 0,016 do 256 µg/ml,
• stężenie awibaktamu pozostaje stałe i wynosi 4 µg/ml.

Nie jest to więc gradient dwóch substancji zmieniających się równolegle w tej samej proporcji.

Przykładowy wynik MIC 2/4 µg/ml oznacza zahamowanie wzrostu przy 2 µg/ml aztreonamu w obecności 4 µg/ml awibaktamu.

Zakres zastosowania - Enterobacterales

Aktualne IFU Liofilchem® dla 920891 definiuje zakres oznaczenia jako Enterobacterales.

Dlatego produktu nie należy ogólnie opisywać jako paska do wszystkich bakterii Gram-ujemnych. W ramach Enterobacterales badane mogą być odpowiednie izolaty należące między innymi do rodzajów takich jak:

• Escherichia,
• Klebsiella,
• Enterobacter,
• Citrobacter,
• Serratia,
• inne Enterobacterales objęte właściwą metodą i kryteriami interpretacyjnymi.

Aktualne breakpointy EUCAST dla AZA dotyczą Enterobacterales. Nie należy przenosić ich automatycznie na inne bakterie Gram-ujemne.

Test wykonuje się z czystego izolatu - nie bezpośrednio z próbki

MTS™ Aztreonam-avibactam nie jest testem przeznaczonym do bezpośredniego badania próbki klinicznej.

Przed wykonaniem oznaczenia mikroorganizm powinien zostać wyizolowany na odpowiednim nieselektywnym podłożu, np. agarze z krwią lub TSA.

Jeżeli uzyskano hodowlę mieszaną, należy wybrać odpowiednie kolonie i uzyskać czystą kulturę przed wykonaniem AST.

Liofilchem zaleca stosowanie odpowiednio świeżej hodowli - typowo nie starszej niż około 24 godziny, o ile konkretny mikroorganizm nie wymaga dłuższego czasu do uzyskania odpowiedniego wzrostu.

Mueller-Hinton Agar do oznaczania MIC

Dla AZA aktualne IFU jednoznacznie wskazuje Mueller-Hinton Agar.

Podłoże stosowane do AST powinno charakteryzować się właściwymi parametrami jakościowymi. Liofilchem wskazuje między innymi:

• grubość warstwy agaru: 4,0 ±0,5 mm,
• pH: 7,3 ±0,1,
• dobry i równomierny wzrost badanego mikroorganizmu,
• powtarzalność pomiędzy seriami podłoża.

Nieprawidłowa grubość agaru, skład medium lub jego pH mogą wpływać na dyfuzję antybiotyku oraz odczytywaną wartość MIC.

W BestLabs dostępny jest Thermo Scientific™ Oxoid™ Mueller-Hinton Agar do badań lekowrażliwości. Przed zestawieniem konkretnego podłoża z paskiem należy zawsze zweryfikować jego kwalifikację do stosowanej metody AST.

Przygotowanie inokulum - 0,5 McFarlanda

Dla Enterobacterales producent wskazuje przygotowanie zawiesiny w 0,85% NaCl do 0,5 McFarlanda.

Dla szczepów o wyraźnie śluzowym charakterze producent wskazuje 1 McFarlanda.

Aktualne IFU podaje, że prawidłowo przygotowane standardowe inokulum powinno odpowiadać w przybliżeniu 1-2 × 10⁸ CFU/ml. Jednocześnie producent zaznacza, że sama zgodność wizualna ze wzorcem McFarlanda nie gwarantuje automatycznie właściwej liczby żywych komórek.

Do przygotowania inokulum można wykorzystać Liofilchem® Physiological Solution 0,85% NaCl, a do kontroli mętności odpowiedni densytometr laboratoryjny.

Skrócona procedura wykonania oznaczenia AZA MTS™

Powyższy opis jest skrótem informacyjnym i nie zastępuje aktualnego IFU Liofilchem®, procedury AST ani SOP laboratorium.

Jak odczytać MIC dla aztreonamu-awibaktamu?

Dla AZA producent wskazuje odczyt przy całkowitym - 100% - zahamowaniu widocznego wzrostu.

MIC odczytuje się w miejscu, w którym brzeg elipsy zahamowania przecina skalę paska.

Przy interpretacji należy uwzględnić kilka istotnych reguł:

• mgiełkę wzrostu oraz makro- lub mikrokolonie znajdujące się w odległości do 3 mm od paska należy traktować jako wzrost,
• jeżeli elipsa przecina dwie różne wartości po przeciwnych stronach paska, należy odczytać wartość wyższą,
• jeżeli różnica pomiędzy stronami przekracza jedno dwukrotne rozcieńczenie, test należy powtórzyć,
• jeżeli wzrost występuje w całym zakresie gradientu, wynik raportuje się jako ≥ najwyższej wartości skali,
• jeżeli elipsa przecina pasek poniżej najniższej wartości, wynik raportuje się jako < najniższej wartości skali.

Wartości pośrednie między dwukrotnymi rozcieńczeniami

Pasek gradientowy może generować odczyty znajdujące się pomiędzy standardowymi wartościami dwukrotnych rozcieńczeń stosowanymi w tabelach breakpointów.

Przed kategoryzacją wyniku Liofilchem zaleca zaokrąglenie wartości do kolejnego wyższego standardowego dwukrotnego rozcieńczenia.

Przykładowo:

Producent wskazuje również, że odczyt 0,125 µg/ml może być raportowany jako 0,12 µg/ml.

Aktualne breakpointy EUCAST 2026

Na dzień przygotowania opisu aktualna jest tabela EUCAST Clinical Breakpoint Tables v16.1.

Dla Enterobacterales i aztreonamu-awibaktamu stosowane są następujące wartości MIC:

Breakpoint należy zawsze sprawdzić w aktualnej tabeli EUCAST bezpośrednio przed kategoryzacją wyniku. Producent sam zaznacza w IFU, że tabela zamieszczona w dokumentacji urządzenia może z czasem stać się nieaktualna.

EUCAST a CLSI - nie mieszać systemów interpretacji

W 2026 r. dostępne są również kryteria CLSI M100 Ed36 dotyczące aztreonamu-awibaktamu dla Enterobacterales.

Laboratorium powinno stosować jeden właściwie wdrożony system interpretacyjny zgodny z obowiązującą procedurą. Nie należy łączyć breakpointów EUCAST i CLSI w obrębie jednego wyniku.

Kontrola jakości AZA MTS™

Aktualne IFU Liofilchem® określa następujące zakresy QC dla produktu Aztreonam-avibactam AZA:

Producent wskazuje, że wyników izolatów klinicznych nie należy raportować, jeżeli wynik odpowiedniej kontroli jakości znajduje się poza wymaganym zakresem.

Materiały do QC można dobrać w kategorii szczepy kontrolne.

Charakterystyka wydajności testu

W aktualnym IFU producent przedstawia badanie porównawcze względem referencyjnej metody mikrorozcieńczeń w bulionie - BMD.

Dla 300 klinicznych izolatów Enterobacterales uzyskano:

• Essential Agreement - EA: 93,7%,
• bias: -4,4%.

Essential Agreement oznaczał zgodność wyniku MTS™ z metodą referencyjną dokładnie lub w zakresie ±1 dwukrotnego rozcieńczenia.

W badaniach producenta powtarzalność oraz odtwarzalność dla ocenianych paneli wyniosły 100% wyników w zakresie jednego dwukrotnego rozcieńczenia od wyników referencyjnej mikrodylucji.

Parametry te opisują wyniki walidacji konkretnego urządzenia w określonych warunkach i nie stanowią gwarancji identycznej wydajności niezależnie od jakości podłoża, inokulum i wykonania procedury.

MTS™ a referencyjna metoda BMD

MTS™ jest komercyjną metodą gradientową wykonywaną na agarze. Nie jest tym samym co referencyjna metoda mikrorozcieńczeń w bulionie.

Referencyjne oznaczanie aktywności leków wobec szybko rosnących bakterii tlenowych opisują między innymi odpowiednie dokumenty CLSI oraz ISO 20776-1.

Metoda gradientowa zapewnia wygodny bezpośredni odczyt MIC, jednak przy wynikach nietypowych, granicznych lub wymagających szczególnego potwierdzenia laboratorium powinno postępować zgodnie z obowiązującymi zaleceniami dotyczącymi konkretnego przypadku.

Przechowywanie - dla AZA wymagane -20°C

Ogólna instrukcja MTS™ obejmuje różne antybiotyki i podaje zakres przechowywania nieotwartych produktów od -20°C do +8°C, jednocześnie wyraźnie nakazując stosowanie temperatury podanej dla konkretnego produktu.

W przypadku AZA należy więc:

• stosować temperaturę wskazaną na etykiecie konkretnej partii,
• dla aktualnej instrukcji AZA przyjmować -20°C,
• chronić paski przed wilgocią,
• chronić przed nadmiernym ciepłem,
• unikać silnego światła,
• unikać dużych wahań temperatury.

Przed otwarciem schłodzonego lub zamrożonego opakowania producent zaleca pozostawienie go na około 30 minut do osiągnięcia temperatury pokojowej. Kondensacja wilgoci powinna całkowicie zniknąć przed otwarciem koperty.

Indywidualne opakowanie i desykant

Numer katalogowy 920891 jest wariantem 10-testowym. Każdy pasek znajduje się w oddzielnej kopercie z materiałem osuszającym.

Takie rozwiązanie pozwala otworzyć tylko test potrzebny w danym momencie i ogranicza narażenie pozostałych pasków na:

• wilgoć,
• kondensację,
• zmiany temperatury,
• warunki środowiskowe mogące przyspieszać degradację substancji przeciwdrobnoustrojowej.

Po otwarciu indywidualnej koperty pasek należy przeznaczyć do natychmiastowego jednorazowego użycia.

Najczęstsze źródła nieprawidłowego wyniku MIC

Na wartość MIC mogą wpływać błędy przedanalityczne i analityczne. Producent wskazuje między innymi:

• zbyt małą gęstość inokulum - możliwy zbyt niski MIC,
• zbyt dużą gęstość inokulum - możliwy zbyt wysoki MIC,
• degradację substancji przeciwdrobnoustrojowej wskutek niewłaściwego przechowywania,
• nadmiernie mokrą powierzchnię agaru,
• nierównomierne zaszczepienie,
• nieprawidłowe wysuszenie przed aplikacją paska,
• nieprawidłową jakość lub parametry Mueller-Hinton Agar,
• przesunięcie paska po aplikacji,
• nieprawidłowe warunki inkubacji.

Jeżeli punkt końcowy jest trudny do jednoznacznego odczytania, a szczególnie gdy różnica pomiędzy obiema stronami elipsy przekracza jedno dwukrotne rozcieńczenie, test należy powtórzyć zgodnie z IFU.

Ograniczenia zastosowania

Aktualne IFU Liofilchem® wskazuje kilka istotnych ograniczeń:

• paski nie są przeznaczone do bezpośredniego badania próbki klinicznej,
• oznaczenie wykonuje się na wyizolowanej, czystej kulturze,
• wynik MIC jest wynikiem in vitro,
• interpretacja musi korzystać z aktualnych breakpointów,
• produkt jest przeznaczony dla odpowiednich Enterobacterales,
• sam wynik nie identyfikuje mechanizmu oporności,
• sam MIC nie zastępuje oceny klinicznej,
• aktualne IFU wskazuje, że urządzenie nie jest przeznaczone do zarządzania leczeniem pacjentów cierpiących na stan lub chorobę zagrażającą życiu.

Decyzje kliniczne pozostają odpowiedzialnością lekarza i powinny uwzględniać między innymi wynik AST, identyfikację drobnoustroju, sytuację kliniczną oraz właściwości farmakokinetyczne i farmakodynamiczne leku.

IVD, bezpieczeństwo i profesjonalne zastosowanie

Liofilchem® Aztreonam-avibactam AZA 920891 jest wyrobem do diagnostyki in vitro przeznaczonym wyłącznie do profesjonalnego użytkowania laboratoryjnego.

Pasek jest przeznaczony do jednorazowego użycia. Nie należy stosować produktu w przypadku uszkodzenia koperty, przekroczenia terminu ważności lub podejrzenia niewłaściwych warunków przechowywania.

Po wykonaniu testu pasek, płytka i pozostałe materiały mające kontakt z hodowlą należy traktować jako materiał potencjalnie zakaźny i dekontaminować oraz usuwać zgodnie z procedurami laboratorium.

GLP, SOP, LIMS i dokumentacja AST

MTS™ może stanowić element workflow wykonywanego w laboratorium funkcjonującym zgodnie z GLP, zatwierdzonym SOP i systemem zarządzania jakością, pod warunkiem prawidłowego wdrożenia i kontroli metody.

W dokumentacji lub systemie LIMS można rejestrować między innymi:

• identyfikację izolatu,
• gatunek mikroorganizmu,
• numer katalogowy 920891,
• numer LOT paska,
• termin ważności,
• numer partii Mueller-Hinton Agar,
• gęstość inokulum,
• temperaturę i czas inkubacji,
• surowy odczyt MTS™,
• wartość MIC po właściwym zaokrągleniu,
• zastosowaną wersję EUCAST lub CLSI,
• wynik S/I/R, jeżeli dla danego organizmu istnieją właściwe kryteria,
• wyniki kontroli jakości.

Samo zastosowanie paska MTS™ nie zapewnia automatycznej zgodności badania z EUCAST, CLSI, ISO 20776-1, GLP ani innym standardem. Zgodność zależy od kompletnego, prawidłowo zweryfikowanego procesu AST.

Zastosowanie

Liofilchem® Aztreonam-avibactam AZA 0,016/4-256/4 MTS™ 920891 jest przeznaczony przede wszystkim do:

• ilościowego oznaczania MIC aztreonamu-awibaktamu,
• badania wrażliwości klinicznych izolatów Enterobacterales,
• AST - antimicrobial susceptibility testing,
• oceny izolatów wielolekoopornych,
• laboratoriów mikrobiologii klinicznej,
• laboratoriów referencyjnych,
• monitorowania fenotypów oporności,
• kontroli jakości badań lekowrażliwości,
• profesjonalnych procedur dotyczących odpowiednich Enterobacterales produkujących mechanizmy oporności na β-laktamy.

FAQ - Liofilchem® Aztreonam-avibactam AZA 0,016/4-256/4

Liofilchem® Aztreonam-avibactam AZA MTS™ w ofercie BestLabs

Liofilchem® AZA 0,016/4-256/4, ref. 920891 to ilościowy test gradientowy umożliwiający bezpośredni odczyt MIC aztreonamu w obecności 4 µg/ml awibaktamu wobec Enterobacterales.

Zakres aztreonamu 0,016-256 µg/ml, 15 dwukrotnych poziomów gradientu, indywidualne pakowanie pasków oraz bezpośrednia skala MIC wspierają profesjonalne oznaczanie lekowrażliwości w laboratoriach mikrobiologicznych i referencyjnych.

Do wykonania kompletnego workflow sprawdź Mueller-Hinton Agar, Physiological Solution 0,85% NaCl, densytometry oraz szczepy kontrolne.

Pełną ofertę produktów tego typu znajdziesz w kategorii gradientowe paski diagnostyczne do oznaczania MIC.